预测II期和III期结直肠癌预后临床结果的生物标志物、引物组及检测试剂盒的制作方法

本发明属于生物检测，具体涉及预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物、引物组及检测试剂盒。

背景技术：

1、在标准护理下预测癌症治疗结果能力可以帮助医生决定潜在的辅助治疗。例如，如果患者的预后治疗结果较差，可能会给予更积极的辅助治疗。目前，在实践中使用的大多数诊断试验或临床适应症都不是定量的，如免疫组化（ich），它通常在不同的实验室产生不同的结果，这可能是由于试剂不标准和对结果的主观解释所导致的。

2、能够根据复发风险和初始治疗后的临床结果对ii期和iii期结肠直肠癌（crc）患者进行分层，临床医生就能够制定最适合特定患者的化疗方案。目前，辅助化疗是iii期结肠患者的标准护理，但缺乏识别可能不需要奥沙利铂基础化疗的低风险iii期结直肠癌患者的临床数据。对于ii期结直肠癌患者，仅推荐高危患者进行辅助化疗。

3、然而，目前定义高危患者特征的标准还不够充分。对于已知的ii期结直肠癌，导致预后差的预后因素包括肿瘤浸润深度（t分期）、淋巴结数、错配修复（mmr）状态、肿瘤分级、淋巴和血管浸润（lvi）评分，可只有t分期、淋巴结数量和mmr状态有大量的临床证据支持其有限的使用。

4、公司（exact sciences公司）开发了一种12个基因的复发评分检测，即：oncotypedx结肠复发评分试验，该检测基于定量聚合酶链反应qpcr结果的评分系统，能够定量地显示复发风险的可能性。但是，使用单协变量cox回归时，每四分位数范围的复发率评分iqr的风险比hr仅为1.38，而使用多协变量cox回归时，风险比hr为1.43。oncotype dx对结直肠癌的复发评分比目前的临床预测指标t分期和mmr状态差，与检查的淋巴结数量接近。因此，12基因复发评分检测在结直肠癌中的临床应用很低，不常用于临床。

技术实现思路

1、有鉴于此，一方面，一些实施例公开了预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，生物标志物为irs2、trim25、mybl2、krt6b、fmnl2、nat1、fap、myc、inhba。

2、进一步，一些实施例公开了预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，用于ii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、irs2-mybl2、krt6b-fmnl2和inhba-myc的组合。

3、一些实施例公开了预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，其特征在于，用于iii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、krt6b-nat1、fap-myc和inhba-myc的组合。

4、另一方面，一些实施例公开了用于pcr检测预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物的引物组，包括irs2引物组、trim25引物组、krt6b引物组、mybl2引物组、fmnl2引物组、nat1引物组、fap引物组、myc引物组、inhba引物组，上述引物组的序列分别如seq id no.1~18所列。

5、再一方面，一些实施例公开了用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，包含用于pcr检测预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物的引物组。

6、进一步，一些实施例公开的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，用于ii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、irs2-mybl2、krt6b-fmnl2和inhba-myc的组合。

7、一些实施例公开的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，用于iii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、krt6b-nat1、fap-myc和inhba-myc的组合。

8、进一步，一些实施例公开的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，用于测量结直肠癌患者组织样本的生物标志物的循环阈值。

9、一些实施例公开的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，生物标志物的循环阈值转换为结直肠癌rs评分。

10、一些实施例公开的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，ii期结直肠癌公式为（irs2-trim25）+（irs2-mybl2）+（krt6b-fmnl2）+（inhba-myc），若结直肠癌rs评分高于临界值2.589，表明ii期结直肠癌患者在初始治疗后处于预后不良的高风险；iii期结直肠癌公式为（irs2-trim25）+（krt6b-nat1）+（fap-myc）+（inhba-myc），若结直肠癌rs评分高于临界值-0.1355，表明iii期结直肠癌患者的结直肠癌复发风险较高。

11、本发明实施例公开的预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物组、引物组及检测试剂盒，并通过检测结直肠癌生物标志物水平可以得到结直肠癌rs评分，能够有效区分结直肠癌复发风险的高低；可以更好地评估结直肠癌患者的治疗风险和预后，从而为患者提供更加个性化和有效的治疗方案。

技术特征：

1.预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为irs2、trim25、mybl2、krt6b、fmnl2、nat1、fap、myc、inhba。

2.根据权利要求1所述的预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，其特征在于，用于ii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、irs2-mybl2、krt6b-fmnl2和inhba-myc的组合。

3.根据权利要求1所述的预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物，其特征在于，用于iii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、krt6b-nat1、fap-myc和inhba-myc的组合。

4.用于pcr检测权利要求1所述的预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的生物标志物的引物组，其特征在于，包括irs2引物组、trim25引物组、krt6b引物组、mybl2引物组、fmnl2引物组、nat1引物组、fap引物组、myc引物组、inhba引物组，上述引物组的序列分别如seq id no.1~18所列。

5.用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求4所述的引物组。

6.根据权利要求5所述的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于，用于ii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、irs2-mybl2、krt6b-fmnl2和inhba-myc的组合。

7.根据权利要求5所述的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于，用于iii期结直肠癌患者复发风险评估的生物标志物为irs2-trim25、krt6b-nat1、fap-myc和inhba-myc的组合。

8.根据权利要求5所述的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于，用于测量结直肠癌患者组织样本的生物标志物的循环阈值。

9.根据权利要求8所述的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于，生物标志物的循环阈值转换为结直肠癌rs评分。

10.根据权利要求8所述的用于预测ii期和iii期结直肠癌预后临床结果的检测试剂盒，其特征在于：

技术总结本发明实施例公开了预测II期和III期结直肠癌预后临床结果的生物标志物、引物组及检测试剂盒；生物标志物为IRS2、TRIM25、MYBL2、KRT6B、FMNL2、NAT1、FAP、MYC、INHBA。并通过检测结直肠癌生物标志物水平可以得到结直肠癌RS评分，能够有效区分结直肠癌复发风险的高低；II期结直肠癌公式为（IRS2‑TRIM25）+（IRS2‑MYBL2）+（KRT6B‑FMNL2）+（INHBA‑MYC）；III期结直肠癌公式为（IRS2‑TRIM25）+（KRT6B‑NAT1）+（FAP‑MYC）+（INHBA‑MYC），根据评分结果为患者提供更加个性化和有效的治疗方案。技术研发人员：陈利民受保护的技术使用者：天津云检医学检验所有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/1