一种藜麦蛋白糖基化偶联物及其制备方法和应用

本发明属于藜麦蛋白改性，具体涉及一种藜麦蛋白糖基化偶联物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、藜麦是一种藜科藜属双子叶假谷物，营养价值高，富含蛋白质、膳食纤维、维生素及矿物质，被誉为全球十大健康营养食品之一。藜麦中蛋白质丰富，大约占14％～20％。藜麦蛋白作为一种可以满足人体基本营养需求的无麸质的全营养食品，含有种类齐全、比例均衡的必需氨基酸，同时其具有的多种生理活性，使得人们对其营养价值及健康功效愈发重视。尽管藜麦蛋白的前景广阔，但由于藜麦中的球蛋白含量高(占总蛋白的37％)，且大多不溶于水，容易受体系酸碱改变、盐离子环境、酶和加工中的高温变性等环境因素的影响。研究发现，环节因素主要导致蛋白体系结构和功能性变化，如溶解性、乳化性、胶凝性、起泡性和热稳定性变化，而发生聚集沉淀，进而限制了藜麦在食品工业中的应用。因此，采取合适的方法对藜麦蛋白进行改性，改善其功能活性，提高利用价值，拓宽藜麦蛋白在食品加工行业中的应用是必须的。

2、美拉德反应(mr)是一种使蛋白质上的游离氨基与糖的末端还原羰基发生共价结合进行改性的方法。与物理方法依靠外力机械、化学方法额外引入化学试剂、生物方法昂贵且不稳定不同，美拉德反应(mr)具有更加绿色、安全、温和、高效的优势。根据发生条件的不同，美拉德反应可分为两种类型：干热法和湿热法。干热美拉德反应的应用往往因其反应时间较长而受到阻碍。同时，长时间的加热可能导致晚期糖基化终产物(ages)的过量产生。湿热美拉德反应在蛋白质-多糖结合和减少糖基化时间方面比干热方法更有效。研究表明，在合适条件下通过美拉德反应生成的高级反应产物不仅具有较强的功能特性，同时也保证其自身的安全性。美拉德反应后的产物作为一种新型、安全的两亲性化合物，能够被赋予良好的环境高耐受性、溶解度、乳化性、发泡性等特性，其自身和衍生物制备的纳米颗粒能够作为递送和保护生物活性化合物的优良载体。

技术实现思路

1、针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明旨在通过添加透明质酸与藜麦蛋白进行湿法糖基化反应，对藜麦蛋白进行结构修饰，改善藜麦蛋白的功能特性。

2、为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供一种藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，所述方法包括以下步骤：

3、s100：将藜麦依次经过清洗除杂、烘干去壳、磨粉、过筛处理，得到藜麦粉末；

4、s200：将藜麦粉末脱脂后，采用碱提酸沉法提取藜麦蛋白，并在-20℃保存备用；

5、s300：将藜麦蛋白配制成浓度为4mg/ml的水溶液，与浓度为8mg/ml的透明质酸水溶液混合，进行湿法美拉德反应，将反应产物透析、冻干，得到藜麦蛋白糖基化偶联物。

6、进一步的，s200所述脱脂具体包括：在藜麦粉末中加入正己烷脱脂8h，然后低温挥发去除正己烷。

7、进一步，s200所述采用碱提酸沉法提取藜麦蛋白具体包括以下步骤：

8、s201：将脱脂后的藜麦粉末按固液比为1:35配置水溶液，用1m naoh调节至ph10.5，超声、离心后取上清液；

9、s202：用1m盐酸将上清液的ph调整到4.5，并在4℃下静置过夜，然后离心、沉淀；

10、s203：将沉淀物重新悬浮在蒸馏水中，洗涤后使用1m氢氧化钠调整ph至7.0，再透析、冻干得到藜麦蛋白。

11、进一步的，所述方法中的透析过程为在4℃下用3500da透析袋透析48h。

12、进一步的，s300所述透明质酸与藜麦蛋白的质量比为1:3～3:1。

13、进一步的，s300所述透明质酸的分子量为30～50kda。

14、进一步的，s300所述反应的温度为70℃，反应时间为6h。

15、进一步的，s300所述反应在ph10条件下进行。

16、按照本发明的另一个方面，提供一种藜麦蛋白糖基化偶联物，所述藜麦蛋白糖基化偶联物根据如上所述的制备方法制备而成。

17、按照本发明的第三个方面，提供一种如上所述的藜麦蛋白糖基化偶联物在食品工业中的应用。

18、与现有技术相比，本发明能够取得下列有益效果：

19、本发明通过添加透明质酸对藜麦蛋白进行糖基化结构修饰，使得藜麦蛋白从致密有序的结构转化为更加无序的结构，带来更加灵活的结构性质和分子柔韧性，有助于改善藜麦蛋白的溶解性与乳化性能，提高其利用价值，拓宽藜麦蛋白在食品工业中的应用。

技术特征：

1.一种藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s200所述脱脂具体包括：在藜麦粉末中加入正己烷脱脂8h，然后低温挥发去除正己烷。

3.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s200所述采用碱提酸沉法提取藜麦蛋白具体包括以下步骤：

4.根据权利要求1或3所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，所述方法中的透析过程为在4℃下用3500da透析袋透析48h。

5.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s300所述透明质酸与藜麦蛋白的质量比为1:3～3:1。

6.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s300所述透明质酸的分子量为30～50kda。

7.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s300所述反应的温度为70℃，反应时间为6h。

8.根据权利要求1所述的藜麦蛋白糖基化偶联物的制备方法，其特征在于，s300所述反应在ph10条件下进行。

9.一种藜麦蛋白糖基化偶联物，其特征在于，所述藜麦蛋白糖基化偶联物根据权利要求1-8任一项所述的制备方法制备而成。

10.一种根据权利要求9所述的藜麦蛋白糖基化偶联物在食品工业中的应用。

技术总结本发明属于藜麦蛋白改性技术领域，公开了一种藜麦蛋白糖基化偶联物及其制备方法和应用，方法包括：将藜麦依次经过清洗除杂、烘干去壳、磨粉、过筛处理，得到藜麦粉末；将藜麦粉末脱脂后，采用碱提酸沉法提取藜麦蛋白，并在‑20℃保存备用；将藜麦蛋白配制成浓度为4mg/mL的水溶液，与浓度为8mg/mL的透明质酸水溶液混合，进行湿法美拉德反应，将反应产物透析、冻干，得到藜麦蛋白糖基化偶联物。本发明通过添加透明质酸对藜麦蛋白进行糖基化结构修饰，使得藜麦蛋白从致密有序的结构转化为更加无序的结构，有助于改善藜麦蛋白的溶解性与乳化性能，提高利用价值，拓宽藜麦蛋白在食品工业中的应用。技术研发人员：邹亮,李维,景凯妮,阮愉悦,丁子扬,胡一晨,吴定涛,徐霞,宋雨,曹亚楠受保护的技术使用者：成都大学技术研发日：技术公布日：2024/11/14