一种贝莱斯芽孢杆菌菌株及其在魔芋软腐病中的应用

本发明涉及生物肥料，具体涉及一种贝莱斯芽孢杆菌菌株及其在魔芋软腐病中的应用。

背景技术：

1、生物防治是指利用有益生物及其代谢产物对植物病害进行防治。不同于化学防治，其最大的优点是对人畜安全、对环境友好。因此，利用生防微生物的绿色防治方式越来越受到人们的关注，具有广阔的发展前景。早期的研究工作已多次报道，天然拮抗微生物可以防治多种植物病害。国内外很多学者对生防菌株展开了大量的研究，包括生防菌的筛选和鉴定、防治效果、作用机制以及产品开发应用等诸多方面。目前越来越多的生防菌种类在植物病害防治中得到广泛应用，主要涵盖细菌、真菌、放线菌、病毒的弱毒株系和噬菌体五大类。国内外研究较多的生防细菌主要是芽孢杆菌（bacillus)、假单胞杆菌（pseudomonas)、溶杆菌（lysobacter)、放射土壤杆菌（agrobacterium radiobacter）和巴氏杆菌（pasteurella）等；研究较多的生防真菌主要是木霉菌（trichoderma)、盾壳霉（coniothyrium)、拟青霉（paecilomyces)、粘帚霉（gliocladium)、酵母菌（saccharomyces）等；研究较多的生防放线菌主要为链霉菌（streptomyces)。

2、细菌是生防菌中应用最广泛的一类。芽孢杆菌和假单胞菌是众所周知的生物抑制剂，而关于溶杆菌的研究则相对较少。芽孢杆菌已被证明对多种植物病原物有效，可作为植物生长促进剂、系统抗性诱导剂，主要种类有枯草芽孢杆菌（b.subtilis)、解淀粉芽孢杆菌（b.amyloliquefaciens)、贝莱斯芽孢杆菌（b.velezensis）等。芽孢杆菌的抑菌范围很广，因其突出的自身优势，对多种植物病害的防治都具有显著成效，在生防领域应用广泛。孙正祥等的研究结果显示，枯草芽孢杆菌yzu-s149对西瓜枯萎病的室内盆栽防效为75.87%，优于百菌清500倍稀释液的施用效果，同时对水稻纹枯病菌（rhizoctonia sola-ni)、小麦赤霉病菌（fusarium graminearum)、玉米茎基腐病菌（f.moniliforme)、马铃薯晚疫病菌（phyto-phthora infestans）也都具有良好的抑菌效果。李扬凡等发现解淀粉芽孢杆菌hmb33604使立枯丝核菌（r.solani)ag-3菌丝畸形，并且降低病原菌数量，从而有效防治马铃薯黑痣病。李珅瑀等研究发现贝莱斯芽孢杆菌5—8对水稻稻瘟病的防效可达90%以上，同时对油菜菌核病菌（sclerotinia sclerotio-rum)、桃褐腐病菌（monilinia fructicola）等均有较强的抑菌活性。

3、近年来，随着魔芋产业不断壮大，规模化，集约化栽培种植面积不断扩大，魔芋得到前所未有的发展，与此同时，魔芋病害也愈发严重，魔芋软腐病是发生最严重，规模最大，传染性强，病死率最高的土传细菌性病害，被称为魔芋的“癌症”。所以魔芋的病害尤其是魔芋软腐病已成为魔芋产业发展最主要限制因素。现阶段国内主要采用化学防治和农业防治相结合的防治方式防止软腐病害的发生。但由于化学农药往往存在毒性强，残留多并且农业防治受外部环境变化而防治效果不佳。生物防治重要基础是筛选效果突出的拮抗菌株，目前关于生防菌的研究较多，展现出较好的开发前景。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种贝莱斯芽孢杆菌菌株及其在魔芋软腐病中的应用。

2、为了解决现有技术的问题，本发明提供了如下技术方案：

3、本发明的一种贝莱斯芽孢杆菌菌株，贝莱斯芽孢杆菌菌株为贝莱斯芽孢杆菌qjxw44，保藏名称为贝莱斯芽孢杆菌  bacillus velezensis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2024年05月10日；保藏编号：cgmcc  no.30596。

4、本发明的一种菌剂，含有贝莱斯芽孢杆菌菌株。

5、进一步地，其活性成分为如下（a）（b）：

6、（a）贝莱斯芽孢杆菌菌株的菌悬液；

7、（b）贝莱斯芽孢杆菌菌株的发酵液初提取物。

8、本发明的菌剂的菌悬液和发酵液初提物的制备方法，包括如下步骤：将贝莱斯芽孢杆菌菌株在lb固体培养基上过夜培养后，转接至无菌的lb液体培养基中，28℃、120r/min培养24 h，将发酵液在100×g离心5 min去除上清，用无菌水将菌体重悬，制得菌悬液；

9、将贝莱斯芽孢杆菌菌株在lb固体培养基上过夜培养后，转接至无菌的lb液体培养基中，28℃、120r/min培养24 h，将发酵液在100×g离心5 min保留上清，上清液过无菌滤膜，制得无菌发酵液，即发酵液初提取物。

10、本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株在制备微生物肥料中的应用。

11、本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株在制备用于防治魔芋软腐病菌剂中的应用。

12、有益效果：本发明提供的贝莱斯芽孢杆菌菌株qjxw44对魔芋软腐病具有显著的拮抗效果，通过生物防治的方式，可以有效抑制魔芋软腐病的发生和蔓延，减少了化学农药的使用。

13、与现有技术相比，本发明具有如下优点：

14、（1）环境友好：与化学防治相比，本发明采用的生物防治方法对环境更为友好，减少了化学农药对土壤和生态系统的负面影响。

15、（2）人畜安全：生物防治方法使用的是天然的微生物菌株，对人畜更为安全，减少了化学农药残留对人类健康的潜在威胁。

16、（3）促进魔芋生长：贝莱斯芽孢杆菌菌株qjxw44不仅具有防治病害的能力，还具有促进魔芋生长的效应，能够提高魔芋的生长发育速度和产量。

17、（4）固氮、溶磷和产铁能力：贝莱斯芽孢杆菌菌株qjxw44具有固氮、溶磷和产铁载体的能力，这些特性有助于改善土壤肥力和魔芋的营养状况，进一步提高魔芋的生长质量和产量。

18、（5）多种病原菌抑制作用：贝莱斯芽孢杆菌菌株在实验中显示出对多种植物病原真菌具有抑制作用，表明其在植物病害防治领域具有广泛的应用潜力。

19、（6）提高魔芋产业的可持续性：通过使用贝莱斯芽孢杆菌菌株qjxw44进行生物防治，可以提高魔芋产业对于病害的抵抗力，增强产业的可持续性，保障魔芋种植户的经济利益。

技术特征：

1.一种贝莱斯芽孢杆菌菌株，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌菌株为贝莱斯芽孢杆菌qjxw44，保藏名称为贝莱斯芽孢杆菌bacillus velezensis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2024年05月10日；保藏编号：cgmcc no.30596。

2.一种菌剂，其特征在于：含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株。

3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于：其活性成分为如下（a）（b）：

4.根据权利要求3所述菌剂的菌悬液和发酵液初提物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：将贝莱斯芽孢杆菌菌株在lb固体培养基上过夜培养后， 转接至无菌的lb液体培养基中，28℃、120r/min培养24 h，将发酵液在100×g离心5 min去除上清，用无菌水将菌体重悬，制得菌悬液；将贝莱斯芽孢杆菌菌株在lb固体培养基上过夜培养后，转接至无菌的lb液体培养基中，28℃、120r/min培养24 h，将发酵液在100×g离心5 min保留上清，上清液过无菌滤膜，制得无菌发酵液，即发酵液初提取物。

5.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株在制备微生物肥料中的应用。

6.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株在制备用于防治魔芋软腐病菌剂中的应用。

技术总结本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌菌株及其在魔芋软腐病中的应用，本发明的贝莱斯芽孢杆菌菌株为贝莱斯芽孢杆菌QJXW44，保藏名称为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2024年05月10日；保藏编号：CGMCC No.30596。本发明提供的菌株对魔芋软腐病具有显著的拮抗效果，通过生物防治的方式，可以有效抑制魔芋软腐病的发生和蔓延，减少了化学农药的使用。技术研发人员：钟宇,夏体渊,李金荣,牛莉莎,任禛,唐佐芯,吴涓,陈旭受保护的技术使用者：昆明学院技术研发日：技术公布日：2024/10/17