检测CLU基因和/或CLU蛋白的试剂在制备与脑膜瘤相关产品中的应用

本发明涉及脑膜瘤领域，具体地，涉及检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备与脑膜瘤相关产品中的应用。

背景技术：

1、脑膜瘤是有脑膜细胞恶化形成，按照世界卫生组织神经系统肿瘤分类地分级方法，脑膜瘤分为i级、ii级和iii级。绝大部分脑膜瘤患者为i级，高级别脑膜瘤(ii级和iii级)患者的占比约为15％。高级别脑膜瘤多为i级脑膜瘤术后复发而来。脑膜瘤的治疗以手术为主，辅以放疗，但极易复发，尚无有效的药物治疗方案。因此，现有技术中缺少有效的脑膜瘤诊断和预后指标以及有效的治疗药物。

2、簇集蛋白(clusterin，clu)由两条链组成——α-clusterin(α-clu)和β-clusterin(β-clu)以5个二硫键相连接。clu存在于细胞外空间和体液中，在多种组织中都有表达。clu表达形式有2种：分泌型(secretedclu，sclu)和核型(nuclear clusterin，nclu)，二者的功能不同。sclu含全长mrna翻译的449个氨基酸，其中1～23个氨基酸为信号肽，可以分泌到细胞外，在前列腺癌、乳腺癌等癌症中通过促进细胞生长、抗凋亡、对顺铂的治疗有抗性等方式促肿瘤进展。nclu与sclu的区别在于没有信号肽的部分，存在与细胞质中，促进细胞凋亡，具有抑癌作用。现有技术尚未公开clu在脑膜瘤中的功能。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备与脑膜瘤相关产品中的应用。

2、本发明的第一个目的是提供检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备预测脑膜瘤发病风险的产品中的应用。

3、本发明的第二个目的是提供检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备诊断脑膜瘤的产品中的应用。

4、本发明的第三个目的是提供检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备药物对脑膜瘤疗效的评估的产品中的应用。

5、本发明的第四个目的是提供检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在筛选治疗脑膜瘤的产品中的应用。

6、本发明的第五个目的是提供clu蛋白在制备治疗脑膜瘤的药物中的应用。

7、本发明的第六个目的是提供促进脑膜瘤细胞表达clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备治疗脑膜瘤的药物中的应用。

8、本发明的第七个目的是提供一种治疗脑膜瘤的药物。

9、为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

10、本发明利用单细胞转录组及一系列体内外实验，首次证明clu表达量在脑膜瘤恶化过程中下降，可以作为诊断标志物，并且分泌型clu蛋白即sclu是脑膜瘤的抑癌蛋白，可用于脑膜瘤的治疗。

11、因此本发明要求保护以下内容：

12、检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备预测脑膜瘤发病风险的产品中的应用。

13、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

14、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

15、检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备诊断脑膜瘤的产品中的应用。

16、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

17、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

18、检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备评估药物对脑膜瘤疗效的产品中的应用。

19、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

20、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

21、检测clu基因和/或clu蛋白的试剂在筛选治疗脑膜瘤的产品中的应用。

22、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

23、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

24、clu蛋白在制备治疗脑膜瘤的药物中的应用。

25、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

26、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的核苷酸序列如seq id no:11所示。

27、促进脑膜瘤细胞表达clu基因和/或clu蛋白的试剂在制备治疗脑膜瘤的药物中的应用。

28、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

29、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

30、优选地，所述试剂包含过表达clu蛋白的重组表达载体。

31、更优选地，所述重组表达载体连接有表达clu蛋白的序列，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

32、更优选地，所述试剂还包含过表达clu蛋白的慢病毒，所述慢病毒由过表达clu蛋白的重组表达载体和辅助载体共转染细胞得到。

33、进一步优选地，所述重组表达载体以真核细胞表达载体或原核细胞表达载体为骨架。

34、更进一步优选地，所述真核细胞表达载体为plvx-cmv-flag-puro载体；所述plvx-cmv-flag-puro载体为在2804bp处插入171bp的插入标签的plvx-ires-puro载体，所述标签的核苷酸序列如seq id no:3所示。

35、具体的，所述重组表达载体以plvx-cmv-flag-puro载体为骨架，于bamh1位点和ecori位点之间插入表达clu蛋白的序列得到，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

36、更进一步优选地，所述原核细胞表达载体为pbtac-cgt-p6f载体，所述pbtac-cgt-p6f载体为bamh1位点和ecor1位点之间连接有cgt信号肽的pbtac1载体，所述cgt信号肽的核苷酸序列如seq id no:10所示。

37、具体的，所述重组表达载体以pbtac-cgt-p6f载体为骨架，于hind iii位点和bamhⅰ位点之间插入表达clu蛋白的序列得到，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

38、一种治疗脑膜瘤的药物，包含clu蛋白或任一上述的试剂。

39、优选地，所述clu基因的序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

40、优选地，所述clu蛋白为分泌型clu蛋白，所述分泌型clu蛋白即为含有信号肽的clu蛋白，所述信号肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no:11所示。

41、优选地，所述试剂包含过表达clu蛋白的重组表达载体。

42、更优选地，所述重组表达载体连接有表达clu蛋白的序列，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

43、更优选地，所述试剂还包含过表达clu蛋白的慢病毒，所述慢病毒由过表达clu蛋白的重组表达载体和辅助载体共转染细胞得到。

44、进一步优选地，所述重组表达载体以真核细胞表达载体或原核细胞表达载体为骨架。

45、更进一步优选地，所述真核细胞表达载体为plvx-cmv-flag-puro载体；所述plvx-cmv-flag-puro载体为在2804bp处插入标签的plvx-ires-puro载体，所述标签的核苷酸序列如seq id no:3所示。

46、具体的，所述重组表达载体以plvx-cmv-flag-puro载体为骨架，于bamh1位点和ecori位点之间插入表达clu蛋白的序列得到，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

47、更进一步优选地，所述原核细胞表达载体为pbtac-cgt-p6f载体，所述pbtac-cgt-p6f载体为bamh1位点和ecor1位点之间连接有cgt信号肽的pbtac1载体，所述cgt信号肽的核苷酸序列如seq id no:10所示。

48、具体的，所述重组表达载体以pbtac-cgt-p6f载体为骨架，于hind iii位点和bamhⅰ位点之间插入表达clu蛋白的序列得到，所述序列在ucsc数据库中的ccds号为ccds47832.1。

49、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

50、本发明首次证实分泌型clu是作为脑膜瘤的抑癌蛋白，可作为脑膜瘤的诊断及预后的标志物，也可以用于制备治疗脑膜瘤的蛋白药物，优化现有脑膜瘤的临床治疗方法，提供新的技术选择。