一种人参皂苷Rb1转化制备人参皂苷Rg3和Rg5的方法

本发明属于生物医药领域，特别涉及一种人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法。

背景技术：

1、天然产物人参(panax ginseng)的有效成分是人参皂苷。现代药理研究的结果表明，人参皂苷有220种之多。人参皂苷的常量组分为rb1、rb2、rc、rd、rg1、re，这些成分占总皂苷的80-90％以上，但往往这些常量组分没有或有较低的抗癌活性。人参皂苷的稀有成分如人参皂苷rh1、rh2、rg3、rg5、rg6由于在抗肿瘤方面作用显著而日益受到关注。极稀有人参皂苷rg5一般存在于红参中，具有抑制肿瘤细胞增长，具有抗肝癌、胃癌、食管癌、宫颈癌等药理作用。除此之外，人参皂苷rg5还具有抗过敏、抗炎、抗记忆障碍、抗抑郁、预防糖尿病、美白等作用。常规方法如酸水解、碱水解或直接从红参中提取rg3和rg5存在着原药材利用率低，产物产率低等问题。目前，获得稀有人参皂苷较直接的方法是微生物或酶转化方法。相对于化学转化而言，微生物/酶转化条件温和，反应周期短，专属性强，反应无需大量的化学试剂。但是微生物/酶的制备需要有特定的反应水解酶，并且反应的产物取决于微生物或酶的活性，若规模化生产时，需要培养和消耗大量的微生物菌种/生物酶。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对于现有人参皂苷rg3和rg5获得和提取方法存在的问题，提供了一种人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法。该方法使用低共熔溶剂-缓冲盐作为反应溶媒，制备过程和下游处理过程简单、产品转化产率高、纯度高，可高效制备稀有人参皂苷rg3和rg5混合物并可进一步分离得到人参皂苷rg3和rg5单一成分。

2、一种人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，将人参皂苷rb1于反应溶媒中经转化反应生成人参皂苷rg3和rg5。

3、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，包括如下步骤：

4、1)将人参皂苷rb1粗提物加入反应溶媒中溶解，人参皂苷rb1粗提物与反应溶媒的质量体积比为1-20mg/ml；

5、2)将混合液加热，进行转化反应；

6、3)反应结束后，将反应溶液冷却至室温，经分离处理，得到人参皂苷rg3和rg5的混合物。

7、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，包括如下步骤：

8、1)将人参皂苷rb1粗提物加入反应溶媒中溶解，人参皂苷rb1粗提物与反应溶媒的质量体积比为1-20mg/ml；

9、2)将混合液加热，进行转化反应；

10、3)反应结束后，将反应溶液冷却至室温，经分离处理，得到人参皂苷rg3和rg5的混合物；

11、4)将人参皂苷rg3和rg5的混合物分离得到人参皂苷rg3和人参皂苷rg5单一成分。

12、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，所述步骤1)中，反应溶媒为低共熔溶剂(des)-酸性缓冲溶液。

13、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，所述的des以氯化胆碱作为氢键受体，以醇类、尿素或醇类和尿素的混合物为供体。较好的，所述醇类为乙二醇、丙二醇或甘油。酸性缓冲溶液为ph 3至5的缓冲溶液。

14、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，反应溶媒中des的质量百分含量为1-20wt％。

15、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，所述步骤2)中，首先，将混合液加热至30～50℃，反应40～60min；然后，升温至80～85℃，反应10～30min；

16、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，所述步骤3)中，

17、分离处理的方法为：

18、方法一：

19、a、将冷却后的反应溶液用滤膜过滤，收集絮状沉淀和上清液；

20、b、将絮状沉淀用水洗涤，以除去反应溶液中的盐成分，再将清洗后的沉淀烘干；

21、c、将上清液置于透析膜中透析，以除去上清液中的盐成分，再将透析后的上清液干燥；

22、d、收集步骤b和c烘干和干燥得到的产品，即为人参皂苷rg3和rg5混合物；

23、或者，方法二：

24、a、将冷却后的反应溶液全部转移至透析膜中进行透析，以除去反应溶液中的盐成分；

25、b、透析后的反应溶液经过滤，得到沉淀及滤液，沉淀和滤液分别干燥，收集干燥得到的产品，即为人参皂苷rg3和rg5混合物；

26、或者，方法三：

27、a、将冷却后的反应溶液用滤膜过滤，收集絮状沉淀和上清液；

28、b、将絮状沉淀用水洗涤，以除去反应溶液中的盐成分，再将清洗后的沉淀烘干；

29、c、将上清液经过离子交换树脂柱吸附和除盐，再用有机溶剂洗脱人参皂苷rg3和rg5，洗脱液经过除去有机溶剂、干燥；优选的，将上清液在离子交换树脂柱中吸附一段时间，然后用去离子水除去上清液中的盐成分，再用有机溶剂如甲醇洗脱吸附的人参皂苷rg3和rg5，洗脱液经过除去有机溶剂、干燥，得到人参皂苷rg3和rg5混合物；

30、d、收集步骤b和c烘干和干燥得到的产品，即为人参皂苷rg3和rg5混合物。

31、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，步骤4)将人参皂苷rg3和rg5的混合物分离，分别得到人参皂苷rg3和人参皂苷rg5的方法为：

32、方法1、将步骤3)得到的人参皂苷rg3和rg5混合物，以有机溶剂提取，将提取液经过磺酸基色谱柱或c18色谱柱梯度洗脱分离，分别得到人参皂苷rg5和r-型人参皂苷rg3；

33、或者，方法2、取所述分离处理的方法一、二或三中步骤b得到的干燥沉淀，以有机溶剂提取，将提取液经过磺酸基色谱柱或c18色谱柱梯度洗脱分离，分别得到单一成分的人参皂苷rg5和r-型人参皂苷rg3；

34、或者，方法3、取所述分离处理的方法一中步骤c的透析后的上清液、方法二中步骤b的滤液、或方法三中步骤c的洗脱液，经过磺酸基色谱柱或c18色谱柱梯度洗脱分离，得到单一成分的人参皂苷rg5和s-型人参皂苷rg3。

35、进一步的，上述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，滤膜规格为0.45-10微米。

36、与现有技术相比，本发明的优势在于：

37、1.本发明所得的产品单一，产率高、产品提纯方便。

38、2.本发明方法简单，原料成本低廉、产品价值高。

39、3.本发明产品反应和纯化过程绿色环保。

技术特征：

1.一种人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，将人参皂苷rb1于反应溶媒中经转化反应生成人参皂苷rg3和rg5。

2.根据权利要求1所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求1所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求1至3任意一项所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，反应溶媒为des-缓冲溶液。

5.根据权利要求4所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，所述的des以氯化胆碱作为氢键受体，以醇类、尿素或醇类和尿素的混合物为供体；所述缓冲溶液为ph 3至5的缓冲溶液。

6.根据权利要求4所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，反应溶媒中des的质量百分含量为1-20wt％。

7.根据权利要求2或3所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，所述步骤2)中，首先，将混合液加热至30～50℃，反应40～60min；然后，升温至80～85℃，反应10～30min。

8.根据权利要求2或3所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，步骤3)中分离处理的方法为：

9.根据权利要求8所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，步骤4)将人参皂苷rg3和rg5的混合物分离，分别得到人参皂苷rg3和人参皂苷rg5的方法为：

10.根据权利要求8所述的人参皂苷rb1转化制备人参皂苷rg3和rg5的方法，其特征在于，分离处理的方法中，滤膜规格为0.45-10微米。

技术总结本发明的目的是针对于现有人参皂苷Rg3和Rg5获得和提取方法存在的问题，提供了一种人参皂苷Rb1转化制备人参皂苷Rg3和Rg5的方法。本发明的人参皂苷Rb1转化制备人参皂苷Rg3和Rg5的方法，将人参皂苷Rb1于反应溶媒中经转化反应生成人参皂苷Rg3和Rg5。该方法使用低共熔溶剂‑缓冲盐溶液作为反应溶媒，制备过程和下游处理过程简单、产品转化产率高、纯度高，可高效制备稀有人参皂苷Rg3和Rg5混合物，并可进一步分离得到人参皂苷Rg3和Rg5单一成分。技术研发人员：吴秀红,王绍艳,杨亚宁,丛景香,张伟受保护的技术使用者：辽宁科技大学技术研发日：技术公布日：2025/1/6