治疗传染病的新方法与流程

本发明涉及衍生自蛋白质angptl4的肽及其在治疗传染病中的用途。

背景技术：

1、脓毒症是全球最常见的致命疾病之一，现已被世界卫生组织确认为全球健康优先事项[1]。全球每小时约有1000人死于脓毒症，脓毒症病例数量持续大幅增加。这是少数几种在资源贫乏地区和发达国家同样猛烈袭击的条件之一。在全球范围内，每年有超过4900万人患有脓毒症，导致1100万患者死亡[1,2]。患有这些疾病的患者通常在医院的重症监护室接受治疗，估计每年花费240亿美元。经通胀调整后，治疗因这种疾病住院的患者的总费用平均每年增长19％。尽管治疗费用高昂，脓毒症往往是致命的。那些在严重脓毒症中幸存下来的人更有可能出现永久性器官损伤、认知障碍和身体残疾。

2、血管内皮细胞是体内最早接触循环细菌和/或细菌分子的细胞之一，是脓毒症诱导事件的主要靶点[1-3]。微生物毒力因子和活化血细胞释放的促炎介质的混合极大地改变了人类的血管系统。大多数内皮生理功能受到干扰，导致血管通透性增加、凝血激活并参与炎症反应。严重的内皮功能障碍会导致不同器官的缺氧损伤，导致多器官衰竭[3]。弥漫性血管内凝血也是脓毒症的主要并发症。

3、脓毒症患者的治疗方案包括抗生素治疗、清除感染源以及血液动力学、呼吸和代谢支持的组合。积极的液体复苏和血液动力学支持用于恢复组织灌注和正常化细胞代谢[2]。然而，严重脓毒症患者或感染性休克患者的死亡率仍然很高。到目前为止，旨在控制严重感染中宿主炎症反应和凝血障碍的多项临床试验取得了有限的临床成功[1]。因此，迫切需要新的策略来支持血管完整性/屏障功能，实施内皮细胞保护机制，并限制有害的止血和炎症过程。

4、血脑屏障(bbb)是一种严格调节中枢神经系统稳态的严格限制性屏障，具有调节炎症和止血的内在能力[4,5]。bbb是由连续的无窗孔特化内皮细胞形成的，这些内皮细胞表达细胞间紧密连接蛋白，限制细胞旁扩散，以及特定的转运蛋白，调节物质从血液到大脑的选择性运输和代谢[6,7]。周细胞和平滑肌细胞的高覆盖率构成了额外的屏障[8]。最后，与星形胶质细胞足突紧密接触的厚基底膜也形成了界膜[9]。这些特定特征有助于保护大脑免受入侵病原体的侵害。然而，感染过程中维持血脑屏障完整性所涉及的细胞保护机制仍然知之甚少。

5、脑膜炎奈瑟菌(nm，脑膜炎球菌)是一种侵袭性细菌病原体，能够引起严重的脓毒血症和脑膜炎。脑膜炎奈瑟菌是一种仅限于人类的细胞外革兰氏阴性双球菌，通常作为无症状携带者存在于约10％的人群的鼻咽中。这种细菌的侵袭性感染会导致严重的感染性休克[10]。一旦进入血液循环，nm就会附着在内皮细胞的顶端细胞表面，特别是在微循环中，血流速度比大血管慢，这有助于细菌附着[11]。nm与人类微血管的相互作用导致内皮功能障碍综合征，在最严重的情况下，会导致暴发性紫癜，这是一种危及生命的综合征，将脓毒性休克与血管渗漏、广泛血栓形成和30％的患者死亡相关[4]。此外，nm与脑微血管内皮细胞相互作用。在脑的蛛网膜下腔、脑实质以及脉络丛中定植于脑毛细血管[12]，使细菌能够突破这一紧密的屏障，到达脑膜和脑脊液中进行复制，引起脑膜炎。与在外周观察到的相反，这一步骤发生时bbb完整性损失最小，没有血管内凝血或血管渗漏的迹象。

技术实现思路

1、发明概述：

2、为了确定在细菌感染期间维持脑血管完整性的潜在保护机制，发明人对分离自人皮肤(hdmecs)或脑(hbmecs)微血管的原代内皮细胞进行了rna分析，这些细胞未被感染或在体外被脑膜炎球菌感染。他们发现了40个在感染后在脑内皮细胞中特异性调节的基因。与他们的假设一致，这些基因包括先天免疫反应的负调节因子，它们可能提供对过度炎症的保护，以及具有潜在血管稳定活性的因素，可能有助于脑血管保护。

3、为了寻找可能支持bbb的旁分泌和近交激肽分子/信号传导，他们将兴趣集中在angptl4(血管生成素样4)上，angptl4是一种分泌型糖蛋白，在血管通透性、血管生成、葡萄糖稳态、脂质代谢和炎症中具有多效作用[13]。angptl4是促血管生成素样蛋白家族(angptl 1-8)的成员，其与可切割连接区分隔的n-末端卷曲螺旋结构域和c-末端纤维蛋白原样结构域具有相似的结构。特别是，angptl4与angptl3和angptl8具有高度的序列同源性和相关功能。长期以来，angptl4被认为是一种孤儿配体，因为它不与促血管生成素酪氨酸激酶受体tie1和tie2结合，最近的研究表明angptl4有许多结合伴侣，如脂蛋白脂酶、整合素、钙粘蛋白或多配体聚糖[13]。迄今为止，它在血管完整性中的作用尚不清楚。已知angptl4是由缺氧诱导的，在缺血性疾病中由血管细胞产生，已被证明具有血管生成和抗血管生成的双重作用[14,15]，并根据病理生理条件、组织环境和/或其结合配体、释放和蛋白水解增加或减少血管通透性[16-20]。

4、发明人在这项研究中表明，在脓毒症的背景下，angptl4是一种主要的屏障稳定蛋白，可以保护人体免受细菌感染。他们还证明了angptl4(或衍生肽)作为辅助治疗减少细菌诱导的血管功能障碍和死亡率的潜力。

5、因此，本发明涉及衍生自蛋白质angptl4的肽及其在治疗传染病中的用途。特别地，本发明由其权利要求书限定。

技术特征：

1.一种衍生自蛋白质angptl4的肽，其包含或由氨基酸序列x1salerrlsacgsx14x15或其功能保守变体组成，其中，x1为无氨基酸或亮氨酸(l)，x14为无氨基酸或丙氨酸(a)，x15为无氨基酸或半胱氨酸(c)。

2.根据权利要求1所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中第66位至第80位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(肽p9或肽p9')或其功能保守变体。

3.根据权利要求2所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中第65位至第80位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(肽p6或肽p6')或其功能保守变体。

4.根据权利要求2所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中第56位至第83位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(肽p4或肽p4')或其功能保守变体。

5.根据权利要求2所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中第38位至第83位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(肽p1或肽p1')或其功能保守变体。

6.根据权利要求2所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中第26位至第164位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(nangptl4或nangptl4')或其功能保守变体。

7.根据权利要求2所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽包含或由seq idno：1中1位至406位的氨基酸残基组成，其中，第76和80位的氨基酸是任意天然存在的氨基酸(angptl4或angptl4')或其功能保守变体。

8.根据权利要求1-7所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，第76和80位的氨基酸可为选自半胱氨酸(cys或c)或丙氨酸(ala或a)或丝氨酸(ser或s)的氨基酸。

9.根据权利要求1-8所述的衍生自蛋白质angptl4的肽，其中，所述肽由seq id no：1或8至30或37至64中所示的氨基酸序列组成。

10.编码权利要求1-9所述的肽的核酸序列。

11.权利要求1-9所述的肽或权利要求10所述的核酸在治疗有需要的受试者的传染病中的用途。

12.根据权利要求11所述的肽或核酸，其中，所述传染病是细菌感染。

13.权利要求12所述的肽或核酸在治疗由细菌感染引起的脓毒症中的用途。

14.一种治疗有需要的受试者的传染病的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的本发明的肽、蛋白质、核酸、载体或宿主细胞。

15.i)权利要求1-9所述的肽或权利要求10所述的核酸，和ii)至少一种抗病原体感染剂，作为组合制剂，同时、单独或顺序使用，以治疗有需要的受试者的传染病。

16.一种治疗组合物，其包含本发明的抗体或肽、蛋白质、核酸、载体或宿主细胞，用于治疗有需要的受试者的传染病。

技术总结本发明涉及传染病的治疗。在这项研究中，发明人确定了在细菌感染期间维持脑血管完整性的潜在保护机制，发明人对分离自人皮肤(HDMECs)或脑(HBMECs)微血管的原代内皮细胞进行了RNA分析，这些细胞未被感染或在体外被脑膜炎球菌感染。他们发现在感染后，特别是在脑内皮细胞中有40个基因被特异性调控，尤其是血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)。他们表明，在脓毒症的背景下，ANGPTL4是一种主要的屏障稳定蛋白，可以保护机体免受细菌感染。他们还证明了ANGPTL4(或衍生肽)作为辅助治疗减少细菌诱导的血管功能障碍和死亡率的潜力。因此，本发明涉及从ANGPTL4蛋白衍生的肽及其在治疗传染病中的用途。技术研发人员：S·布尔杜卢,J·齐韦里,L·勒盖内克受保护的技术使用者：INSERM（法国国家健康医学研究院）技术研发日：技术公布日：2024/12/2