靶向抑制COL4A1和/或ITGB1的抑制剂在尿路上皮癌临床治疗中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域，特别是涉及col4a1和/或itgb1的抑制剂在尿路上皮癌中的应用。

背景技术：

1、尿路上皮癌作为全球第九大常见肿瘤，每年全球新增病例接近600000例，死亡病例约为210000例。目前对于患者的治疗通常以手术治疗为主，辅以化疗、放疗、靶向治疗、免疫治疗等，然而每种治疗方案收获的治疗效果均十分有限。化疗作为最常见的辅助治疗方式，约36-65％的患者可在最初的治疗中获益，但几乎所有患者最终都会产生化疗耐药。随着耐药性的产生，患者一般将在1-2年内再度发病，疾病将在更短期内继续进展，最终发展为转移性尿路上皮癌，患者总的中位生存期仅为1年左右。尽管近年来在治疗晚期尿路上皮癌上取得了一些进展，但如今仍无显著提高患者无进展生存期以及总生存期的治疗策略。尿路上皮癌恶性进展以及化疗耐药所涉及的潜在分子机制非常复杂，目前尚未完全清楚。

2、随着高通量测序技术的不断发展，多位研究人员基于传统组织测序已经鉴定了大量肿瘤恶性进展以及化疗耐药相关基因，验证了它们的临床表达特征，并借助肿瘤细胞系模型证实了其促进肿瘤进展和化疗抵抗的作用。然而，靶向这些候选关键基因的治疗策略所收获的临床治疗效果却出奇的有限，远未达到令人满意。究其原因，可能在于：1)这些研究主要关注于癌细胞中基因表达量及其突变位点的变化，忽略了肿瘤微环境中肿瘤细胞与其它细胞之间的相互作用；2)这些研究主要在细胞系水平进行，与患者体内的真实情况并不一致。因此，目前仍需研究尿路上皮癌肿瘤微环境与肿瘤细胞间的相互作用，以解决肿瘤恶性进展、耐药与复发等问题。背景技术中的信息仅仅在于说明本发明的总体背景，不应视为承认或以任何形式暗示这些信息构成本领域一般技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

1、为解决上述现有技术中的至少部分问题，本发明通过特异性sirna或靶向性抗体阻断肿瘤细胞与微环境间的关键细胞通讯：col4a1-itgb1，通过肿瘤大小、组织病理学变化以及血管形成等指标评估联合治疗效果，发现靶向阻断col4a1-itgb1可抑制尿路上皮癌恶性进展，而联合化疗可显著抑制尿路上皮癌化疗耐药。具体地，本发明包括以下内容。

2、本发明的第一方面，提供col4a1和/或itgb1抑制剂在制备治疗或改善尿路上皮癌，特别是化疗耐药尿路上皮癌的药物中的应用，其中，所述抑制剂能够降低col4a1和/或itgb1的量，或以竞争性结合的方式降低结合的col4a1-itgb1复合物的量。

3、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述抑制剂包括小分子化合物、核酸、蛋白质、抗体或其片段、酶、多肽和基因编辑工具中的至少一种。

4、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述核酸选自核酶、反义寡核苷酸、适配体、microrna、sirna或shrna。

5、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体、双特异性抗体、嵌合抗体、人源化抗体。

6、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述抗原结合片段包括fab片段、fab’片段、fd片段、fd’片段、fv片段、dab片段、f(ab’)2片段或scfv片段。

7、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述药物包括编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸分子。

8、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述药物包括含有所述核酸分子或sirna的载体。

9、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述药物包括含有所述核酸分子或所述载体的宿主细胞。

10、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，通过向受试者施用治疗有效量的所述药物实现所述治疗或改善。

11、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述的抗体或其抗原结合片段，或所述sirna通过人工合成或基因工程方式制备。

12、在某些实施方案中，根据本发明所述的应用，其中，所述药物包含可选的药学上可接受的辅料。

13、本发明的第二方面，提供抑制剂在制备治疗或改善尿路上皮癌，特别是化疗耐药尿路上皮癌的药物中的应用，其中，所述抑制剂为第一方面中的抑制剂。

14、本发明的第三方面，提供一种筛选用于治疗或改善尿路上皮癌，特别是化疗耐药尿路上皮癌的药物中的应用，其包括以下步骤：

15、a.在体外使待测药物与col4a1和/或itgb1接触；

16、b.测量待测药物与col4a1和/或itgb1的结合能力，或测量col4a1和/或itgb1的量，或测量结合的col4a1-itgb1复合物的量；

17、c.当所述待测药物能够特异性结合col4a1和/或itgb1，或所述待测药物能够降低col4a1和/或itgb1的量，或所述待测药物能够降低结合的col4a1-itgb1复合物的量，则将所述待测药物筛选为用于治疗或改善尿路上皮癌的候选药物。

18、在某些实施方案中，根据本发明所述的药物筛选方法，其中，所述待测药物包括小分子化合物、核酸、蛋白质、抗体或其片段、酶或多肽等。

19、本发明运用尿路上皮癌患者原位肿瘤组织构建了异种移植瘤(patient-derivedtumor xenograft，pdx)模型，极大程度地模拟了患者体内肿瘤环境，通过靶向col4a1-itgb1的特异性抗体进行局部治疗，发现双向阻断col4a1-itgb1可显著抑制血管形成、肿瘤生长以及化疗耐药。

技术特征：

1.col4a1和/或itgb1抑制剂在制备治疗或改善尿路上皮癌的药物中的应用，其特征在于，所述抑制剂能够降低col4a1和/或itgb1的量，或以竞争性结合的方式降低结合的col4a1-itgb1复合物的量。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抑制剂选自以下中的至少一种：

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述抑制剂包括小分子化合物、核酸、蛋白质、抗体或其片段、酶、多肽和基因编辑工具中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述核酸包括核酶、反义寡核苷酸、适配体、microrna、sirna和shrna中的至少一种。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体、双特异性抗体、嵌合抗体和人源化抗体中的至少一种。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗原结合片段包括fab片段、fab’片段、fd片段、fd’片段、fv片段、dab片段、f(ab’)2片段和scfv片段中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，通过向受试者施用治疗有效量的所述药物实现所述治疗或改善。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿路上皮癌为化疗耐药尿路上皮癌。

9.抑制剂联合其它药物在制备治疗或改善尿路上皮癌的药物中的应用，其特征在于，所述抑制剂为权利要求1-8任一项中的抑制剂。

10.一种筛选用于治疗或改善尿路上皮癌的药物的方法，其特征在于，包括：

技术总结本发明公开靶向COL4A1和/或ITGB1的抑制剂在尿路上皮癌临床治疗中的应用。本发明通过特异性siRNA或靶向抗体阻断肿瘤细胞与微环境间的关键细胞通讯：COL4A1‑ITGB1，通过肿瘤大小、组织病理学变化以及血管形成等指标评估联合治疗效果，发现靶向阻断COL4A1‑ITGB1可抑制尿路上皮癌恶性进展，而联合化疗可显著抑制尿路上皮癌化疗耐药，具有广泛的应用前景。技术研发人员：马晓世,冯昌银,赵霞,李宛莹,孙宜康,邢绘涛,刘利明,罗继平,成志强受保护的技术使用者：深圳市第三人民医院（深圳市肝病研究所）技术研发日：技术公布日：2024/10/10