一种具有免疫活性的山楂多肽制备方法与流程

本发明涉及多肽制备，尤其涉及一种具有免疫活性的山楂多肽制备方法。

背景技术：

1、多肽是由两个以上氨基酸残基通过肽键连接而成的生物分子。它们通常由10到100个氨基酸残基组成，相对于蛋白质来说，多肽的长度更短。多肽在生物体内起着各种重要的生理和生化功能，如携带信息、调节代谢、参与免疫反应等。多肽作为生物体内重要的生物分子，在医药、食品、农业等领域具有广泛的应用前景，因此对多肽的提取、分离和研究具有重要意义。

2、中国专利公开号：cn1335404a公开了一种多肽的制备工艺,是以碱皮边角副废物和/或碱二层皮为原料,经水洗、预处理,预处理后的原料经机械碎化成小块,再用胰蛋白酶、微生物酶、中性蛋白酶、地衣芽孢杆菌酶、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,然后加热使酶失活,再经过滤、除盐纯化、真空浓缩、喷雾干燥、收集、分装即得无变性的多肽,对环境友好,无毒害污染物产生,生产成本低,产品的率高,氨基酸总量超过90％。

3、但是，现有技术中，未根据山楂的特性对山楂进行合适的预处理，由于将山楂进行破碎后，由于山楂颗粒间的黏性较大，山楂颗粒间存在黏连，导致山楂颗粒与提取液的接触面积较小，从而提取量较低以及提取效率较低的问题。

技术实现思路

1、为此，本发明提供一种具有免疫活性的山楂多肽制备方法，用以克服现有技术中未根据山楂的特性对山楂进行合适的预处理，由于将山楂进行破碎后，由于山楂颗粒间的黏性较大，山楂颗粒间存在黏连，导致山楂颗粒与提取液的接触面积较小，从而提取量较低以及提取效率较低的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供一种具有免疫活性的山楂多肽制备方法，包括：

3、骤s1，获取山楂样本，通过图像采集单元获取山楂样本图像，根据山楂样本图像获取山楂色度，结合山楂样本易碾碎值计算山楂成熟表征参量，所述山楂样本易碾碎值为对山楂样本施加使山楂样本厚度达到预设厚度时的压力值；

4、步骤s2，根据所述山楂成熟表征参量对山楂预处理参数进行调整，所述山楂预处理参数包括冷冻温度以及冷冻时长；

5、步骤s3，对预处理完成后的山楂进行破碎处理，获取山楂粉末；

6、步骤s4，将山楂粉末按照预定比例加入纯化水获取山楂溶液，预设时间后获取山楂溶液的ph值，根据山楂溶液的ph值判定是否添加缓冲液，并确定缓冲液的添加量；

7、步骤s5，在山楂溶液中加入酶获取山楂多肽提取液，根据山楂溶液色度值判定是否完成提取；

8、步骤s6，对提取液进行过滤后，将提取液进行液氮预冻，直至所述提取液结冰，将结冰的提取液放置于冷冻干燥机进行冻干，获取干粉状山楂多肽。

9、进一步地，所述步骤s1中，根据山楂样本图像获取山楂色度的过程包括，

10、获取山楂样本图像；

11、提取山楂样本图像中山楂样本区域；

12、通过图像分析软件获取山楂样本区域中平均色度；

13、将所述平均色度确认为山楂色度。

14、进一步地，所述步骤s1中，获取山楂样本易碾碎值的过程包括，

15、使用设置有压力传感器的压板对山楂样本施加压力；

16、在压板对山楂样本进行压制的过程中获取若干次压板的压力值；

17、将山楂样本压制至预设厚度时停止压制；

18、计算压板压制山楂样本过程中的平均压力值；

19、将所述平均压力值确认为山楂样本易碾碎值。

20、进一步地，所述步骤s1中，根据公式(1)计算山楂成熟表征参量，

21、

22、公式(1)中，c表示山楂成熟表征参量，f表示山楂样本易碾碎值，f0表示预设山楂样本易碾碎值阈值，s表示山楂色度，s0表示预设山楂色度阈值。

23、进一步地，所述步骤s2中，根据所述山楂成熟表征参量对山楂预处理参数进行调整，其中，所述山楂成熟表征参量与冷冻温度以及冷冻时长呈负相关。

24、进一步地，所述步骤s4中，将山楂粉末按照预定比例加入纯化水，其中，纯化水与山楂粉末的比例值范围为2-3。

25、进一步地，所述步骤s4中，根据山楂溶液的ph值判定是否添加缓冲液的过程包括，

26、将山楂溶液的ph值与预设山楂溶液的ph值对比阈值进行对比；

27、若山楂溶液的ph值小于预设山楂溶液的ph值对比阈值，则判定添加缓冲液；

28、若山楂溶液的ph值大于或等于预设山楂溶液的ph值对比阈值，则判定不添加缓冲液。

29、进一步地，所述步骤s4中，确定缓冲液的添加量，其中，所述山楂溶液的ph值与所述缓冲液的添加量呈负相关。

30、进一步地，所述步骤s5中，根据山楂溶液色度值判定是否完成提取的过程包括，

31、每隔预设时间获取山楂多肽提取液的色度值；

32、根据相邻两次获取的山楂多肽提取液的色度值计算山楂多肽提取液的色度值差值；

33、将山楂多肽提取液的色度值差值与预设色度值差值对比阈值进行对比；

34、若山楂多肽提取液的色度值差值小于所述预设色度值差值对比阈值，则判定完成提取。

35、进一步地，所述步骤s6中，将结冰的提取液放置于冷冻干燥机进行冻干，其中，放置的时间范围在48h-50h。

36、与现有技术相比，本发明通过计算山楂成熟表征参量，对山楂预处理参数进行调整，对预处理完成后的山楂进行破碎处理，获取山楂粉末，将山楂粉末按照预定比例加入纯化水获取山楂溶液，获取山楂溶液的ph值，判定是否添加缓冲液，并确定缓冲液的添加量，在山楂溶液中加入酶获取山楂多肽提取液，根据山楂溶液色度值判定是否完成提取，对提取液进行过滤后，将提取液进行液氮预冻，直到提取液结冰，将结冰的提取液置于冷冻干燥机进行冻干，获取干粉状山楂多肽，本发明通过对山楂进行预处理，增大山楂粉末提取过程中的接触面积，可靠把控山楂多肽制备进程，提高山楂多肽制备效率以及制备产量。

37、尤其，本发明根据山楂样本图像获取山楂色度，结合山楂样本易碾碎值计算山楂成熟表征参量，由于山楂的色度以及山楂的易碾碎程度是表征山楂是否成熟的重要表征参数，而山楂成熟度越高时，对山楂进行粉碎处理，山楂颗粒间的粘稠性较大，山楂可以难以完全分开，从而与纯化水以及提取液的接触面积较小，提取效率较低，通过计算山楂成熟表征参量，可以对山楂进行预处理提供数据支持，从而增大山楂与纯化水以及提取液的接触面积，提高提取效率以及制备产量。

38、尤其，本发明根据山楂成熟表征参量对山楂预处理参数进行调整，由于山楂的成熟度较高时，对山楂进行粉碎，山楂颗粒间的粘稠度也较高，而山楂的成熟度较低时，对山楂进行粉碎，山楂颗粒间的粘稠度相对较低，通过将山楂进行不同冷冻时长以及不同冷冻温度的预处理，可以防止山楂出现过硬，从而防止出现对山楂的粉碎耗能较大，制备过程不够节能的现象，使得山楂多肽的制备过程高效且节能。

39、尤其，本发明根据山楂溶液的ph值判定是否添加缓冲液，并确定缓冲液的添加量，由于山楂酸性较大时，多肽可能会受到一些不可逆的影响，如水解、氧化或聚集等，此外，酸性环境也可能会影响到提取剂的活性，从而降低提取效率，添加缓冲液可以将溶液的ph值调节到一个适当的范围内，提供一个稳定的环境，有助于维持山楂多肽的稳定性和提取效率。

40、尤其，本发明根据山楂溶液色度值判定是否完成提取，由于山楂多肽在提取过程中，山楂中含有各种化学成分，它们在提取过程中可能会释放到溶液中，导致颜色的变化，提取过程中ph值的变化可能会影响山楂中的化学成分，进而影响溶液的颜色，等到提取完成后，溶液颜色不再发生变化，根据溶液色度变化可以对提取进行进行可靠性估计，从而提高山楂多肽的制备效率。

41、附图说明

42、图1为本发明实施例的具有免疫活性的山楂多肽制备方法的步骤图；

43、图2为本发明实施例的根据山楂溶液的ph值判定是否添加缓冲液逻辑判定图；

44、图3为本发明实施例的根据山楂溶液色度值判定是否完成提取逻辑判定图；

45、图4为本发明实施例压板压制山楂样本示意图；