一种抗氧化免疫调节营养补剂及其制备方法

本发明属于保健食品领域，具体涉及一种抗氧化免疫调节营养补剂及其制备方法。

背景技术：

1、益生菌可改善机体微生态平衡，在促进营养吸收、控制肠道感染和调节免疫功能等方面具有特殊的功效，但存在胃肠道环境难定植、口服生物利用度低等问题。生物被膜是多个细菌黏附于非生物或生物表面，分泌胞外聚合物，并将自身包裹其中形成的一种有组织的细菌集团，包含胞外多糖、蛋白质、胞外dna和脂质等多种组成成分，是一个具有三维立体空间结构的聚集体。被膜状态的益生菌较浮游菌在抗逆性、对抗病原菌和调节免疫功能等方面具有明显优势。

2、有报道指出，大多数益生菌在口服后和停止食用后不久随粪便排出结肠，临床效果往往不佳，主要与其不能在肠道中有效定植有关。然而，定植并非易事。口服是一种常见的益生菌摄入方式，但由于胃肠道环境恶劣，导致其生物利用度普遍偏低。对此，生物被膜作为一种新策略引起了很多学者的关注。生物被膜是细菌种群产生以黏附于某一界面的封闭基质，其内部细菌互相附着，成为一种细菌群体共同生存的形式，任何界面都可能有生物被膜产生。

3、大部分益生菌具有形成生物被膜的特性，利用生物被膜可使得益生菌在体内存活、定植更有优势，从而提高疗效与抗病菌的能力，展现出良好的研究与应用前景，对进一步探明益生菌发挥作用的机制、开发高效益生菌产品等具有重大意义。

4、真菌次级代谢物具有多种生物活性，对人类和动物具有潜在的药用价值。例如，真菌次级代谢物可以抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、解毒等。真菌的肠道定植难度更大，意义也更大。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种抗氧化免疫调节营养补剂及其制备方法，该抗氧化免疫调节营养补剂能够防止消化道中消化液对真菌的杀灭，有效提高肠道定植率，长期保持和增强真菌菌丝体的活性，产生有利的次级代谢产物。

2、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种抗氧化免疫调节营养补剂的制备方法，包括如下步骤：

3、s1.将枯草芽孢杆菌接种在加入蒙脱石粉末的lb培养基中，进行振荡培养，培养24-48h，将发酵液离心收集沉淀，重悬于pbs溶液中，高速均质，再进行超声处理，静置后收集悬浮液，使多糖含量为10-15g/l，即得粗生物被膜悬浮液；

4、生物被膜中主要活性成分是多糖，通过前面加入pbs溶液可以调节悬浮液中多糖含量。多糖含量用苯酚-硫酸法测定。一般情况下，是加入pbs溶液处理后，得到的浓度比预计浓度大，然后测定多糖含量后，再兑入pbs溶液，调至所需的浓度。

5、s2.将酵母粉、蛋黄卵磷脂和乳酸钙混合均匀，制得复合营养素；

6、s3.将大豆低聚糖、云芝多糖和分离乳清蛋白混合均匀，制得复合益生元；

7、s4.在步骤s1制得的粗生物被膜悬浮液中加入步骤s2制得的复合营养素和步骤s3制得的复合益生元，采用60co辐照灭菌后，加入蛹虫草成熟子实体和鸡油菌成熟子实体，在2-8℃下充分搅拌后再加入壳寡糖，之后取出蛹虫草成熟子实体和鸡油菌成熟子实体，剩余的液体冷冻干燥得到抗氧化免疫调节营养补剂。

8、优选的，步骤s1中，所述蒙脱石粉末的平均粒径范围为45-90μm，加入量为5-10w/v％。

9、优选的，步骤s1中，所述振荡培养氧气含量控制为5-8v/v％。

10、优选的，步骤s2中，所述酵母粉与蛋黄卵磷脂、乳酸钙的投料比为10g:(300-800)mg:(100-350)mg。

11、优选的，步骤s3中，所述大豆低聚糖、云芝多糖和分离乳清蛋白的投料比为10g:(1.0-2.0)g:(1.0-3.0)g。

12、优选的，步骤s4中，所述粗生物被膜悬浮液中加入复合营养素和复合益生元的量分别为5-8w/v％和5-10w/v％。

13、优选的，步骤s4中，所述蛹虫草成熟子实体和鸡油菌成熟子实体的加入量分别为1-1.5w/v％和1-1.5w/v％。

14、优选的，步骤s4中，所述壳寡糖的加入量8-10w/v％。

15、本发明还提供了一种上述制备方法制备得到的抗氧化免疫调节营养补剂。

16、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

17、1)本发明利用枯草芽孢杆菌的生物被膜包裹真菌活性孢子，并补充益生元和营养素，通过生物大分子大豆低聚糖、云芝多糖和分离乳清蛋白以ca2+为核心构建三维网状体系，在其三维结构内部吸附营养因子，包括维生素b族、卵磷脂，使其经胃肠环境在肠道中定植并诱导萌发，同时产生具有生理活性的次级代谢产物。

18、2)采用蒙脱石的粗糙表面结构和大的比表面积能够有效提高生物被膜的产量。在高速均质过程中，蒙脱石互相接触碰撞和摩擦，可以将附着在其表面的生物被膜完全剥离下来。

19、3)利用壳寡糖参与构建三维网状体系，壳寡糖具有氨基正离子，能够有效结合真菌菌丝和孢子，提高其定植效率，也有利于真菌孢子的萌发。

20、4)蛹虫草菌丝代谢能够分泌虫草素，而鸡油菌菌丝代谢能够分泌麦角硫因，前者具有免疫调节作用，后者具有抗氧化作用。

技术特征：

1.一种抗氧化免疫调节营养补剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述加入蒙脱石粉末的lb培养基中，加入的蒙脱石粉末的平均粒径范围为45-90μm，加入量为5-10w/v％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述振荡培养的氧气含量控制为5-8v/v％。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述酵母粉、蛋黄卵磷脂、乳酸钙的投料比为10g:(300-800)mg:(100-350)mg。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述大豆低聚糖、云芝多糖和分离乳清蛋白的投料比为10g:(1.0-2.0)g:(1.0-3.0)g。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s4中，所述粗生物被膜悬浮液中加入复合营养素和复合益生元的量分别为5-8w/v％和5-10w/v％。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤s4中，所述蛹虫草成熟子实体和鸡油菌成熟子实体的加入量分别为1-1.5w/v％和1-1.5w/v％。

8.根据权利要求1所述的一种抗氧化免疫调节营养补剂及其制备方法，其特征在于，步骤s4中，所述壳寡糖的加入量8-10w/v％。

9.根据权利要求1～8任一项所述制备方法制备得到抗氧化免疫调节营养补剂。

技术总结本发明属于保健食品领域，公开了一种抗氧化免疫调节营养补剂及其制备方法。该制备方法利用生物被膜将丝状真菌孢子包裹同时加入复合益生元和复合营养素，得到抗氧化免疫调节营养补剂。该抗氧化免疫调节营养补剂能够防止消化道中消化液对真菌的杀灭，有效提高肠道定植率，长期保持和增强真菌菌丝体的活性，产生有利的次级代谢产物。技术研发人员：汤佳鹏,李瑞萌,李小蒙,张玮,葛彦受保护的技术使用者：南通大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10