一株副干酪乳酪杆菌JNL0025及其应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一株副干酪乳酪杆菌jnl0025及其应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、高尿酸血症是一种因嘌呤代谢紊乱和尿酸排泄失衡而引起的代谢性疾病，其不仅直接引发痛风，还会导致肾脏和心血管疾病等一系列严重的健康问题。随着高尿酸血症患者数量的不断增加，全球对降尿酸产品的需求正迅速扩大。当前，临床上普遍采用药物治疗结合严格的饮食管理来调控血尿酸水平，但超过30%的痛风患者难以通过现行药物（包括非布司他和别嘌醇等）达到理想的尿酸控制目标，而且这些药物副作用大，不适合作为长期控制尿酸水平的日常方案。另一方面，严格的低嘌呤饮食计划会大幅降低患者的生活质量，导致患者依从性差。

3、炎症性肠病是一种病因尚不明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病，主要包括克罗恩病和溃疡性结肠炎两个亚型。目前，临床上的一线治疗药物主要有氨基水杨酸类药物、皮质类固醇类药物、生物制剂和免疫抑制剂类药物，并非所有的炎症性肠病患者都能从这些治疗方法中获益，而且这些药物还存在相当大的副作用风险。

4、因此，发明人设想获取一种新型、安全、有效的产品能同时在降尿酸和治疗炎症性肠病方面起到作用，以满足广泛的健康需求。研究表明，痛风患者的肠道菌群在组成和功能结构上与健康人群存在显著差异，这些差异的菌群结构会诱发慢性系统性炎症，导致嘌呤合成增多、尿酸代谢减弱，从而引起血尿酸升高和痛风发作；炎症性肠病患者肠道微生态变化主要表现为菌群失调，包括菌群多样性，以及种类和丰度发生改变。

5、近期的研究显示，益生菌能够通过多种途径降低血尿酸水平：①抑制尿酸合成关键酶—黄嘌呤氧化酶（xod）的活性；②益生菌与肠上皮细胞竞争吸收核苷类物质，通过自身产生的嘌呤核苷酶降解肠道中的嘌呤物质，减少尿酸的生成；③益生菌有助于恢复肠道菌群的平衡，增加有益菌的数量，减少有害菌，从而降低炎症反应和尿酸的生成；④益生菌通过促进尿酸盐排泄转运蛋白的表达和抑制尿酸盐重吸收蛋白的表达，增加尿酸的排泄，从而降低尿酸水平；⑤益生菌可以增强肠道屏障，减少肠道通透性，防止有害物质进入血液，从而降低炎症因子的产生。

6、益生菌可以作为药物和饮食治疗的补充，通过调节肠道微生态平衡，改善代谢状况，从而在整体上提高治疗效果。而且，与传统药物治疗相比，益生菌治疗高尿酸血症和痛风具有更高的安全性和经济性，且无明显副作用，适合长期服用。因此，益生菌在治疗高尿酸血症和痛风方面具有多方面的机制和显著的优势，为患者提供了一种新的治疗选择。同时，益生菌可有效调节肠道菌群失衡，改善微生态环境，增强肠道黏膜屏障功能，调节局部和全身免疫反应，为炎症性肠病等疾病的治疗提供新的选择。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的不足，本发明目的在于提供一株副干酪乳酪杆菌jnl0025及其应用。该菌株分离自内蒙古采集的发酵酸奶，经16s rrna法（16s核糖体rna基因测序技术）鉴定的16s rrna基因序列为seq id no:1，该菌株能够显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平，表现出巨大的应用价值。

2、为了实现上述技术目的，本发明提供的技术方案如下：

3、本发明的第一个方面，提供一株副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus  paracasei）jnl0025，该菌株已于2024年6月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号），保藏编号为cgmcc no：31043。

4、优选的，所述副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus paracasei）jnl0025的培养过程中涉及的培养基组分包括：蛋白胨8~12 g/l，牛肉粉6~10 g/l，酵母粉2~6 g/l，葡萄糖18~25 g/l，磷酸氢二钾1~5 g/l，柠檬酸氢二铵1~5 g/l，乙酸钠2~7 g/l，硫酸镁0.1~0.5g/l，硫酸锰0.01~0.08 g/l，吐温80 1.0 g/l；

5、进一步优选的，所述mrs培养基的组成包括：蛋白胨10.0 g/l，牛肉粉8.0 g/l，酵母粉4.0 g/l，葡萄糖20.0 g/l，磷酸氢二钾2.0 g/l，柠檬酸氢二铵2.0 g/l，乙酸钠5.0 g/l，硫酸镁0.2 g/l，硫酸锰0.04 g/l，吐温80 1.0 g/l；所述培养基的ph值5.7±0.2（25℃）。

6、本发明的第二个方面，提供一种微生物菌剂，所述微生物菌剂含有第一方面所述的副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus paracasei）jnl0025或其发酵物或其代谢产物。

7、本发明所述的代谢产物包括菌体胞外代谢产物和/或胞内代谢产物。

8、本发明中，术语“发酵物”用于指代发酵产品。相应的发酵物可以是从发酵培养副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus paracasei）jnl0025的过程获得的液体，因此，也可称为发酵液；液体可以含有细菌（菌体），但并不必然需要含有细菌。液体优选的含有由本发明的副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus paracasei）jnl0025产生的代谢产物。

9、以及，在本发明的实施方式中，包含菌体的发酵液或培养液经离心、过滤、沉降或所属领域中已知的其他手段将在发酵液或培养液中生长的菌体细胞与液体分离，去除菌体细胞时所剩余的液体为“上清液”，并且在本发明中，上清液内含有副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus paracasei）jnl0025的胞外代谢产物。在本发明的实施方式中，所述菌剂也可以包含该上清液。本发明通过试验证明，通过mrs培养基发酵培养后获得的上清液可以有效抑制黄嘌呤氧化酶（xod）的活性、能显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平，减轻肾脏病理损伤，以及实现降低体外抗炎、抗氧化水平，有效抑制肠道炎症的作用。

10、本发明的第三个方面，提供上述副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus  paracasei）jnl0025或上述微生物菌剂在制备降尿酸产品中的应用；

11、优选的，所述产品为药物；所述药物的剂型为粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂或喷雾剂的口服剂、及无菌注射溶液形式的剂型。

12、本发明所述药物还可以包含通常使用的适量载体、赋形剂及稀释剂，具体涉及的可以包含的载体、赋形剂及稀释剂等非药物活性成分在领域内是熟知的，本领域普通技术人员能够确定其符合临床标准。

13、优选的，所述药物具有如下(1)～(6)中至少一种功能：

14、（1）降解鸟嘌呤核苷；

15、（2）抑制尿酸合成酶——黄嘌呤氧化酶（xod）的活性；

16、（3）抑制尿酸合成酶——嘌呤核苷磷酸化酶（pnp）的活性；

17、（4）治疗痛风；

18、（5）治疗高尿酸血症；

19、（6）治疗尿酸性肾病。

20、本发明的第四个方面，提供上述副干酪乳酪杆菌（ lacticaseibacillus  paracasei）jnl0025或上述微生物菌剂在制备治疗结肠炎产品中的应用；

21、优选的，所述产品为药物；所述药物的剂型为粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂或喷雾剂的口服剂、及无菌注射溶液形式的剂型。

22、本发明所述药物还可以包含通常使用的适量载体、赋形剂及稀释剂，具体涉及的可以包含的载体、赋形剂及稀释剂等非药物活性成分在领域内是熟知的，本领域普通技术人员能够确定其符合临床标准。

23、优选的，所述药物具有如下(1)～(4)中至少一种功能：

24、（1）抗炎；

25、（2）抗氧化；

26、（3）调节肠道菌群结构；

27、（4）增强肠道黏膜屏障功能。

28、上述一个或多个技术方案的有益技术效果：

29、（1）与商业菌株干酪乳杆菌代田株 lactobacillus caseistrainshirota相比，本发明提供的副干酪乳酪杆菌jnl0025的鸟嘌呤核苷转化率提高，上清液对xod的抑制率相当，而且可以实现对pnp活性的抑制。

30、（2）本发明提供的副干酪乳酪杆菌jnl0025有降低促炎性m1型巨噬细胞的趋势，同时显著增加了抗炎性m2型巨噬细胞的比例，并抑制了促炎性细胞因子tnf-α和il-6的分泌，而且，副干酪乳酪杆菌jnl0025比鼠李糖乳酪杆菌lgg的抑制炎症效果更优，具有治疗结肠炎的功能。

31、（3）动物实验结果显示，本发明提供的副干酪乳酪杆菌jnl0025能显著降低高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平，减轻肾脏病理损伤，且能减轻dss诱导的结肠炎，表现出巨大的应用价值。