一种可缓解溃疡性结肠炎相关结直肠癌的黏膜乳杆菌及其应用

本发明涉及一种可缓解溃疡性结肠炎相关结直肠癌的黏膜乳杆菌及其应用，属于微生物以及医药。

背景技术：

1、结直肠癌是一种恶性消化道肿瘤，严重威胁着人类的健康，其发病率位居全球肿瘤发病率的第三位，死亡率是全球恶性肿瘤死亡率的第二位，我国人民患结直肠癌的风险也逐年上升。结直肠癌主要分为散发性结直肠癌和溃疡性结肠炎相关结直肠癌，前者主要由于遗传因素的改变而引起，后者的风险来自炎症、膳食、生活方式等外界环境的因素。目前结直肠癌的临床治疗主要为各类放化疗，会对患者产生一定的副作用。益生菌作为一种新型的干预方式，其在多种疾病中的缓解和治疗作用逐步得到验证，例如增强免疫力、抑制肠道炎症、缓解过敏反应和预防肿瘤等。

2、肠道是结直肠癌最直接的病灶区域，在这里也存在着数以百万计的肠道菌群。越来越多的研究证明，肠道菌群与人体健康密切相关。菌群代谢物是肠道菌群参与维持肠道稳态的重要介质。色氨酸是人体必需氨基酸，无法由人体自主产生，但可以作为生物前体被肠道微生物代谢为吲哚丙烯酸(ia)、吲哚乙酸、吲哚乳酸等吲哚类物质。根据之前的研究，色氨酸总吲哚产物在结直肠癌病人中显著降低。已有研究报道，色氨酸-吲哚类代谢物具有良好的抗炎能力，但是，尚未发现能够体外产生吲哚丙烯酸、提高肠道中吲哚丙烯酸含量，并且能够缓解溃疡性结肠炎相关结直肠癌的黏膜乳杆菌。

技术实现思路

1、为了解决目前存在的问题，本发明提供了一种通过提高机体色氨酸吲哚代谢物吲哚丙烯酸含量，来改善/缓解溃疡性结肠炎相关结直肠癌的黏膜乳杆菌。

2、本发明还提供了含有所述黏膜乳杆菌ccfm1384的微生物制剂。

3、在本发明的一种实施方式中，所述微生物制剂中，含有所述的黏膜乳杆菌ccfm1384的活菌株、灭活菌株或死菌株，或含有黏膜乳杆菌ccfm1384的发酵液，或含有黏膜乳杆菌ccfm1384的冻干粉，或含有黏膜乳杆菌ccfm1384的裂解物，或含有黏膜乳杆菌ccfm1384的提取物。

4、本发明还提供了含有所述的黏膜乳杆菌ccfm1384，或所述的微生物制剂的产品。

5、在本发明的一种实施方式中，所述产品包含食品、药品或保健品。

6、在本发明的一种实施方式中，所述食品包含发酵果蔬、发酵乳、乳酪、含乳饮料或乳粉。

7、在本发明的一种实施方式中，所述药品还含有药物载体和/或药用辅料；所述药物载体包括微囊、微球、纳米粒和/或脂质体；所述药物辅料包括填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、赋形剂和/或矫味剂。

8、本发明还提供了黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384在制备预防/缓解结肠癌的药物中的应用。

9、在本发明的一种实施方式中，所述黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384是从人群粪便中分离得到的。

10、在本发明的一种实施方式中，所述黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384的生长特性：该菌株为兼性厌氧菌，接入mmrs液体培养基中，于37℃厌氧培养24h最佳。

11、在本发明的一种实施方式中，所述黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384的菌落特征：在mmrs固体培养基上呈乳白色，不透明，圆形凸起，边缘整齐光滑。

12、在本发明的一种实施方式中，所述药物中，黏膜乳杆菌ccfm1384的活菌数ccfm1384活菌数≥1×108cfu/ml或者≥1×108cfu/g。

13、在本发明的一种实施方式中，所述黏膜乳杆菌ccfm1384至少有(a)～(g)一方面的作用：

14、(a)缓解结肠癌模型小鼠体重损失，提升存活率，改善便血情况；

15、(b)减少结肠癌模型小鼠肿瘤数量；

16、(c)减少结肠癌模型小鼠il-17a、il-1β、ifn-γ促炎因子的水平；

17、(d)提高结肠癌模型小鼠抗炎因子il-10的水平；

18、(e)抑制结肠癌模型小鼠癌细胞增殖、促进细胞凋亡；

19、(f)抑制pi3k-akt-mtor信号通路；

20、(g)提高结肠癌模型小鼠结肠吲哚丙烯酸(ia)水平。

21、所述药物还包括药物载体和药物辅料。

22、在本发明的一种实施方式中，所述药物载体包括微囊、微球、纳米粒和/或脂质体。

23、在本发明的一种实施方式中，所述药物辅料包括填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、赋形剂和/或矫味剂。

24、在本发明的一种实施方式中，所述药物的剂型包括混悬剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂、注射剂、栓剂、灌肠剂、气雾剂、贴剂或滴剂。

25、本发明还提供了黏膜乳杆菌ccfm1384在提高肠道中吲哚衍生物含量中的应用。

26、在本发明的一种实施方式中，所述吲哚衍生物包括吲哚丙烯酸、吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚乳酸。

27、本发明还提供了黏膜乳杆菌ccfm1384在生产吲哚衍生物中的应用，所述应用以非疾病的诊断与治疗为目的。

28、在本发明的一种实施方式中，将所述黏膜乳杆菌ccfm1384添加至培养基中进行发酵，所述培养基包括mmrs培养基；所述吲哚衍生物包括吲哚丙烯酸、吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚乳酸。

29、有益效果：

30、1、本发明所述黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384可以在体外培养后产生吲哚丙烯酸ia，1×108cfu/ml黏膜乳杆菌ccfm1384对应ia的产量为21.40ng/ml。

31、2、本发明所述黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384可以有效改善溃疡性结肠炎相关结直肠癌症状，具体体现在：

32、(1)结肠癌模型小鼠体重降低显著减少，由24.33±0.51g升高到了26.35±0.48g；

33、(2)结肠癌模型小鼠存活率升高，由50％提高到75％；

34、(3)结肠癌模型小鼠结肠长度由4.55±0.21cm升高到了5.9±0.26cm，与模型组小鼠结肠长度相比具有显著性差异；

35、(4)结肠癌模型小鼠肿瘤结节数减少，由6±0.82个降低到了3±0.71个；

36、(5)结肠癌模型小鼠脾脏指数降低，由0.0096±0.003降低到了0.005±0.001；

37、(6)结肠癌模型小鼠结肠肿瘤组织增殖标记物ki67阳性率降低，由13.97±0.51％降低到了10.26±0.87％；

38、(7)结肠癌模型小鼠结肠肿瘤组织tunel阳性细胞百分比升高，由0.33±0.14％上升到1.02±0.30％；

39、结肠癌模型小鼠结肠中炎症因子il-1β浓度由71.33±5.27pg/mg蛋白降低到了36.88±5.61pg/mg蛋白；

40、(8)结肠癌模型小鼠结肠中炎症因子ifn-γ浓度由4.63±0.26pg/mg蛋白降低到了2.63±0.28pg/mg蛋白；

41、(9)结肠癌模型小鼠结肠中炎症因子il-17a浓度由20.95±2.49pg/mg蛋白降低到了12.60±2.50pg/mg蛋白；

42、(10)结肠癌模型小鼠结肠中抗炎因子il-10浓度由2.61±0.90pg/mg蛋白升高到了25.00±6.64pg/mg蛋白；

43、(11)结肠癌模型小鼠结肠中zo-1的mrna相对表达量由0.17升高为1.03±0.17，且与模型组相比具有显著性差异；结肠炎小鼠结肠中claudin-1的mrna相对表达量由0.30±0.19升高为1.30±0.32；结肠癌模型小鼠结肠中muc-2的mrna相对表达量由0.28±0.14升高到1.07±0.03；

44、(12)结肠癌模型小鼠结肠中pi3k的mrna相对表达量由3.04±0.09降低到0.86±0.40；结肠癌模型小鼠结肠中akt的mrna相对表达量由2.56±0.22降低到0.63±0.52；结肠癌模型小鼠结肠中mtor的mrna相对表达量由1.79±0.17降低到1.16±0.17；

45、(13)结肠癌模型小鼠结肠中bax的mrna相对表达量由0.23±0.07升高到1.12±0.17；结肠癌模型小鼠结肠中bcl-2的mrna相对表达量由3.72±0.19降低到2.60±0.26；结肠癌模型小鼠结肠中bcl-xl的mrna相对表达量由2.43±0.12降低到0.36±0.07，且与模型组相比具有显著性差异；

46、(14)结肠癌模型小鼠结肠内容物中吲哚丙烯酸浓度从0.992ng/ml上升到13.397ng/ml，与模型组相比具有显著性差异，且与对照组相比没有显著性差异。

47、因此，黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384在制备预防和/或缓解溃疡性结肠炎相关结直肠癌的药品中，具有巨大的应用前景。

48、生物材料保藏

49、一株黏膜乳杆菌(limosilactobacillus mucosae)ccfm1384，其分类学命名为：limosilactobacillus mucosae，已于2024年05月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(gdmcc)，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏编号为gdmcc no：64507。