β-己糖胺酶抑制剂在制备治疗神经损伤药物中的应用

本发明涉及生物医药领域，特别涉及β-己糖胺酶(hexosaminidase subunitbeta,hexb)抑制剂在制备治疗神经损伤药物中的应用。

背景技术：

1、脊髓损伤往往导致患者运动和感觉功能的永久性障碍，严重影响了患者及其家庭的生活质量。系统而全面地研究脊髓损伤的生理病理过程，探索其中细胞分子的机制，对于制定新的有效治疗策略至关重要。正常情况下，健康的髓鞘组织在轴突周围形成致密的多层绝缘质膜，促进轴突快速传递电信号和进行新陈代谢。脊髓损伤后，髓鞘大量丢失，一周内少突胶质细胞减少90％以上，髓鞘的缺失进一步加剧了功能障碍和轴突减少。研究脊髓损伤后少突胶质细胞的调节及分子机制，将为脊髓损伤治疗开辟新的途径，具有重要的意义和价值。

2、hexb(hexosaminidase subunit beta)是一种蛋白质编码基因，其编码溶酶体酶氨基己糖苷酶的β亚基，可以催化神经节苷脂的降解。hexb基因的突变导致gm2神经节苷脂在神经元和神经退行性疾病中的积累，称为gm2神经节苷脂沉积症。目前尚无hexb在神经损伤中的报道。

技术实现思路

1、本发明首次公开了β-己糖胺酶编码基因hexb在大鼠脊髓损伤后表达上调，且与少突胶质前体细胞的增殖和分化密切相关，有潜力成为脊髓神经损伤修复的新靶点。

2、本发明具体技术方案如下：

3、β-己糖胺酶抑制剂在制备与少突胶质细胞增殖和分化有关的疾病药物中的应用。

4、本发明所述β-己糖胺酶ncbl reference sequence:nm_001011946.2。

5、本发明所述的应用，所述抑制剂为β-己糖胺酶或其编码基因的负调控剂，包括靶向β-己糖胺酶的蛋白类抑制剂、核酸适配体和/或β-己糖胺酶编码基因的干扰rna、grna、microrna、小分子化合物抑制剂和以上组合的抑制剂。

6、本发明一个具体的示例，所述负调控剂是靶向β-己糖胺酶基因的sirna。

7、所述β-己糖胺酶基因的sirna的序列如下所示：

8、si hexb-1正义链：5’gataagggaaagactggtc3’，seq id no:1；

9、si hexb-1反义链：5’gaccagtctttcccttatc3’，seq id no:2；

10、si hexb-2正义链：5’tgttgtatttagacttggg3’，seq id no:3；

11、si hexb-2反义链：5’cccaagtctaaatacaaca3’，seq id no:4；

12、si hexb-3正义链：5’tgtacaagtagagaatagg3’，seq id no:5；

13、si hexb-3反义链：5’cctattctctacttgtaca3’，seq id no:6。

14、本发明所述的应用，所述与少突胶质细胞增殖和分化有关的疾病为神经损伤、神经退行性疾病或癌症。优选为中枢神经损伤。进一步的，所述中枢神经损伤为脊髓损伤。

15、本发明利用测序技术，发现hexb在大鼠脊髓损伤后表达上调。qrt-pcr结果显示，与0d相比，hexb在损伤1d后表达显著增加。针对hexb全长序列，设计sirna，进行sirna干扰实验。edu染色结果显示干扰hexb的表达明显抑制少突胶质前体细胞的增殖。体外分化实验结果显示，干扰hexb的表达明显促进少突胶质前体细胞分化为成熟的少突胶质细胞。体内注射hexb sirna，可以促进大鼠脊髓半切损伤后的运动功能恢复。本发明研究结果显示hexb在脊髓损伤修复过程中可以调节少突胶质细胞的增殖和分化，不仅有助于更好地理解hexb在中枢神经损伤修复过程中起到的重要作用，更重要的是为脊髓神经损伤后的治疗提供新的靶点，β-己糖胺酶抑制剂可以成为脊髓神经损伤治疗药物的新的选择。

技术特征：

1.β-己糖胺酶抑制剂在制备与少突胶质细胞增殖和分化有关的疾病药物中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述抑制剂为β-己糖胺酶或其编码基因的负调控剂。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述负调控剂包括靶向β-己糖胺酶的蛋白类抑制剂、核酸适配体和/或β-己糖胺酶编码基因的干扰rna、grna、microrna、小分子化合物抑制剂和以上组合的抑制剂。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述负调控剂是靶向β-己糖胺酶基因的sirna和/或基于载体的shrna。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述β-己糖胺酶基因的sirna序列如下：

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述与少突胶质细胞增殖和分化有关的疾病为神经损伤、神经退行性疾病或癌症。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述神经损伤为中枢神经损伤。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于所述中枢神经损伤为脊髓损伤。

技术总结本发明提供了β‑己糖胺酶(Hexosaminidase Subunit Beta,Hexb)抑制剂在制备治疗与少突胶质细胞增殖和分化有关的疾病药物中的应用。本发明研究发现Hexb在大鼠脊髓损伤后表达上调，且与少突胶质前体细胞的增殖和分化密切相关，干扰Hexb的表达能够明显促进少突胶质前体细胞分化为成熟的少突胶质细胞，进一步研究结果显示体内注射Hexb siRNA能够促进大鼠脊髓半切损伤后的运动功能恢复。本发明为脊髓神经损伤后的治疗提供了新的药物选择。技术研发人员：姚淳,吕烨华,季凌云,戴慧,于彬,糜大国受保护的技术使用者：南通大学技术研发日：技术公布日：2025/1/6