一种脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测装置及方法与流程

本发明涉及干细胞成骨分化，具体为一种脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测装置及方法。

背景技术：

1、脂肪干细胞存在于脂肪组织中，并具备多向分化的能力，可以在特定条件下分化为软骨、内皮细胞等，在成骨分化方面，脂肪干细胞同样展现出其潜力，脂肪干细胞成骨分化的研究不仅有助于深入了解骨组织再生和修复的生物学机制，还为骨缺损、骨折等临床问题的治疗提供了新的策略和方法；通过利用脂肪干细胞的成骨分化能力，可以开发新型的骨组织工程技术和生物材料，促进骨组织的再生和修复，脂肪干细胞成骨分化中早期标志位特异性标志酶，主要以碱性磷酸酶的形式呈现出来，所以对碱性磷酸酶的检测时判断脂肪干细胞成骨分化进程以及效果的重要手段。

2、现有关于脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测存在以下缺陷：一，缺少一体化的检测设备，往往需要使用多个独立的仪器和试剂，这不仅增加了操作的复杂性，还可能导致误差的累积，从而影响检测结果的准确性；二，检测方法单一，生物系统的复杂性使得单一的检测指标往往无法全面反映细胞分化的真实情况，准确性与可靠性不够稳定；三，现有的快速检测方法往往需要大型仪器，且需要专业的操作人员进行操作，且现有的快速检测方法只能实现目标分子的半定量分析，缺少一种操作简单的准确定量分析的快速检测方法。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测装置及方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测装置，包括第一壳体，所述第一壳体的一侧内壁上固定连接有第一电机，第一电机的输出端固定连接有转盘，且转盘转动连接于第一壳体上，转盘上套接有容纳瓶，第一壳体的上表面固定连接有第二电机，第二电机的输出端固定连接有丝杆，第一壳体的内壁上固定连接有第一固定板，且丝杆转动连接于第一固定板上，第一固定板的上表面固定连接有导柱，导柱上套接有第一滑块，且第一滑块螺纹连接于丝杆上，第一滑块的一侧外壁上固定连接有电子泵，电子泵的输出端固定连接有第一导管，第一壳体的两侧外壁上固定连接有第二壳体，第一壳体的另一侧外壁上固定连接有第三壳体。

3、作为本发明的进一步技术方案，所述第二壳体的一侧外壁上固定连接有第一导轨，第一导轨上滑动连接有第一底座，第一底座上设置有第一试剂瓶，第一底座的顶端设置有第一计量注射泵，且第一计量注射泵固定连接于第二壳体的一侧外壁上，第一计量注射泵的输入端导通连接于第一试剂瓶内，第一计量注射泵的输出端固定连接有第二导管，第一壳体的两侧设置有温度检测仪，且温度检测仪固定连接于第二壳体的内壁上。

4、作为本发明的进一步技术方案，所述第二壳体的一侧外壁上固定连接有第二固定板，第二固定板的上表面固定连接有第二导轨和第一电缸，第一电缸的输出端固定连接有第二滑块，第二滑块上固定连接有第一注射座，且第二导管导通连接于第一注射座上，第二壳体的内壁上固定连接有第一水浴座，第一水浴座上套接有第一反应皿。

5、作为本发明的进一步技术方案，所述第二壳体的一侧外壁上固定连接有第三固定板和第二电缸，第三固定板的上表面固定连接有第三导轨，第一壳体的两侧分别设置有荧光酶标仪和第一分光光度计，且荧光酶标仪和第一分光光度计均滑动连接于第三导轨上，荧光酶标仪和第一分光光度计均固定连接于第二电缸的输出端上。

6、作为本发明的进一步技术方案，所述第三壳体的一侧外壁上设置有第二底座，第二底座上套接有第二试剂瓶，第二底座的顶端设置有第二计量注射泵，且第二计量注射泵固定连接于第三壳体的一侧外壁上，第三壳体的一侧内壁上固定连接有第四固定板和第三电缸，第四固定板的上表面固定连接有第四导轨，第四导轨上滑动连接有第三滑块，且第三滑块固定连接于第三电缸的输出端，第三滑块上固定连接有第二注射座，第二计量注射泵的输出端固定连接有第三导管，且第三导管导通连接于第二注射座上，第三壳体的内壁上固定连接有固定座，固定座上套接有第二反应皿，第二反应皿的一侧设置有第五固定板和第四电缸，且第五固定板和第四电缸均固定连接于第三壳体的内壁上，第五固定板的上表面固定连接有第五导轨，第五导轨上滑动连接有安装座，且安装座固定连接于第四电缸的输出端上，安装座上固定连接有激光器、第二分光光度计和红外温度计。

7、作为本发明的进一步技术方案，所述第一壳体的一侧外壁上固定连接有控制台，第一壳体内设置有处理中心，且控制台电性连接于处理中心上，第一壳体上转动连接有第一转动门，第二壳体上转动连接有第二转动门，第三壳体上滑动连接有滑动盖，第三壳体的一侧外壁上固定连接有第四壳体，第四壳体内设置有移动电源。

8、一种脂肪干细胞成骨分化用的碱性磷酸酶检测方法，包括步骤一，调试设备；步骤二，准备试剂；步骤三，放入待测样品；步骤四，荧光法检测；步骤五，比色法检测；步骤六，光热法检测；步骤七，出具检测报告；

9、其中在上述步骤一中，调试装置，并通过控制台设置相关参数；

10、其中在上述步骤二中，准备各个检测所需的试剂，装入对应的底座上，并连接注射泵；

11、其中在上述步骤三中，将待测样品放入容纳瓶中，根据程序进行碱性磷酸酶检测；

12、其中在上述步骤四中，采用荧光法进行碱性磷酸酶检测；

13、其中在上述步骤五中，采用比色法进行碱性磷酸酶检测；

14、其中在上述步骤六中，采用光热法进行碱性磷酸酶检测；

15、其中在上述步骤七中，通过处理中心对检测数据进行分析，出具检测报告。

16、作为本发明的进一步技术方案，所述步骤四中，第一壳体内的第一电机带动转盘转动，进而带动其上的容纳瓶至第一检测位置，通过第一检测位置上的第二电机带动丝杆转动，进而带动第一滑块沿着第一固定板上的导柱移动，电子泵将容纳瓶中的待测样品通过第一导管输送至对应第二壳体内的第一反应皿内，通过第一水浴座控制反应温度为37℃，第一电缸带动第二滑块上的第一注射座滑动至第一反应皿内，对应的第一计量注射泵提取第一底座上第一试剂瓶内的试剂，通过第二导管和第一注射座将第一试剂瓶内的4-甲基伞形酮磷酸酯等试剂注射至第一反应皿内，4-甲基伞形酮磷酸酯注作为底物反应10～30分钟，第一注射座退回，第二电缸带动荧光酶标仪在第三固定板上的第三导轨上滑动至第一反应皿上方，荧光酶标仪通过特定波长的激发光源照射样品，使碱性磷酸酶与4-甲基伞形酮磷酸酯反应生成的荧光物质被激发到高能级，随后，这些物质会自然地返回低能级并放出可见光，即荧光信号，荧光酶标仪检测荧光信号的强度。

17、作为本发明的进一步技术方案，所述步骤五中，与步骤二一致，第一电机带动转盘转动，进而带动其上的容纳瓶至第二检测位置，通过对应位置上的电子泵将样品转移至另一侧第二壳体内的第一反应皿中，通过对应的第一计量注射泵将第一试剂瓶中的磷酸苯二钠溶液注入第一反应皿中作为反应底物，加入碳酸盐缓冲液调整反应体系的酸碱环境，在碱性条件下进行反应10～20分钟，使磷酸苯二钠水解，生成磷酸和游离酚，然后加入4-氨基安替比林和铁氰化钾，使游离酚与4-氨基安替比林作用，并经铁氰化钾氧化，生成红色的醌类化合物，通过第一分光光度计测量，反应后溶液的颜色深浅，从而确定碱性磷酸酶活性。

18、作为本发明的进一步技术方案，所述步骤六中，与步骤二一致，第一电机带动转盘转动，进而带动其上的容纳瓶至第三检测位置，通过对应位置上的电子泵将样品转移至第三壳体内的第二反应皿内，第三电缸带动第三滑块沿着第四固定板上的第四导轨滑动至第二反应皿上方，第二计量注射泵将第二底座上第二试剂瓶内的试剂通过第三导管和第二注射座定量注射至第二反应皿中，mof材料作为反应的催化剂，促进tmb与h2o2的反应，tmb溶液作为反应的底物，在碱性磷酸酶的作用下发生氧化反应，h2o2溶液作为氧化剂，参与tmb的氧化反应，充分反应生成氧化态的tmb，第四电缸带动安装座沿着第五固定板上的第五导轨滑动至第二反应皿上方，通过第二分光光度计测量体系在650nm处的吸光度，同时利用808nm的激光器对溶液进行光照，并通过红外温度计对溶液温度进行测定。

19、与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明设计有一体化的检测装置，可以自动完成检测和结果分析，从而简化操作过程，提高检测效率，避免复杂操作造成误差的累积影响检测准确性的问题，设计有多样化的检测方法，可以结合不同检测指标全面地分析脂肪干细胞成骨分化进程，提高检测结果的准确性和可靠性，同时设计有基于光热效应的快速检测方法，无需大型仪器以及专业操作人员，快速便捷地提供可以准确定量分析的检测方法。