一种桃胶的鉴别方法及其应用

本发明属于中药检测，具体涉及一种桃胶的鉴别方法及其应用。

背景技术：

1、树脂类中药包括乳香、没药、桃胶、苏合香、芦荟、安息香、血竭、阿魏、儿茶等，多为植物体渗出的天然树脂或树脂加工品，这些树脂通常具有独特的药理作用,被广泛应用于中医临床，是中药的重要组成部分。渗出的树脂按是否经过人为加工可以分为天然树脂和加工树脂两大类，其中加工树脂类中药外观颜色一般比较均一，质量也相对稳定可控，不容易直接掺假。而天然树脂受自然环境等因素影响，导致其本身外观颜色、大小、质地等往往存在很大差异，外观非常不均一，容易出现直接掺假问题。

2、桃胶、乳香和没药均为天然树脂，桃胶的性状包括外形、气味和大小等均与乳香和没药非常相近，所以市场上常常会出现桃胶假冒乳香和没药的情况。乳香和没药价格相近，在中医临床及中成药生产方面两者用量均比较大，全部依赖进口，故两者价格相对较高；而桃胶产量较大，价格相对便宜，仅为乳香和没药的1/4～1/3，面对利益诱惑，有些不法商贩会用桃胶假冒乳香和没药，但目前缺乏有效检测手段，故无法对此假冒情况进行检测确认。桃胶具有和血养血的功效，与乳香和没药的活血行气功效相近，且桃胶药食两用，合理使用对人体有益无害，但临床上却无法代替乳香和没药使用，桃胶偏重于和血，而乳香和没药偏重于活血，桃胶与乳香和没药的功效虽然有些相近，但也存在差异，故临床上不能混用。

3、因为乳香和没药的质量标准存在明显缺陷，所以无法对易混淆样品桃胶进行区别。现行2020年版《中国药典》乳香的专属性的鉴别方法为气相色谱法鉴别α-蒎烯，而α-蒎烯在其易混淆的没药、桃胶中普遍存在，所以该方法不具有专属性；现行2020年版《中国药典》没药的专属性的鉴别方法是用没药对照药材作为对照物质，薄层色谱法鉴别没药中所含的某些未知挥发性成分，但其主要的挥发性成分在乳香和桃胶中也普遍存在，所以该鉴别方法专属性也不强。2020年版《中国药典》虽没有收载桃胶，但药典中有多种中成药如参精止渴丸、健脑丸等使用了桃胶，均没有对桃胶进行定性鉴别。故亟需建立一种桃胶及含桃胶制剂的专属性鉴别方法，以控制相关药品的质量。

4、目前乳香和没药的临床应用研究较多，而关于乳香和没药的质量控制方面研究较少，质量控制相关研究多集中在挥发油含量方面，而真伪鉴别研究较少，对桃胶的相关研究更少。目前乳香和没药的真伪鉴别方法主要有外观性状、薄层色谱、气相色谱、液相色谱和红外光谱法等，这些方法均缺乏专属性。

技术实现思路

1、针对现有技术中鉴别桃胶专属性差的问题，本发明提供了一种桃胶的鉴别方法及其应用，能够对乳香和没药中是否掺杂桃胶进行鉴别，对含桃胶的制剂中的桃胶进行定性检测，专属性好。

2、本发明通过以下方法制备：

3、一种桃胶的鉴别方法，包括以下步骤：

4、（1）制备待检测样品的供试品溶液，使用液相色谱-高分辨质谱联用仪检测，获得负离子流图；

5、（2）以 m/z=301.07±0.01单电荷为桃胶特征离子提取步骤（1）中负离子流图的离子图，若检测出该离子，则待检测样品中含有桃胶成分。

6、进一步地，步骤（1）中供试品溶液的制备方法为：取待检测样品粉末，加入甲醇溶液超声溶解，离心后取上清液，过滤得供试品溶液。

7、进一步地，步骤（1）中所述的甲醇溶液为体积浓度50%的甲醇溶液，超声的条件为功率500～1000w、频率40～50khz下超声30min。

8、进一步地，步骤（1）中每20mg待检测样品粉末加入10ml甲醇溶液。

9、进一步地，步骤（1）中液相色谱条件为：thermo hypersil gold c18 色谱柱，100mm×2.1mm，3μm；柱温30℃，流动相a为0.1%甲酸水溶液，流动相b为含有0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脱，进样量为5μl，流速0.3ml/min；

10、高分辨质谱条件为：qe-plus高分辨质谱仪，电喷雾离子源，负离子模式，喷雾电压为3.5kv，离子传输毛细管温度为360℃，s-lens传输效率设置为50.0%，鞘气流速35l/min，辅助气流速15l/min，辅助气加热温度300℃。

11、进一步地，所述的梯度洗脱条件为：0～3min，5％b；3～10min，5％～9％b；10～32min，9％～21％b；32～40min，21％～30％b；40～48min，30％～80％b；48～50min，80％～90％b；50～52min，90％～100％b；52～55min，100％b；55～56min，100％～5％b；56～60min，5％b。

12、进一步地，所述的待检测样品为乳香、没药、桃胶或含乳香、没药、桃胶中任意一种或多种的中药制剂。

13、本发明中，所述的桃胶的鉴别方法在判断乳香、没药或其中药制剂中是否掺杂桃胶中的应用。

14、离子模式的选择及专属的特征离子选择十分重要，经大量试验，虽然采用电喷雾正离子模式可以得到更丰富的离子峰，但经过验证，响应较高的离子峰均缺乏专属性，不能作为专属性特征离子，说明桃胶、乳香和没药之间含有大量的相同成分，只是成分的相对含量存在一些差异，该大量的相同成分经质谱数据判断主要是各种挥发性成分。而采用电喷雾负离子模式进行离子化，通过分析采集的巨量离子信息，确认 m/z=301.07（z=1）为桃胶的特征离子，可以用于鉴定桃胶的真伪、桃胶是否假冒乳香和没药以及麻黄止嗽丸中桃胶的鉴别。

15、本发明取得的有益效果

16、（1）本发明桃胶的鉴别方法通过对桃胶特征离子的检测实现了对桃胶的定性鉴别，可实现对桃胶假冒乳香和没药的真伪鉴别；

17、（2）本发明桃胶的鉴别方法专属性好，重现性好，通过对桃胶特征离子的检测实现对含桃胶中药制剂的定性检测，且该方法无需对照样品，成本低。

技术特征：

1.一种桃胶的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，步骤（1）中供试品溶液的制备方法为：取待检测样品粉末，加入甲醇溶液超声溶解，离心后取上清液，过滤得供试品溶液。

3.根据权利要求2所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，步骤（1）中所述的甲醇溶液为体积浓度50%的甲醇溶液，超声的条件为功率500～1000w、频率40～50khz下超声30min。

4.根据权利要求2所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，步骤（1）中每20mg待检测样品粉末加入10ml甲醇溶液。

5.根据权利要求1所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，步骤（1）中液相色谱条件为：thermo hypersil gold c18 色谱柱，100mm×2.1mm，3μm；柱温30℃，流动相a为0.1%甲酸水溶液，流动相b为含有0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脱，进样量为5μl，流速0.3ml/min；

6.根据权利要求5所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，所述梯度洗脱的条件为：0～3min，5％b；3～10min，5％～9％b；10～32min，9％～21％b；32～40min，21％～30％b；40～48min，30％～80％b；48～50min，80％～90％b；50～52min，90％～100％b；52～55min，100％b；55～56min，100％～5％b；56～60min，5％b。

7.根据权利要求1所述的桃胶的鉴别方法，其特征在于，所述的待检测样品为乳香、没药、桃胶或含乳香、没药、桃胶中任意一种或多种的中药制剂。

8.一种权利要求1～7任一项所述的桃胶的鉴别方法在判断乳香、没药或其中药制剂中是否掺杂桃胶中的应用。

技术总结本发明公开了一种桃胶的鉴别方法及其应用，属于中药检测技术领域。制备待检测样品的供试品溶液，使用液相色谱‑高分辨质谱联用仪检测，获得负离子流图；以m/z=301.07±0.01单电荷为桃胶特征离子提取负离子流图的离子图，若检测出该离子，则待检测样品中含有桃胶成分。本发明桃胶的鉴别方法通过对桃胶特征离子的检测实现了对桃胶的定性鉴别，可实现对桃胶假冒乳香和没药的真伪鉴别；本发明桃胶的鉴别方法专属性好，重现性好，通过对桃胶特征离子的检测实现对含桃胶中药制剂的定性检测，且该方法无需对照样品，成本低。技术研发人员：王作承,张丹,王玉团,隋晓慧,王坤受保护的技术使用者：山东中医药大学技术研发日：技术公布日：2024/9/29