一种橡胶树转录因子HbMAX2、克隆方法和应用

本发明属于生物领域，具体涉及一种橡胶树转录因子hbmax2、克隆方法和应用。

背景技术：

1、天然橡胶作为一种综合性能优良的弹性材料,具有耐曲折的可塑性、良好的绝缘性、隔水隔气的气密性、抗拉伸和坚韧的耐磨性能等,被广泛用于工业、国防、交通、民生、医药、卫生等领域，是一种重要的工业原料和战略资源。

2、由于橡胶的应用越来越广泛，其分子生物学的研究也不断深入和发展，基因表达分析也逐渐应用于揭示橡胶树基因表达和调控的机理。因此，对橡胶树中重要性状基因定位、克隆、功能等，对于橡胶树的综合开发利用具有重要的意义。非生物胁迫严重影响橡胶树的正常生长、生产，是橡胶树产业中急需解决的关键问题。

3、因此，通过挖掘具有抗逆功能的橡胶树基因，进一步验证其在非生物胁迫上的调控功能，对深入研究橡胶树遗传改良育种具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种橡胶树转录因子hbmax2、克隆方法和应用。

2、本发明的第一个方面是提供一种橡胶树hbmax2基因，其核苷酸序列如seq id no:1所示。

3、本发明的第二个方面是提供一种橡胶树转录因子hbmax2，其为本发明第一个方面所述橡胶树hbmax2基因编码的蛋白质。

4、本发明的第三个方面是提供如本发明第一个方面所述的橡胶树hbmax2基因、或者如本发明第二个方面所述的橡胶树转录因子hbmax2在提高酵母抗氧化胁迫的能力中的应用。

5、本发明的第四个方面是提供如本发明第一个方面所述的橡胶树hbmax2基因、或者如本发明第二个方面所述的橡胶树转录因子hbmax2在提高酵母抗h2o2胁迫的能力中的应用。

6、本发明的第五个方面是提供含有本发明第一个方面所述橡胶树hbmax2基因编码区的重组载体或宿主菌。

7、其中，重组载体的原始载体可以采用基因重组领域中常用的载体，例如病毒、质粒等。本发明对此不进行限定。在本发明的一个具体实施方式中，所述原始载体采用35s:gfp、pyes2等载体质粒，但应当理解的是，本发明还可以采用其他质粒、或者病毒等。

8、本发明的第六个方面是提供如本发明第五个方面所述的重组载体或宿主菌在提高酵母抗氧化胁迫的能力中的应用。

9、本发明的第七个方面是提供如本发明第五个方面所述的重组载体或宿主菌在提高酵母抗h2o2胁迫的能力中的应用。

10、本发明的第八个方面是提供一种本发明第一个方面所述橡胶树hbmax2基因的克隆方法：提取橡胶树叶片中的总rna，反转录为cdna，以cdna第一链为模板，以hbmax2-f：atggccgttccaaccacc；hbmax2-r：tcagtcgagaatatggcggc为引物，进行pcr扩增，回收扩增产物，即得。

11、本发明的第九个方面是提供一种引物对，所述引物对为hbmax2-f：atggccgttccaaccacc；hbmax2-r：tcagtcgagaatatggcggc；或者所述引物对为qhbmax2-f：tggagtcgcagcttgatgg；qhbmax2-r：agagtcttgtgaagcaaacaagcc；或者所述引物对为hbmax2-gfp-f：gtcgacggtatcgataagcttatggccgttccaaccacc；hbmax2-gfp-r：tttactcatactagtggatccgtcgagaatatggcggctgt；所述引物对为hbmax2-pyes2-f：actatagggaatattaagcttatggccgttccaaccacc；hbmax2-pyes2-r：ccctctagatgcatgctcgaggtcgagaatatggcggctgt。

12、本发明首次从橡胶树中克隆获得橡胶树hbmax2基因，该基因亚细胞定位于细胞核，在橡胶树所有组织中均有表达，其中在花和叶中的表达量均显著高于其他组织，而且在橡胶树高产种质中的表达量要高于低产种质，说明hbmax2可能参与了橡胶树的胶乳合成过程，进一步研究显示，该基因能够提高酵母在氧化胁迫下的生存能力，说明了该基因在非生物胁迫上的调控功能。本发明为提高酵母和植物抗逆性等方面的研究提供新的候选基因，对深入研究橡胶树遗传改良育种具有重要意义。

技术特征：

1.一种橡胶树hbmax2基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no:1所示。

2.一种橡胶树转录因子hbmax2，其特征在于，其为权利要求1所述橡胶树hbmax2基因编码的蛋白质。

3.如权利要求1所述的橡胶树hbmax2基因、或者如权利要求2所述的橡胶树转录因子hbmax2在提高酵母抗氧化胁迫的能力中的应用。

4.如权利要求1所述的橡胶树hbmax2基因、或者如权利要求2所述的橡胶树转录因子hbmax2在提高酵母抗h2o2胁迫的能力中的应用。

5.含有权利要求1所述橡胶树hbmax2基因编码区的重组载体或宿主菌。

6.如权利要求5所述的重组载体或宿主菌在提高酵母抗氧化胁迫的能力中的应用。

7.如权利要求5所述的重组载体或宿主菌在提高酵母抗h2o2胁迫的能力中的应用。

8.一种权利要求1所述橡胶树hbmax2基因的克隆方法，其特征在于，提取橡胶树叶片中的总rna，反转录为cdna，以cdna第一链为模板，以hbmax2-f：atggccgttccaaccacc；hbmax2-r：tcagtcgagaatatggcggc为引物，进行pcr扩增，回收扩增产物，即得。

9.一种引物对，其特征在于，所述引物对为hbmax2-f：atggccgttccaaccacc；hbmax2-r：tcagtcgagaatatggcggc；或者

技术总结本发明提供了一种橡胶树HbMAX2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明首次从橡胶树中克隆获得橡胶树HbMAX2基因，该基因亚细胞定位于细胞核，在橡胶树所有组织中均有表达，其中在花和叶中的表达量均显著高于其他组织，而且在橡胶树高产种质中的表达量要高于低产种质，说明HbMAX2可能参与了橡胶树的胶乳合成过程，进一步研究显示，该基因能够提高酵母在氧化胁迫下的生存能力，说明了该基因在非生物胁迫上的调控功能。本发明为提高酵母和植物抗逆性等方面的研究提供新的候选基因，对深入研究橡胶树遗传改良育种具有重要意义。技术研发人员：郭冰冰,王立丰,杨洪,代龙军,刘明洋受保护的技术使用者：中国热带农业科学院橡胶研究所技术研发日：技术公布日：2024/10/10