一类具有诱导Treg作用的多肽及其在治疗自身免疫性疾病中的应用

本发明涉及生物医学领域，主要涉及一类具有诱导treg作用的多肽及其在治疗自身免疫性疾病中的应用，所述血吸虫来源的多肽，具有诱导treg细胞、改善宿主免疫相关疾病的功能，可用于银屑病、肠炎等免疫性疾病的预防治疗领域。

背景技术：

1、大量研究表明，感染血吸虫或暴露于血吸虫衍生抗原，能够诱导b细胞产生il-10，或是通过树突状细胞(dc)、自然杀伤t细胞(nkt)等细胞的相互作用来影响t细胞的增殖分化，其中最重要的是调节性t细胞(treg)。由于treg细胞在外周耐受中的作用，能够参与维持免疫自我耐受和体内平衡。从而缓解或治疗自身免疫性疾病，包括1型糖尿病、关节炎等。

2、某些蠕虫可以直接激活宿主的treg细胞，或者通过诱导宿主细胞产生tgf-β，促进treg细胞增殖，从而发挥抑制炎症的功能。作为treg细胞的主要转录因子，foxp3可调节treg细胞的功能和可塑性。抑制或降低foxp3会显著削弱其产生的免疫抑制效应，引起免疫调节功能的丧失，导致严重的自身免疫性疾病。treg细胞疗法目前正在进行积极的临床前和临床研究，旨在治疗自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(sle)、器官移植和移植物抗宿主病等。与生物制剂相比，治疗性肽表现出较低的免疫原性，且具有较低的生产成本，已有很多药物肽在糖尿病、心血管疾病、肠道疾病等临床疾病上使用。有科研人员从微生物或寄生虫的分泌蛋白、降解产物中筛选出新肽，将其制备成具有疗效的药物。因此，能诱导调节性细胞增多的虫源性分子，是值得探索开发的药物肽来源。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供能够诱导tregs的多肽，该多肽可以有效诱导免疫抑制，应用于银屑病、炎症性肠病等自身免疫性疾病。

2、为了实现上述目的，本发明具体采用如下技术方案：

3、本发明的第一个目的是提供一种多肽，所述多肽为sjbt，所述sjbt包括seq idno.1所示氨基酸序列：dkevia。

4、进一步的，编码所述多肽sjbt的核苷酸序列如seq id no.2所示。

5、本发明的第二个目的是提供前述多肽的衍生肽，所述衍生肽的氨基酸通式为r-[dkevia]-r’，所述r、r’各自独立的为(氨基酸)n，n＝0～7。

6、进一步的，所述衍生肽为氨基酸序列如seq id no.3所示的sjbt-1：kvvlpdkeviak，

7、或氨基酸序列如seq id no.5所示的sjbt-2：teekvvlpdkevia，

8、或氨基酸序列如seq id no.7所示的sjbt-3：vvlpdkeviakek，

9、或氨基酸序列如seq id no.9所示的sjbt-4：dkeviakektekq。

10、进一步的，编码所述sjbt-1的核苷酸序列如seq id no.4所示：

11、aaagtggtgctgccggataaagaagtgattgcgaaa；

12、编码所述sjbt-2的核苷酸序列如seq id no.6所示：

13、accgaagaaaaagtggtgctgccggataaagaagtgattgcg；

14、编码所述sjbt-3的核苷酸序列如seq id no.8所示：

15、gtggtgctgccggataaagaagtgattgcgaaagaaaaa；

16、编码所述sjbt-4的核苷酸序列如seq id no.10所示：

17、gataaagaagtgattgcgaaagaaaaaaccgaaaaacag。

18、进一步的，所述sjbt及其延生肽均来源于日本血吸虫的虫卵。

19、进一步的，所述sjbt及其延生肽均可以通过日本血吸虫卵细胞破碎分离纯化，或通过基因工程方法人工表达，或通过化学合成方法获得。

20、本发明的第三个目的是提供前述多肽或前述的衍生肽在体内和/或体外促进treg细胞增殖中的应用。

21、本发明的第四个目的是提供前述多肽或前述的衍生肽在制备预防和/或治疗通过treg细胞调控的疾病中的应用。

22、本发明的第五个目的是提供前述多肽或前述的衍生肽在制备治疗免疫性疾病的药物中的应用。

23、本发明的第六个目的是提供前述多肽或前述的衍生肽在制备治疗银屑病的药物应用。

24、本发明的第七个目的是提供前述多肽或前述的衍生肽在制备治疗炎症性肠病中的药物应用。

25、作为本申请的优选技术方案，上述药物中可以包括药学上可接受的载体，所述药学上可接受的载体选自填充剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂中的一种或多种。

26、作为本申请的优选技术方案，上述药物剂型包括口服制剂、注射制剂、经皮给药制剂或黏膜给药制剂。

27、作为本申请的优选技术方案，上述药物剂型包括滴剂、口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、膜剂、凝胶剂、散剂、乳剂、自乳化制剂、滴丸剂、栓剂、气雾剂、喷雾剂、粉雾剂、贴剂、贴膏剂、溶液剂、软膏剂或乳膏剂等。

28、有益效果：

29、(1)本发明所述的多肽具有增强cd4+cd25+调节性t细胞的抑制效应；

30、(2)本发明所述的多肽处理人pbmc后，显著增加cd4+cd25+cd127low t细胞的数量，增强tregs的抑制功能。该多肽体外处理小鼠脾单个核细胞后，显著增加cd4+cd25+foxp3+t细胞的数量。

31、(3)体内实验进一步证实上述肽可缓解与treg及炎症反应相关的疾病，例如银屑病和炎症性肠病，并改善炎症状态。

32、综上，本发明制备的血吸虫来源肽可缓解银屑病导致的皮角化过度，减轻肠炎症状，显著减少相应部位淋巴细胞浸润，且无显著药物毒性和溶血活性，具有明显诱导treg增多、增强免疫抑制的作用，可用于银屑病、炎症性肠炎等免疫性/炎症性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用。

技术特征：

1.一种多肽，其特征在于，所述多肽为sjbt，所述sjbt包括seq id no.1所示氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的多肽，其特征在于，编码所述多肽sjbt的核苷酸序列如seq idno.2所示。

3.权利要求1所述多肽的衍生肽，其特征在于，所述衍生肽的氨基酸通式为r-[dkevia]-r’，所述r、r’各自独立的为(氨基酸)n，n＝0～7。

4.根据权利要求3所述的衍生肽，其特征在于，所述衍生肽为氨基酸序列如seq idno.3所示的sjbt-1，或氨基酸序列如seq id no.5所示的sjbt-2，或氨基酸序列如seq idno.7所示的sjbt-3，或氨基酸序列如seq id no.9所示的sjbt-4。

5.根据权利要求4所述的衍生肽，其特征在于，编码所述sjbt-1的核苷酸序列如seq idno.4所示；编码所述sjbt-2的核苷酸序列如seq id no.6所示；编码所述sjbt-3的核苷酸序列如seq id no.8所示；编码所述sjbt-4的核苷酸序列如seq id no.10所示。

6.权利要求1或2所述多肽或权利要求3至5任意一项权利要求所述的衍生肽在体内和/或体外促进treg细胞增殖中的应用。

7.权利要求1或2所述多肽或权利要求3至5任意一项权利要求所述的衍生肽在制备预防和/或治疗通过treg细胞调控的疾病中的应用。

8.权利要求1或2所述多肽或权利要求3至5任意一项权利要求所述的衍生肽在制备治疗免疫性疾病的药物中的应用。

9.权利要求1或2所述多肽或权利要求3至5任意一项权利要求所述的衍生肽在制备治疗银屑病的药物应用。

10.权利要求1或2所述多肽或权利要求3至5任意一项权利要求所述的衍生肽在制备治疗炎症性肠病中的药物应用。

技术总结本发明涉及一类具有诱导Treg作用的多肽及其在治疗自身免疫性疾病中的应用，具体为血吸虫来源的多肽Sjtb，其相关衍生肽为Sjbt‑1、Sjbt‑2、Sjbt‑3、Sjbt‑4，Sjbt的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，Sjbt‑1的氨基酸序列为SEQ ID NO.3，Sjbt‑2的氨基酸序列为SEQ ID NO.5，Sjbt‑3的氨基酸序列为SEQ ID NO.7，Sjbt‑4的氨基酸序列为SEQ ID NO.9。上述肽可以通过日本血吸虫虫卵破碎后分离纯化、基因工程表达或化学合成等方法获得。体外实验证实上述肽可有效促进小鼠脾单个核细胞和人外周血单个核细胞PBMC中Treg细胞比例的升高；体内实验进一步证实上述肽可缓解小鼠银屑病和炎症性肠病，并能够改善相应炎症。本发明制备的血吸虫来源肽可用于银屑病、炎症性肠炎等免疫性/炎症性疾病的预防治疗药物、保健品或食品添加物中的应用。技术研发人员：季旻珺,熊睿妍,朱昱晓,陈璐,李飞,倪杨玥,徐志鹏受保护的技术使用者：南京医科大学技术研发日：技术公布日：2024/6/18