HIV疫苗免疫原

本公开涉及免疫原性多肽，且尤其是能够刺激对人免疫缺陷病毒(hiv)的免疫应答的免疫原性多肽。

背景技术：

1、从感染了hiv-1的人类供体克隆的单细胞抗体表明，广泛中和抗hiv-1抗体(bnab)的独特之处在于它们是高度体细胞突变的。此外，高度的体细胞突变对于与天然hiv-1 env的结合和bnab中和活性至关重要。大量突变的聚集表明，bnab进化以应对体细胞超突变的迭代和生发中心(gc)中的选择。如人类的前瞻性研究所揭示的，bnab这样做是为了应对抗体压力引起的病毒逃逸变体。总之，这些观察表明，用以激发(elicit)bnab的疫苗接种需要一系列序贯(sequential)免疫原，其从诱导携带bnab的种系前体的b淋巴细胞的扩增的免疫原开始。

2、序贯免疫(sequential immunization)可以指导(shepherd)bnab开发的想法已通过携带人bnab的推断种系(inferred germline，igl)前体的遗传修饰的小鼠实验得到证实。然而，用于启动应答的启动免疫原(priming immunogen)未能激活和扩增在具有多克隆抗体库(repertoires)的动物中表达bnab的推断前体(inferred precursor)的b细胞。事实上，几乎所有bnab的igl都无法结合天然样hiv-1免疫原或中和hiv-1毒株。因此，hiv-1疫苗开发的关键目标已在于设计在具有多克隆库的动物(包括灵长类动物)中募集表达bnab前体的b细胞至gc反应的免疫原。

3、为此，针对免疫原设计的种系靶向方法已聚焦在产生以高亲和力与特定bnab前体结合的免疫原上，其基本原理是b细胞募集至gc部分取决于受体对抗原的亲和力。然而，这种方法在质量和数量上有效地限制了所募集b细胞的库。而且，它无法解释以下发现：每个gc均能容纳(accommodate)具有宽范围亲和力的多种不同的创始(founder)b细胞，并且gc进入受限于竞争而非绝对亲和力。一种替代方法是设计增强所靶向表位的可用性同时掩蔽脱靶位点的免疫原。这种方法与种系靶向的不同之处在于它与特定种系抗体对抗原的亲和力无关。相反，它旨在募集和扩增对靶位点特异的不同组的前体。两种方法皆旨在产生扩增的b细胞克隆，其随后可以通过序贯免疫原而被加强，以指导bnab产生。迄今为止，这些方法均未显示能在野生型动物中扩增对目标hiv-1靶标特异的b细胞克隆。

4、因此，迫切需要能够刺激对人免疫缺陷病毒(hiv)的免疫应答的免疫原，例如通过扩增对目标hiv-1靶标特异的b细胞克隆的方式。

技术实现思路

1、本文件中描述的多个实施方案通过提供hiv免疫原及其用途来解决上述未满足的需求和/或其他需求。

2、在一个方面，本公开涉及一种刺激有此需要的受试者的免疫应答(例如，hiv免疫应答)的免疫原。该免疫原包含具有与选自由seq id no：2、4、6、8、11和13组成的组的序列至少75％同一的序列的多肽。多肽包含在对应于seq id no：1的n133、n137和n156的位置的取代。在一个实例中，多肽包含n156q取代或n156的保守性取代。在另一个实例中，多肽包含v134y、t135a、i138l、t139l、d140s、d141n、t320f、q328m、t415v取代或其保守性取代。

3、上述免疫原以(例如kd约50μm或更小的)亲和力与广泛中和抗体结合。广泛中和抗体的实例可包括10-1074和pgt121广泛中和抗体。

4、编码上述多肽的分离的核酸、包含该核酸的载体和包含该核酸的宿主细胞也在本发明的范围内。宿主细胞可以用于生产多肽的方法中。该方法包括在允许表达由核酸编码的多肽的条件下在培养基中培养宿主细胞，和从培养的细胞或细胞的培养基中纯化多肽。

5、在另一个方面，本公开提供了包含至少一种上述多肽的蛋白复合物和包含至少一种上述多肽的病毒颗粒。

6、在另一个方面，本公开提供了一种刺激有此需要的受试者的免疫应答的免疫原性组合物。该免疫原性组合物包含(i)上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒；和(ii)药学上可接受的载体。该方法可以进一步包括施用组合物两次或更多次。组合物的施用可以导致血清中能够识别v3-聚糖表位的广泛中和抗体的数量增加。

7、在另一个方面，本公开提供了一种刺激有此需要的受试者的免疫应答的方法。该方法包括向受试者施用有效量的包含上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒样颗粒(vlp)或其组合的组合物。

8、在另一个方面，本公开提供了一种治疗或预防有此需要的受试者中的hiv感染的方法。该方法包括向受试者施用治疗有效量的上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒，或其组合。在一些实施方案中，该方法还可包括向受试者施用治疗有效量的抗病毒剂。

9、在另一个方面，本公开提供了上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒或其组合在制备用于治疗或预防受试者中的hiv感染的药物中的用途。

10、在另一个方面，本公开提供了一种检测或分离感染了hiv-1的受试者中的hiv-1结合抗体的方法。该方法包括：(i)提供上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒，或其组合；(ii)使免疫原性组合物与一定量的来自受试者的体液接触；和(iii)检测hiv-1结合抗体与多肽的结合，从而检测或分离受试者中的hiv-1结合抗体。

11、在另一个方面，本公开提供了一种用于刺激受试者的免疫应答的试剂盒。该试剂盒包含(i)一个或多个单位剂量的上述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒；(ii)施用所述多肽、核酸、宿主细胞、蛋白复合物或病毒颗粒的说明书；和(iii)任选地，佐剂。

12、本公开还提供了一种分离的抗hiv抗体或其抗原结合部分，其包含具有与表4、5、6、7、9、10和11中列出的多肽序列至少75％同一的序列的互补决定区。

13、包含所述分离的抗hiv抗体或其抗原结合部分，以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物也在本公开范围内。

14、在另一个方面，本公开提供了一种预防或治疗hiv感染或与hiv相关的疾病的方法，包括以下步骤：(i)鉴定需要这样的预防或治疗的患者，和(ii)向所述患者施用包含治疗有效量的至少一种上述抗hiv抗体或其抗原结合部分的第一治疗剂。本公开进一步提供了一种包含药学上可接受的剂量单位的药学有效量的至少一种上述分离的抗hiv抗体或其抗原结合部分的试剂盒。

15、在以下描述中详述了本发明的一个或多个实施方案。根据说明书和权利要求书，本发明的其他特征、目的和优点将是显而易见的。

技术特征：

1.一种分离的抗hiv抗体或其抗原结合片段，其包含选自由seq id no：22-49和110-283组成的组的重链互补决定区(cdr)3(cdrh3)和选自由seq id no：50-95和284-406组成的组的轻链cdr3(cdrl3)。

2.如权利要求1所述的分离的抗hiv抗体或其抗原结合片段，其结合具有选自由seq idno：2、4、6、8、11和13组成的组的氨基酸序列的多肽。

3.如权利要求2所述的分离的抗hiv抗体或其抗原结合片段，其包含下述1)至57)的氨基酸序列的任一组：

4.一种药物组合物，其包含权利要求1-3任一项所述的分离的抗hiv抗体或其抗原结合片段和药学上可接受的载体或赋形剂。

5.用于预防或治疗hiv感染或hiv相关疾病的方法的药物组合物，其中所述方法包括以下步骤：

6.如权利要求5所述的药物组合物，其中所述方法进一步包括施用第二治疗剂。

7.一种试剂盒，其包括药学上可接受的剂量单位的药学有效量的至少一种权利要求1-3任一项所述的分离的抗hiv抗体或其抗原结合片段。

技术总结本公开涉及HIV疫苗免疫原，具体而言，半公开提供了HIV免疫原及其在受试者中产生免疫应答的用途。还公开了分离抗HIV抗体的方法及其用途。本公开进一步提供了使用所公开的HIV免疫原和/或抗体治疗或预防受试者中的人免疫缺陷病毒1型(HIV‑1)感染的方法。技术研发人员：米歇尔·努森兹韦格,帕梅拉·J·比约克曼,A·埃斯科拉诺,H·格里斯蒂克受保护的技术使用者：洛克菲勒大学技术研发日：技术公布日：2025/1/6