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用于蛋白质表达和细胞分化的方法和组合物与流程

  • 国知局
  • 2024-09-05 14:41:30

背景技术:

1、转染可以将核酸分子引入真核细胞。转染到细胞中的核酸分子可以促进经转染的细胞或其子代的结构和/或功能性质的变化。具有不同结构和/或功能性质的细胞可以用于各种各样的目的,包括但不限于食品生产、诊断学生产、生物药物生产、细胞疗法、病毒生产、生物传感器、组织工程学或药物发现中。由于缺乏有效性、可扩展性或可靠性,目前可用的转染方法可以是受限的。目前可用的转染方法可能在工业或制造规模上不适用。目前可用的转染方法可被分类为病毒或非病毒方法。使用非病毒载体(例如,基于化学或脂质)的非病毒转染方法可导致高细胞毒性和高百分比的细胞损失。非病毒转染方法可需要高成本来实践。非病毒载体可遭受低转染效率和被引入细胞的核酸的不期望的基因表达。另外,与动物来源的组分相反,非病毒转染方法可需要限制转染效率的用于转染复合物形成的窄范围的物理化学条件。非病毒转染也可使用不是生物可降解的或生物可相容的载剂。使用病毒载体的病毒方法可产生针对病毒载体的免疫原性应答。病毒载体可以是致癌的。病毒载体也可仅允许小的有效载荷(例如,转染核酸的大小)和/或需要高成本来制造。因此,目前基于病毒或非病毒的转染方法在广泛或工业规模应用方面受到限制。

技术实现思路

1、用于各种目的中(包括但不限于食品生产、诊断学生产、生物药物生产、细胞疗法、病毒生产、生物传感器、组织工程学或药物发现中)的细胞的广泛或工业规模应用需要将核酸有效转染到细胞中。使用方法、组合物或试剂盒产生的细胞可以具有转染核酸的期望表达水平。本文提供了用于高效并且能够产生高且稳定的基因表达的转染的方法、组合物和/或试剂盒。本文公开的方法、组合物或试剂盒可以广泛地适用于各种各样的目的、细胞类型和/或条件,而不需要使用动物来源的材料或遗传修饰。本文公开的方法、组合物或试剂盒也可以避免引起免疫原性反应和/或癌症。本文公开的方法、组合物或试剂盒可以具有低细胞毒性。本文公开的方法、组合物或试剂盒可以不使用动物来源的产品,但仍提供高转染效率。本文公开的方法、组合物或试剂盒可以使用生物可降解的或生物可相容的载剂。本文公开的方法、组合物或试剂盒可以允许大的有效载荷(例如,转染核酸的大小)且/或需要低成本来实践/制造。因此,这些方法、组合物或试剂盒可以克服目前可用的病毒或非病毒转染所带来的限制,并促进细胞转染的广泛或工业规模应用。

2、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括糖和核酸分子,其中核酸分子被配置为促进细胞内蛋白质表达的变化;以及被配置为包封或粘附至细胞的聚合材料。在一些实施方案中,聚合材料包括聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括基于多糖的聚合物、基于多肽的聚合物、基于脂质的聚合物或其组合。在一些实施方案中,基于多糖的聚合物包括基于藻酸盐的聚合物、基于结冷胶的聚合物、基于木薯的聚合物、基于玉蜀黍的聚合物、基于玉米淀粉的聚合物、基于黄原胶的聚合物、基于槐豆的聚合物、基于普鲁兰多糖的聚合物、基于葡聚糖的聚合物、基于纤维素的聚合物或其组合。在一些实施方案中,聚合材料被配置为包封细胞。在一些实施方案中,聚合材料包括水凝胶。在一些实施方案中,聚合材料包括2维聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括3维聚合物。在一些实施方案中,聚合材料被配置为是生物可降解的。

3、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括:包括核糖核酸(rna)的核酸分子和糖,核酸分子和糖被配置为共同促进细胞内蛋白质表达的变化。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞分化成中胚层谱系、内胚层谱系或外胚层谱系。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化。在一些实施方案中,细胞的分化包括细胞的转分化或细胞的定向分化。在一些实施方案中,细胞包括体细胞或幼稚细胞。在一些实施方案中,细胞包括脂肪细胞、血管细胞、心脏细胞、软骨细胞、内皮细胞、上皮细胞、造血细胞、肝细胞、肌肉细胞、神经元或骨原细胞。在一些实施方案中,细胞包括肌肉细胞。在一些实施方案中,肌肉细胞包括肌纤维、肌管、肌细胞、成肌细胞、肌源性球状体或肌肉细胞祖细胞。

4、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括:糖和核酸分子,糖和核酸分子被配置为共同促进细胞内蛋白质表达的变化,其中细胞是干细胞,干细胞包括胚胎干细胞、永生化干细胞、间充质干细胞、肌肉祖细胞或诱导多能性干细胞(ipsc)。

5、在一些实施方案中,细胞包括ipsc。在一些实施方案中,核酸分子包括核糖核酸(rna)。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna包括mrna、sarna、erna、ta-rna或其组合。在一些实施方案中,rna编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。在一些实施方案中,rna是单顺反子的。在一些实施方案中,rna是多顺反子的。在一些实施方案中,核酸分子包括mrna。在一些实施方案中,核酸分子包括sarna。在一些实施方案中,核酸分子包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,细胞的多能性降低促进细胞的分化。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子包括第一核酸分子和第二核酸分子,其中第一核酸分子是mrna或sarna,并且其中第二核酸是mirna或sirna。

6、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括核酸分子和修饰的糖,其中核酸分子包括信使核糖核酸(mrna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合;其中修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;并且其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞内蛋白质表达的变化。

7、在一些实施方案中,修饰的糖包括壳聚糖、透明质酸、普鲁兰多糖、肝素、藻酸盐、或其组合或衍生物。在一些实施方案中,修饰的糖包括修饰的壳聚糖。在一些实施方案中,修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、糖酚修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖、二乙基乙胺修饰的糖、二甲基乙胺修饰的糖、季铵修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖、葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括多糖修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖、还原多糖修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,核酸分子编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。在一些实施方案中,核酸分子是单顺反子的。在一些实施方案中,核酸分子是多顺反子的。在一些实施方案中,组合物进一步包括微小核糖核酸(mirna)或沉默核糖核酸(sirna)。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,细胞的多能性降低促进细胞的分化。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子包括第一核酸分子和第二核酸分子,其中第一核酸分子是mrna或sarna,并且其中第二核酸是mirna或sirna。

8、在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖在水溶液中或在中性溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克糖0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子在多聚复合物的表面处或其附近。在一些实施方案中,核酸分子被包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物进一步包括纳米颗粒。在一些实施方案中,核酸分子包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,糖稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。在一些实施方案中,核酸分子包括化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,细胞包括哺乳动物细胞、鸟细胞、鱼细胞、软体动物细胞或两栖动物细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞、牛细胞、水牛细胞、绵羊细胞、山羊细胞、鹿细胞、野牛细胞、骆驼细胞、红鹿细胞或兔细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至多约60。在一些实施方案中,组合物包括核酸、聚合材料和脂质,其中在一些实施方案中,第一质量比不小于2:1;并且其中第二质量比不小于2:1。在一些实施方案中,第一质量比不小于100:1。

9、本文提供了用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,一种用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法包括:(a)将细胞与包括以下项的组合物接触:i.糖,和ii.核酸分子;(b)使用聚合材料包封或粘附细胞和组合物,从而促进细胞内蛋白质表达的变化。

10、在一些实施方案中,聚合材料包括聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括基于多糖的聚合物、基于多肽的聚合物、基于脂质的聚合物或其组合。在一些实施方案中,基于多糖的聚合物包括基于藻酸盐的聚合物、基于结冷胶的聚合物、基于木薯的聚合物、基于玉蜀黍的聚合物、基于玉米淀粉的聚合物、基于黄原胶的聚合物、基于槐豆的聚合物、基于普鲁兰多糖的聚合物、基于葡聚糖的聚合物、基于纤维素的聚合物或其组合。在一些实施方案中,聚合材料被配置为包封细胞。在一些实施方案中,聚合材料包括水凝胶。在一些实施方案中,聚合材料包括2维聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括3维聚合物。在一些实施方案中,聚合材料被配置为是生物可降解的。

11、本文提供了用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,一种用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:i.糖,和ii.包括核糖核酸(rna)的核酸分子;细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞内蛋白质表达的变化。

12、在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞分化成中胚层谱系、内胚层谱系或外胚层谱系。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化。在一些实施方案中,细胞的分化包括细胞的转分化或细胞的定向分化。在一些实施方案中,细胞包括体细胞或幼稚细胞。在一些实施方案中,细胞包括脂肪细胞、血管细胞、心脏细胞、软骨细胞、内皮细胞、上皮细胞、造血细胞、肝细胞、肌肉细胞、神经元或骨原细胞。在一些实施方案中,细胞包括肌肉细胞。在一些实施方案中,肌肉细胞包括肌纤维、肌管、肌细胞、成肌细胞、肌源性球状体或肌肉细胞祖细胞。

13、本文提供了用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,一种用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:i.糖,和ii.核酸分子;细胞处于摄取组合物的足够条件下,其中细胞包括干细胞,干细胞包括胚胎干细胞、永生化干细胞、间充质干细胞、肌肉祖细胞或诱导多能性干细胞(ipsc),从而促进干细胞中蛋白质表达的变化。

14、在一些实施方案中,细胞包括ipsc。在一些实施方案中,核酸分子包括核糖核酸(rna)。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna包括mrna、sarna、erna、ta-rna或其组合。在一些实施方案中,rna编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。在一些实施方案中,rna是单顺反子的。在一些实施方案中,rna是多顺反子的。在一些实施方案中,核酸分子包括mrna。在一些实施方案中,核酸分子包括sarna。在一些实施方案中,核酸分子包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,细胞的多能性降低促进细胞的分化。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子包括第一核酸分子和第二核酸分子,其中第一核酸分子是mrna或sarna,并且其中第二核酸是mirna或sirna。

15、本文提供了用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,一种用于促进细胞内蛋白质表达的变化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:将细胞与包括以下项的组合物接触:i.修饰的糖,其包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合,和ii.核酸分子,其包括信使核糖核酸(mrna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)和其组合;细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞内蛋白质表达的变化。

16、在一些实施方案中,修饰的糖包括壳聚糖、透明质酸、普鲁兰多糖、肝素、藻酸盐、或其组合或衍生物。在一些实施方案中,修饰的糖包括修饰的壳聚糖。在一些实施方案中,修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、糖酚修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖、二乙基乙胺修饰的糖、二甲基乙胺修饰的糖、季铵修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖、葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括多糖修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖、还原多糖修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,核酸分子编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。在一些实施方案中,核酸分子是单顺反子的。在一些实施方案中,核酸分子是多顺反子的。在一些实施方案中,组合物进一步包括微小核糖核酸(mirna)或沉默核糖核酸(sirna)。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,细胞的多能性降低促进细胞的分化。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子包括第一核酸分子和第二核酸分子,其中第一核酸分子是mrna或sarna,并且其中第二核酸是mirna或sirna。

17、在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中或在中性溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克糖0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子在多聚复合物的表面处或其附近。在一些实施方案中,核酸分子被包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物进一步包括纳米颗粒。在一些实施方案中,核酸分子包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。在一些实施方案中,核酸分子包括化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,细胞包括哺乳动物细胞、鸟细胞、鱼细胞、软体动物细胞或两栖动物细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞、牛细胞、水牛细胞、绵羊细胞、山羊细胞、鹿细胞、野牛细胞、骆驼细胞、红鹿细胞或兔细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至多约60。在一些实施方案中,组合物包括核酸、聚合材料和脂质,其中在一些实施方案中,第一质量比不小于2:1;并且其中第二质量比不小于2:1。在一些实施方案中,第一质量比不小于100:1。在一些实施方案中,在接触中核酸分子与细胞的比率为至少约每10000个细胞0.001ng。在一些实施方案中,在接触中核酸分子与细胞的比率为至少约每10000个细胞0.01ng。在一些实施方案中,在接触中核酸分子与细胞的比率为至少约每10000个细胞0.1ng。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化包括细胞内由核酸分子编码的转录物的表达增加。在一些实施方案中,如通过定量实时聚合酶链式反应(qrt-pcr)所测量的,细胞内由核酸分子编码的转录物比(1)尚未与糖接触的细胞内转录物的水平;(2)尚未与核酸分子接触的细胞内转录物的水平;或(3)其组合高至少约1%、5%、10%、50%、100%、150%、到2倍、到5倍、到10倍、到100倍或到1000倍。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化包括细胞内未由核酸分子编码的转录物的表达增加。在一些实施方案中,如通过定量实时聚合酶链式反应(qrt-pcr)所测量的,细胞内未由核酸分子编码的转录物比(1)尚未与糖接触的细胞内转录物的水平;(2)尚未与核酸分子接触的细胞内转录物的水平;或(3)其组合高至少约1%、5%、10%、50%、100%、150%、到2倍、到5倍、到10倍、到100倍或到1000倍。在一些实施方案中,细胞内蛋白质表达的变化包括细胞内未由核酸分子编码的转录物的表达降低。在一些实施方案中,如通过定量实时聚合酶链式反应(qrt-pcr)所测量的,细胞内未由核酸分子编码的转录物比(1)尚未与糖接触的细胞内转录物的水平;(2)尚未与核酸分子接触的细胞内转录物的水平;或(3)其组合低至少约1%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或99%。

18、本文提供了通过本文公开的任何方法制备的用于促进细胞内蛋白质表达的变化的可食用产品。

19、本文提供了通过本文公开的任何方法制备的用于促进细胞内蛋白质表达的变化的药物活性剂。

20、本文提供了通过本文公开的任何方法制备的用于促进细胞内蛋白质表达的变化的组织。

21、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化,以及被配置为包封、自组装或粘附至细胞的聚合材料。

22、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞的分化,以及被配置为包封、自组装或粘附至细胞的聚合材料。

23、在一些实施方案中,聚合材料包括聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括基于多糖的聚合物、基于多肽的聚合物、基于脂质的聚合物或其组合。在一些实施方案中,基于多糖的聚合物包括基于藻酸盐的聚合物、基于结冷胶的聚合物、基于木薯的聚合物、基于玉蜀黍的聚合物、基于玉米淀粉的聚合物、基于黄原胶的聚合物、基于槐豆的聚合物、基于普鲁兰多糖的聚合物、基于葡聚糖的聚合物、基于纤维素的聚合物或其组合。在一些实施方案中,聚合材料被配置为包封细胞。在一些实施方案中,聚合物包括水凝胶。在一些实施方案中,聚合物包括2维聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括3维聚合物。在一些实施方案中,聚合物被配置为是生物可降解的。

24、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。

25、在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,聚合材料被配置为包封细胞。

26、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,核酸分子包括mrna、mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至多约60。

27、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括:包括rna的核酸分子和糖,核酸分子和糖被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。

28、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括:包括mrna的核酸分子和糖,核酸分子和糖被配置为促进如下所示的中胚层谱系、内胚层谱系和外胚层谱系:细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化。

29、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进如下所示的中胚层谱系、内胚层谱系和外胚层谱系:细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化。在一些实施方案中,分化包括细胞的转分化或细胞的定向分化。在一些实施方案中,细胞包括体细胞或幼稚细胞。在一些实施方案中,细胞包括脂肪细胞、血管细胞、心脏细胞、软骨细胞、内皮细胞、上皮细胞、造血细胞、肝细胞、肌肉细胞、神经元或骨原细胞。在一些实施方案中,肌肉细胞包括肌纤维、肌管、肌细胞、成肌细胞、肌源性球状体或肌肉细胞祖细胞。在一些实施方案中,细胞包括动物细胞。在一些实施方案中,动物细胞包括哺乳动物细胞、鸟细胞、鱼细胞、软体动物细胞或两栖动物细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞、牛细胞、水牛细胞、绵羊细胞、山羊细胞、鹿细胞、野牛细胞、骆驼细胞、红鹿细胞或兔细胞。在一些实施方案中,鸟细胞包括鸭细胞、鸡细胞、鹅细胞、火鸡细胞、鸵鸟细胞或雉细胞。

30、在一些实施方案中,mrna编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括信使rna(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,细胞的多能性降低促进细胞的分化。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。

31、在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,其中糖被配置为在中性水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。

32、在一些实施方案中,糖和rna被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和rna被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,rna被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,rna被配置为包封在多聚复合物中。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。

33、在一些实施方案中,糖被配置为稳定rna。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少rna的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少rna的核酸酶降解。在一些实施方案中,rna被化学修饰。在一些实施方案中,rna包括非锁核酸。在一些实施方案中,rna包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,糖与rna的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,糖与rna的摩尔比为至多约60。

34、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括糖和核酸分子,糖和核酸分子被配置为共同促进干细胞中蛋白质表达的变化,其中干细胞包括胚胎干细胞、永生化干细胞、间充质干细胞、肌肉祖细胞或诱导多能性干细胞(ipsc),从而促进干细胞中蛋白质表达的变化。

35、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括糖和核酸分子,糖和核酸分子被配置为共同促进诱导多能性干细胞(ipsc)的分化,从而促进ipsc中蛋白质表达的变化。

36、在一些实施方案中,干细胞包括ipsc。在一些实施方案中,干细胞中蛋白质表达的变化促进干细胞的分化。在一些实施方案中,动物干细胞包括哺乳动物干细胞、鸟干细胞、鱼干细胞、软体动物干细胞或两栖动物干细胞。在一些实施方案中,哺乳动物干细胞包括猪干细胞、牛干细胞、水牛干细胞、绵羊干细胞、山羊干细胞、鹿干细胞、野牛干细胞、骆驼干细胞、红鹿干细胞或兔干细胞。在一些实施方案中,哺乳动物干细胞包括猪干细胞。在一些实施方案中,鸟干细胞包括鸭干细胞、鸡干细胞、鹅干细胞、火鸡干细胞、鸵鸟干细胞或雉干细胞。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。

37、在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。

38、在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

39、在一些实施方案中,核酸分子是rna。在一些实施方案中,rna包括微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,核酸分子包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进干细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

40、在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或约至多60。在一些实施方案中,核酸分子包括信使核糖核酸(mrna)。

41、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括核酸分子和修饰的糖,核酸分子包括信使核糖核酸(mrna),修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化。

42、本文提供了组合物。在一个方面,组合物包括核酸分子和修饰的糖,核酸分子包括信使核糖核酸(mrna),修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞的分化。

43、在一些实施方案中,修饰的糖包括壳聚糖、透明质酸、普鲁兰多糖、肝素、藻酸盐、或其组合或衍生物。在一些实施方案中,其中修饰的糖包括修饰的壳聚糖。在一些实施方案中,修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、糖酚修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖、二乙基乙胺修饰的糖、二甲基乙胺修饰的糖、季铵修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖或多糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖、葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖、木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖或还原多糖修饰的糖。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。

44、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖被配置为在中性水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。

45、在一些实施方案中,糖和mrna被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和mrna被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,mrna被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,mrna被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定mrna。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少mrna的降解。

46、在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少mrna的核酸酶降解。在一些实施方案中,mrna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,mrna包括非编码序列。在一些实施方案中,mrna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,组合物进一步包括微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,组合物进一步包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

47、在一些实施方案中,mrna被化学修饰。在一些实施方案中,mrna包括非锁核酸。在一些实施方案中,mrna包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,糖与mrna的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,糖与mrna的摩尔比为至多约60。

48、本文提供了用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法包括:(a)将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)核酸分子;(b)使用聚合材料包封、自组装或粘附至细胞和组合物,从而促进细胞中蛋白质表达的变化。

49、本文提供了用于分化细胞的方法。在一个方面,用于分化细胞的方法包括:(a)将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)核酸分子;(b)使用聚合材料包封、自组装或粘附至细胞和组合物,从而促进细胞的分化。

50、在一些实施方案中,聚合材料包括聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括基于多糖的聚合物、基于多肽的聚合物、基于脂质的聚合物或其组合。在一些实施方案中,基于多糖的聚合物包括基于藻酸盐的聚合物、基于结冷胶的聚合物、基于木薯的聚合物、基于玉蜀黍的聚合物、基于玉米淀粉的聚合物、基于黄原胶的聚合物、基于槐豆的聚合物、基于普鲁兰多糖的聚合物、基于葡聚糖的聚合物、基于纤维素的聚合物或其组合。在一些实施方案中,(b)包括使用聚合材料包封细胞。在一些实施方案中,聚合物包括水凝胶。在一些实施方案中,聚合物包括2维聚合物。在一些实施方案中,聚合物包括3维聚合物。在一些实施方案中,聚合物被配置为是生物可降解的。在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。

51、在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,(b)包括使用聚合材料包封细胞和组合物。

52、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,核酸分子包括mrna、mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

53、在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至多约60。

54、本文提供了用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)包括rna的核酸分子;细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞中蛋白质表达的变化。

55、本文提供了促进如下所示的中胚层谱系、内胚层谱系和外胚层谱系的方法:细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化,该方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)核酸分子,其包括mrna;细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞的成脂分化、血管生成分化、心脏分化、牙骨质形成分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化或视网膜分化。

56、在一些实施方案中,蛋白质表达的变化促进如下所示的中胚层谱系、内胚层谱系和外胚层谱系:细胞的成脂分化、血管生成分化、心源性分化、软骨形成分化、内皮分化、上皮分化、造血分化、肝源性分化、肌源性分化、神经源性分化、成骨分化、实质分化、肾分化或视网膜分化。在一些实施方案中,分化包括细胞的转分化或细胞的定向分化。在一些实施方案中,细胞包括体细胞或幼稚细胞。在一些实施方案中,细胞包括脂肪细胞、血管细胞、心脏细胞、软骨细胞、内皮细胞、上皮细胞、造血细胞、肝细胞、肌肉细胞、神经元或成骨原细胞。在一些实施方案中,细胞包括肌肉细胞。在一些实施方案中,肌肉细胞包括肌纤维、肌管、肌细胞、成肌细胞、肌源性球状体或肌肉细胞祖细胞。在一些实施方案中,细胞包括动物细胞。在一些实施方案中,动物细胞包括哺乳动物细胞、鸟细胞、鱼细胞、软体动物细胞或两栖动物细胞。在一些实施方案中,哺乳动物细胞包括猪细胞、牛细胞、水牛细胞、绵羊细胞、山羊细胞、鹿细胞、野牛细胞、骆驼细胞、红鹿细胞或兔细胞。在一些实施方案中,鸟细胞包括鸭细胞、鸡细胞、鹅细胞、火鸡细胞、鸵鸟细胞或雉细胞电池。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,rna编码myod1、myog、myf5、myf6、pax3、pax7、ppary、脂联素、fatp1-6、fabp4、glut4、瘦蛋白、adipor1-2、cd137、其片段或其变体。

57、在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,多核苷酸序列包括包含pouf51(oct3/4)、klf4或sox2或其互补序列的多核苷酸序列。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖被配置为在中性水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和rna被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和rna被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,rna被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,rna被配置为包封在多聚复合物中。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定rna。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少rna的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少rna的核酸酶降解。

58、在一些实施方案中,rna被化学修饰。在一些实施方案中,rna包括非锁核酸。在一些实施方案中,rna包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,糖与rna的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,糖与rna的摩尔比为至多约60。

59、本文提供了用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法包括:将干细胞与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)核酸分子;干细胞处于摄取组合物的足够条件下,其中干细胞包括胚胎干细胞、永生化干细胞、间充质干细胞、肌肉祖细胞或诱导多能性干细胞(ipsc),从而促进干细胞中蛋白质表达的变化。

60、本文提供了用于分化诱导多能性干细胞(ipsc)的方法。在一个方面,促进ipsc中蛋白质表达的变化的方法包括:将ipsc与包括以下项的组合物接触:(i)糖,和(ii)核酸分子;ipsc处于摄取组合物的足够条件下,从而促进ipsc的分化。

61、在一些实施方案中,糖和核酸分子共同促进干细胞中蛋白质表达的变化。在一些实施方案中,干细胞中蛋白质表达的变化促进干细胞的分化。在一些实施方案中,干细胞包括动物干细胞。在一些实施方案中,动物干细胞包括哺乳动物干细胞、鸟干细胞、鱼干细胞、软体动物干细胞或两栖动物干细胞。在一些实施方案中,哺乳动物干细胞包括猪干细胞、牛干细胞、水牛干细胞、绵羊干细胞、山羊干细胞、鹿干细胞、野牛干细胞、骆驼干细胞、红鹿干细胞或兔干细胞。在一些实施方案中,鸟干细胞包括鸭干细胞、鸡干细胞、鹅干细胞、火鸡干细胞、鸵鸟干细胞或雉干细胞。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。

62、在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

63、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'utr、3'-非翻译区(utr)、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,核酸分子包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进干细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

64、在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或至多约60。在一些实施方案中,核酸分子包括信使核糖核酸(mrna)。

65、本文提供了用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法。在一个方面,用于促进细胞中蛋白质表达的变化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)修饰的糖,其包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合,和(ii);细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞中蛋白质表达的变化。

66、本文提供了促进细胞分化的方法。在一个方面,用于促进细胞分化的方法包括:将细胞与包括以下项的组合物接触:(i)修饰的糖,其包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合,和(ii)核酸分子,其包括mrna;细胞处于摄取组合物的足够条件下,从而促进细胞的分化。

67、在一些实施方案中,修饰的糖包括壳聚糖、透明质酸、普鲁兰多糖、肝素、藻酸盐、或其组合或衍生物。在一些实施方案中,修饰的糖包括修饰的壳聚糖。在一些实施方案中,修饰的糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、脂质修饰的糖、酚修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖、二乙基乙胺修饰的糖、二甲基乙胺修饰的糖、季铵修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖或多糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖、葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖、木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖或还原多糖修饰的糖。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。

68、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,修饰的糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,修饰的糖被配置为在中性水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20mequiv/g。在一些实施方案中,修饰的糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,修饰的糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,修饰的糖包括修饰的多糖。

69、在一些实施方案中,修饰的糖和mrna被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,修饰的糖和mrna被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,mrna被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,mrna被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,修饰的糖被配置为稳定mrna。在一些实施方案中,修饰的糖被配置为抑制或减少mrna的降解。在一些实施方案中,修饰的糖被配置为抑制或减少mrna的核酸酶降解。

70、在一些实施方案中,mrna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,mrna包括非编码序列。在一些实施方案中,mrna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,组合物进一步包括微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,组合物进一步包括mirna或sirna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

71、在一些实施方案中,mrna被化学修饰。在一些实施方案中,mrna包括非锁核酸。在一些实施方案中,mrna包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,糖与mrna的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,糖与mrna的摩尔比为至多约60。

72、本文提供了通过过程制备的可食用产品。在一个方面,通过一种过程制备可食用产品,该过程包括将细胞与包括糖或核酸分子的组合物接触,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化。

73、在另一方面,通过一种方法制备可食用产品,该过程包括将细胞与包括糖或核酸分子的组合物接触,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞的分化。

74、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,组合物进一步包括脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20meqiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

75、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。

76、在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或至多约60。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。

77、本文提供了通过过程制备的药物活性成分。在一个方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。

78、在另一方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为共同促进细胞的分化。

79、在一些实施方案中,药物活性成分被配制为药物物质、药物产品或药物。在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,该过程进一步包括使用脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20meqiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

80、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或至多约60。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。

81、本文提供了通过过程制备的药物活性成分。在一个方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化。

82、本文提供了通过过程制备的药物活性成分。在一个方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞的分化。

83、在一些实施方案中,药物活性成分被配制为药物物质、药物产品或药物。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖或多糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖,葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖,木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖或还原多糖修饰的糖。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。

84、在一些实施方案中,糖或核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20meqiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

85、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至多约60。

86、本文提供了通过过程制备的组织。在一个方面,通过一种过程制备组织,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化。

87、在另一方面,通过一种过程制备组织,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖或核酸分子被配置为促进细胞的分化。

88、在一些实施方案中,组织包括器官、类器官或其模型。在一些实施方案中,该模型包括组织、器官或类器官的仿生模型。

89、在一些实施方案中,细胞中蛋白质表达的变化促进细胞的分化。在一些实施方案中,该过程进一步包括使用脂质、阴离子聚合物或其组合。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20meqiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

90、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或至多约60。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。

91、本文提供了通过过程制备的药物活性成分。在一个方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞中蛋白质表达的变化。

92、在另一方面,通过一种过程制备药物活性成分,该过程包括使用糖和核酸分子,其中糖包括脂族醛修饰的糖、芳族醛修饰的糖、季铵修饰的糖、多胺衍生的糖、糖修饰的糖、具有脂质添加剂的糖或其组合;其中核酸或修饰的糖被配置为促进细胞的分化。

93、在一些实施方案中,组织包括器官、类器官或其模型。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括己醛修饰的糖、庚醛修饰的糖、辛醛修饰的糖、壬醛修饰的糖或癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,脂族醛修饰的糖包括癸醛修饰的糖。在一些实施方案中,芳族醛修饰的糖包括苯甲醛修饰的糖或肉桂醛修饰的糖。在一些实施方案中,多胺衍生的糖包括精胺修饰的糖、亚精胺修饰的糖、腐胺修饰的糖或精氨酸修饰的糖。在一些实施方案中,具有脂质添加剂的糖包括具有卵磷脂的糖或具有磷脂酰胆碱的糖。在一些实施方案中,糖修饰的糖包括单糖修饰的糖或多糖修饰的糖。在一些实施方案中,单糖修饰的糖包括乳糖修饰的糖、甘露糖修饰的糖、葡萄糖修饰的糖、半乳糖修饰的糖,葡糖胺修饰的糖、蔗糖修饰的糖、麦芽糖修饰的糖,木糖修饰的糖、核糖修饰的糖、果糖修饰的糖或甘油醛修饰的糖。在一些实施方案中,多糖修饰的糖包括阴离子多糖修饰的糖或还原多糖修饰的糖。在一些实施方案中,阴离子多糖修饰的糖包括藻酸盐修饰的糖、羧甲基化纤维素修饰的糖、透明质酸修饰的糖、果胶修饰的糖、普鲁兰多糖修饰的糖、淀粉修饰的糖或黄原胶修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括麦芽糊精修饰的糖或纤维二糖修饰的糖。在一些实施方案中,还原多糖修饰的糖包括阳离子脂质添加剂。在一些实施方案中,酚修饰的糖包括绿原酸修饰的糖、阿魏酸修饰的糖、咖啡酸修饰的糖、没食子酸修饰的糖或其组合。在一些实施方案中,该模型包括组织、器官或类器官的仿生模型。

94、在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为共同促进细胞中蛋白质表达的变化。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至少约每克聚合物0.5毫当量碱性基团(mequiv/g)。在一些实施方案中,糖的阳离子部分的阳离子电荷包括至多约20meqiv/g。在一些实施方案中,糖包括至少约20千道尔顿(kda)的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括至多约2000kda的平均分子质量。在一些实施方案中,糖包括多糖。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为彼此自组装。在一些实施方案中,糖和核酸分子被配置为形成多聚复合物。在一些实施方案中,核酸分子被配置为吸附到多聚复合物的表面。在一些实施方案中,核酸分子被配置为包封在多聚复合物内。在一些实施方案中,多聚复合物是规则形状的、不规则形状的或分支的。在一些实施方案中,多聚复合物是球形的或线性的。在一些实施方案中,如通过动态光散射(dls)或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至少约5纳米(nm)。在一些实施方案中,如通过dls或显微镜术所测量的,多聚复合物的表观直径为至多约5000nm。在一些实施方案中,多聚复合物包括纳米颗粒。在一些实施方案中,糖被配置为稳定核酸分子。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的降解。在一些实施方案中,糖被配置为抑制或减少核酸分子的核酸酶降解。

95、在一些实施方案中,核酸分子包括rna。在一些实施方案中,rna包括信使核糖核酸(mrna)、微小核糖核酸(mirna)、转运核糖核酸(trna)、沉默核糖核酸(sirna)、自扩增rna(sarna)、无末端/环状rna(erna)、反式扩增rna(ta-rna)或其组合。在一些实施方案中,rna是单顺反子的或多顺反子的。在一些实施方案中,rna包括rna调节元件。在一些实施方案中,rna调节元件包括转录调节元件、共转录调节元件、转录后调节元件、翻译调节元件或其任何组合。在一些实施方案中,rna调节元件包括5'-帽、5'-非翻译区(utr)、3'-utr、多聚a尾修饰或其任何组合。在一些实施方案中,rna包括mrna。在一些实施方案中,mirna或sirna包括促进细胞的多能性降低的多核苷酸序列。在一些实施方案中,核酸分子被化学修饰。在一些实施方案中,核酸分子包括非锁核酸。在一些实施方案中,核酸分子包括至少两种类型的核酸。在一些实施方案中,多聚复合物的聚阳离子氨基基团与多聚复合物的核酸磷酸酯基团的摩尔比为至少约1或至多约60。在一些实施方案中,糖被配置为在水溶液中是阳离子。

96、从以下详细描述,本公开的附加方面和优点对本领域技术人员来说将变得显而易见,其中仅示出和描述了本公开的说明性实施方案。如将要意识到的是,本公开能够具有其他的和不同的实施方案,并且其若干细节能够在各种明显方面进行修改,所有这些都不偏离本公开。因此,附图和描述本质上被视为说明性的,而不是限制性的。

97、援引并入

98、本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文,其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地和单独地指出通过引用并入。在通过引用并入的出版物和专利或专利申请与说明书中包含的公开内容相矛盾的程度上,说明书旨在取代和/或优先于任何此类矛盾材料。

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