癌症治疗药物、检查辅助方法和治疗药物的筛选方法与流程

本发明涉及通过以在衰老的细胞表达的非翻译rna为靶标的炎症相关基因表达的抑制和细胞存活控制来治疗癌症的药剂、检查癌症的的方法、和治疗药物的筛选方法。

背景技术：

1、已知癌症由多种因素引起。作为其中之一有“细胞衰老”。细胞衰老是对细胞施加由活性氧物种等引起的氧化应激、由放射线－抗癌剂等引起的dna损伤、癌基因的激活等各种应激，细胞周期不可逆地停止的状态。细胞衰老作为dna修复机制、细胞凋亡以及由dna损伤、线粒体障碍导致的基因突变的积累而产生的癌症抑制机制发挥功能。但是，已知在体内积累的衰老细胞通过高表达各种炎性蛋白，在周围组织分泌的sasp(衰老相关分泌表型，senescence－associated secretory phenotype)诱发慢性炎症，会引起以癌症为代表的伴随于衰老的多种疾病和病症。因此，控制体内的衰老细胞或sasp，具有与抑制癌症发病、或治疗相关的可能性。

2、细胞衰老的诱导和控制机理的全貌尚未明了，但是对衰老细胞选择性诱导细胞死亡的senolytic药物、抑制衰老细胞分泌的sasp的senomorphic药物被期待具有伴随于衰老的癌症发病的预防效果、治疗效果。

3、因此，senolytic药物、senomorphic药物作为新型的癌症预防药物或治疗药物而被进行着研究。专利文献1中公开了用于将功能障碍线粒体除去、将线粒体膜电位降低剂和p53抑制剂共传递到对象细胞的抑制细胞衰老的复合体，该线粒体膜电位降低剂用于抑制sasp。专利文献2中公开了能够抑制干细胞的细胞衰老的细胞衰老抑制剂。

4、然而，专利文献1中记载的复合体的目的在于去除伴随于细胞衰老的功能障碍线粒体，因此不会引起衰老细胞的完全除去。另外，专利文献2中记载的细胞衰老抑制剂虽然确认了抗氧化作用，但是被认为并不能消除细胞衰老。

5、现有技术文献

6、专利文献

7、专利文献1：日本特开2021－24852号公报

8、专利文献2：日本特开2018－52879号公报

9、非专利文献

10、非专利文献1：casella g et al.nucleic acids res 2019,vol47(14),pp.7294-7305.

11、非专利文献2：ting t et al,science,2011,vol.6017,pp.593-596.doi:10.1126/science.1200801.epub 2011jan 13.

12、非专利文献3：kishikawa t et al,jci insight.2016,jun2；1(8):e86646.doi:10.1172/jci.insight.86646.

13、非专利文献4：solovyov a cell rep,2018,vol.23(2),pp.512-521.doi:10.1016/j.celrep.2018.03.042.

14、非专利文献5：franses j w et al,oncologist.2018,vol.23(1):pp.121-127,published online 2017aug 31,doi:10.1634/theoncologist.2017-0234.

15、非专利文献6：billingsley k j,scientific reports 2019,volume 9,articlenumber:4369.

16、非专利文献7：oezguer e et al.clin chim acta.2021,vol.514,pp.74-79.doi:10.1016/j.cca.2020.12.008.epub 2020dec 31.

17、非专利文献8：cambier l et al,scientific reports,2021,vol.11,articlenumber:94.

18、非专利文献9：nogalski,m t et al,nature communications.2019,vol.10,article number:90.

19、非专利文献10：bersani f et al,pnas,2015,112(49),pp.11548-15153.https://doi.org/10.1073/pnas.1518008112.

20、非专利文献11：nogalski,m t et al,pnas,2020,vol.117(50),pp.31891-31901,https://doi.org/10.1073/pnas.2017734117.

21、非专利文献12：kojima r et al.,nature communications,2018,vol.9,articlenumber:1305(2018),doi:10.1038/s41467-018-03733-8.

技术实现思路

1、发明所要解决的技术问题

2、如以下所详述的那样，本发明的发明人发现在正常细胞中不表达的非翻译rna在衰老细胞和癌细胞中高表达，控制炎性基因群的表达。此外，发现了在非翻译rna的表达高的衰老细胞和癌细胞中，由表达抑制来诱导细胞死亡。因此，其技术问题在于提供以该非翻译rna为靶标而抑制有害的sasp、进而清除癌微环境的衰老细胞的癌症治疗药物。另外，其技术问题在于提供用于通过检查作为靶标的非翻译rna或伴随其而表达发生变化的分子或该基因区域的表观基因组来诊断癌症的检查方法、检查药物。另外，由于发现了癌症治疗的新的靶标分子，所以其技术问题在于提供使用该靶标分子的治疗药物的筛选方法。

3、用于解决技术问题的技术方案

4、本发明涉及以下的治疗药物、检查辅助方法和治疗药物的筛选方法。

5、(1)一种医药组合物，其是衰老细胞所引起的癌症的治疗药物和/或预防药物，该医药组合物的特征在于，抑制hsatii rna的表达或阻碍其活性，和/或使ctcf表达增加。

6、发现hsatii rna表达的增加或活性阻碍、ctcf表达的减少与癌症的恶化密切相关。因此，能够对它们进行调节的物质能够治疗衰老细胞相关的癌症。

7、(2)如(1)所述的医药组合物，其特征在于，上述医药组合物是抑制hsatii rna的表达或阻碍其活性、和/或使ctcf表达增加的核酸药物。

8、特别是，如本说明书所例示的那样，调节hsatii rna、ctcf的表达或活性的核酸或化合物作为医药品有效。

9、(3)如(1)或(2)所述的医药组合物，其特征在于，以癌细胞和间质细胞为靶标。

10、以hsatii为靶标的医药组合物对于形成癌微环境的癌细胞和间质细胞两者都有效果。因此，能够进行有效的治疗。

11、(4)如(3)所述的医药组合物，其特征在于，与化疗剂或放疗联用。

12、如果通过化疗剂或放疗来诱导细胞衰老，则不仅癌细胞、而且间质细胞也被本医药组合物诱导细胞死亡。因此，对于通过现有的化疗法或放疗等不能被诱导细胞死亡而残存的癌细胞及形成癌微环境的间质细胞也可以被诱导细胞死亡。因此，本医药组合物不仅有效地治疗癌症，也有助于预防复发。

13、(5)一种检查辅助方法，其辅助癌症的检查，该方法的特征在于，检测试样中的hsatii rna和/或ctcf表达。

14、sasp因子等伴随于细胞衰老而被诱导表达的炎性基因群等也能够因不依赖于细胞衰老的炎症等而表达。但是，已知hsatii rna、ctcf表达的变化是细胞衰老特异性的现象，与癌症发病相关。因此，通过捕捉它们的表达变化，能够检测细胞衰老所引起的癌症。

15、(6)如(5)所述的检查辅助方法，其特征在于，在hsatii rna表达增加的情况和/或ctcf表达减少的情况下，判断为患有癌症。

16、对于与细胞衰老密切相关的癌症，能够期待(1)～(4)所述的医药组合物发挥高的效果。通过检查癌症是否由细胞衰老所导致，能够提供最合适的治疗药物。

17、(7)一种检查辅助方法，其辅助癌症的检查，该方法的特征在于，检测试样中的hsatiidna区域的表观基因组变化。

18、在对癌细胞诱导细胞衰老样的表现型的过程中，在hsatii rna表达增加和/或ctcf表达的减少之前，发生基因组dna的hsatii区域的松弛化(膨润化)和可及性上升等的表观基因组变化。因此，检测它们的方法能够成为检测癌症有效的检查方法。

19、(8)如(7)所述的检查辅助方法，其特征在于，辅助由细胞衰老所引起的癌症的检查。

20、基因组dna的hsatii区域的松弛化和可及性上升等的表观基因组变化被认为是在癌症发病的极初期发生的变化，因此通过对其进行检测，存在能够早期检测癌症的可能性。

21、(9)一种筛选癌症治疗药物和/或预防药物的方法，其是筛选细胞衰老所引起的癌症的治疗药物和/或预防药物的方法，该方法的特征在于，在衰老细胞的培养基中添加候补化合物，以hsatii rna表达减少、hsatii rna活性抑制、ctcf表达的增加、sasp因子的表达减少、hsatiidna区域的收缩、染色质可及性的降低中的至少任意1个为指标，选择候补化合物。

22、通过将细胞衰老特异性的变化作为指标，能够筛选新型的癌症治疗药物。特别是hsatii rna表达上升和活化、ctcf表达的降低和基因组dna的hsatii区域的松弛化、可及性的上升等的表观基因组变化是衰老细胞特异性的现象，因此通过检测其变化，能够筛选与癌症治疗药物相关的senolytic药物、senomorphic药物。

23、(10)一种与细胞衰老相关的癌症的治疗方法，其通过检测癌症的发病或进展是否与衰老细胞相关，或者通过(5)～(8)任意一项所述的检查辅助方法检测癌或间质细胞，并施用(1)～(4)所述的治疗药物，来治疗疾病。

24、(11)一种癌的治疗方法，其是与细胞衰老相关的癌症的治疗法，该癌的治疗方法的特征在于，施用抑制hsatii rna的表达或阻碍其活性、和/或使ctcf表达增加的化合物。