一种祁门白术多糖及其制备方法和应用

本发明属于中药多糖，特别涉及一种祁门白术多糖及其制备方法和应用。

背景技术：

1、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,uc)是一种慢性非特异性炎症，主要表现为肠道病理性粘膜损伤、溃疡、结肠收缩、腹泻和血便。目前临床上治疗uc常用的药物为美沙拉嗪，柳氮磺吡啶等，但是这些药物在治疗疾病的同时也会带来一定的副作用，比如引起头痛，导致慢性肝炎等，因此迫切需要寻找能够充分发挥治疗作用且具有较低不良预后的治疗药物。

2、中药多糖因其作用温和，而逐渐进入科学家们的视野。如何能够高效、高纯度的从中药材中提取多糖是制约其工业化应用的首要问题。目前中药多糖的提取方法有溶剂提取法、酶解法和超声提取法等，这些方法在不同中药多糖的提取中具有各自的优势。研究不同多糖及其不同提取方法的结果表明，提取方法的不同除了会影响多糖提取率外，多糖化学结构分析以及药理活性也会受一定程度的影响。另一方面，中药多糖结构复杂，可分为一、二、三和四级结构，多糖的每级结构都与其生物活性密切相关。一级结构包括多糖的分子量，单糖组成及比例，残基的绝对构型(d型或l型)、成环类型(呋喃环或吡喃环)、单糖残基的异头异构形式(α-或β-)、连接方式，以及羟基取代位置等。二、三和四级结构为多糖的高级结构，是在多糖一级结构基础上，通过大量的非共价相互作用(氢键、离子键、范德华力和疏水作用)而形成的空间结构。值得注意的是一级结构很大程度上决定高级结构，是研究其生物活性的基础。然而，不同种类的中药多糖具有不同的功效，而相同种类、不同产地的中药其多糖功效、含量等也不同。目前尚缺少对于溃疡性结肠炎具有良好治疗效果的，且易于实现产业化制备的中药多糖。

技术实现思路

1、鉴于现有技术的不足，本发明提供一种祁门白术多糖及其制备方法和应用，该祁门白术多糖结构新颖，治疗溃疡性结肠炎疗效好，副作用少且易于制备。

2、本发明的第一方面，提供一种祁门白术多糖，其重均分子量为3000～4000da，结构式为：β-d-fruf-[(2→1)-β-d-fruf]n-(2→1)-α-d-glcp，以摩尔比计，glcp:fruf＝1:10～20；其中，fruf代表果糖残基，glcp代表葡萄糖残基，2→1代表糖苷键。

3、根据本发明的具体实施方式，祁门白术多糖的重均分子量为3267da。

4、根据本发明的具体实施方式，以摩尔比计，glcp:fruf＝1:13。

5、本发明的第二方面，提供前述的祁门白术多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。

6、根据本发明的具体实施方式，药物为以下1)～3)中的任意一种：1)提高结肠中短链脂肪酸含量的药物；2)抑制组蛋白脱乙酰基酶2活性的药物；3)提高单羧酸转运蛋白含量的药物。

7、本发明的第三方面，提供前述的祁门白术多糖的制备方法，包括：将祁门白术干燥后粉碎，然后加入亲脂溶剂进行第一提取，将提取产物过滤取沉淀，干燥后，得到脱脂祁门白术；向脱脂祁门白术中加水进行第二提取，将提取产物浓缩后进行醇沉，离心取沉淀，得到祁门白术多糖粗品。

8、根据本发明的具体实施方式，亲脂溶剂为85～95％v/v浓度的乙醇，第一提取的条件包括：提取的料液比为20g:400～600ml，回流提取1～3h。

9、根据本发明的具体实施方式，第二提取的条件包括：提取的料液比为1g:20～30ml，提取的温度为85～95℃，提取的时间为2～3h。

10、根据本发明的具体实施方式，第二提取的条件包括：提取的料液比为1g:25ml，提取的温度为85℃，提取的时间为2.5h。

11、根据本发明的具体实施方式，制备方法还包括：对祁门白术多糖粗品进行脱淀粉、脱蛋白、脱色以及柱层析分离处理，得到祁门白术多糖纯品。

12、本发明的有益效果为：

13、本发明提供的祁门白术多糖，是一种具有特定分子量以及结构组成的新型多糖，动物实验显示，其可以增加结肠内容物中的短链脂肪酸(尤其是丁酸盐)的含量，并能够上调结肠组织细胞中mct-1的表达，增强短链脂肪酸向结肠组织细胞的转运，使丁酸盐可以通过抑制hdac2来减少炎性细胞cd68+的数量，抑制炎症因子(il-6、tl-1β和tnf-α)的水平，有效缓解uc小鼠的体重减少的情况，降低dai指数评分，改善结肠病理状态，进而对溃疡性结肠炎产生治疗作用。本发明祁门白术多糖用于治疗溃疡性结肠炎疗效显著，副作用小，制备方法简单，原料成本低，易于实现工业化生产。

技术特征：

1.一种祁门白术多糖，其特征在于，所述祁门白术多糖的重均分子量为3000～4000da，结构式为：β-d-fruf-[(2→1)-β-d-fruf]n-(2→1)-α-d-glcp，以摩尔比计，glcp:fruf＝1:10～20；

2.根据权利要求1所述的祁门白术多糖，其特征在于，所述祁门白术多糖的重均分子量为3267da。

3.根据权利要求1所述的祁门白术多糖，其特征在于，以摩尔比计，glcp:fruf＝1:13。

4.权利要求1～3之一所述的祁门白术多糖在制备治疗溃疡性结肠炎的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物为以下1)～3)中的任意一种：

6.一种权利要求1～3之一所述的祁门白术多糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述亲脂溶剂为85～95％v/v浓度的乙醇，所述第一提取的条件包括：提取的料液比为20g:400～600ml，回流提取1～3h。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述第二提取的条件包括：提取的料液比为1g:20～30ml，提取的温度为85～95℃，提取的时间为2～3h。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述第二提取的条件包括：提取的料液比为1g:25ml，提取的温度为85℃，提取的时间为2.5h。

10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：对祁门白术多糖粗品进行脱淀粉、脱蛋白、脱色以及柱层析分离处理，得到祁门白术多糖纯品。

技术总结本发明公开了一种祁门白术多糖及其制备方法和应用。该祁门白术多糖的重均分子量为3000～4000Da，结构式为：β‑D‑Fruf‑[(2→1)‑β‑D‑Fruf]n‑(2→1)‑α‑D‑Glcp，以摩尔比计，Glcp:Fruf＝1:10～20；其中，Fruf代表果糖残基，Glcp代表葡萄糖残基，2→1代表糖苷键。本发明祁门白术多糖是一种具有特定分子量以及结构组成的新型多糖，具有增加结肠内容物中的短链脂肪酸的含量及其向结肠组织细胞的转运等多种药理作用，用于治疗溃疡性结肠炎疗效显著，副作用小，制备方法简单，易于实现工业化生产。技术研发人员：汪电雷,刘森,郝素素,杨侯媛,陈乃东,孙念霞,方伟受保护的技术使用者：安徽中医药大学技术研发日：技术公布日：2024/11/14