DNA损伤药物联合化疗

本发明属于生物医学领域。具体地，本发明涉及dna损伤药物联合化疗对肿瘤的协同治疗。

背景技术：

1、cxorf67位于x染色体的p11.22位置，只有一个外显子(exon)，不含有内含子(intron)，其中cds(coding sequence)含有1512个bp，编码503个氨基酸。本发明人实验室2020年的工作发现了cxorf67的另一个功能，其可以通过调控palb2与brca2的结合，影响dna同源重组(homologous recombination,hr)修复的效率。

2、parp(poly(adp-ribose)polymerase)家族目前有17个成员，主要定位于核内，含有共同的art(adp-ribosyltransferase)催化基序催化parylation修饰。parp1是研究最为深入的一个，作为dna损伤感应蛋白，可以利用nad+将带负电的par连接到dna损伤修复蛋白上传递修复信号，最早研究发现parp1单链断裂和碱基切除修复中发挥作用，最近表明其在核酸切除、错配和同源重组修复中也有重要作用。

3、细胞中dna的双链断裂(double strand breaks，dsbs)是细胞面临的最严重的一种dna损伤，dna双链断裂修复一般根据有无同源序列参与分为两种。一种是经典的非同源末端连接(classical non-homologous end joining,cnhej)，这是不依赖于同源序列的，主要在细胞周期的g0/g1期发挥作用。另一种是重组(homologous recombination,hr)修复通路，这是一种无错修复，主要在细胞周期的s/g2期利用细胞里面的同源dna作为模版来修复断裂的dna。这种同源dna可以是姐妹染色单体，也可以是同源染色体或是异位染色体上的序列。

4、hr修复通路缺陷的肿瘤是一种对parp抑制剂敏感的肿瘤。parp抑制剂阻断了dna单链断裂修复时，dna在经历一轮复制后会有单链断裂变成双链断裂，肿瘤细胞的hr修复缺陷会导致细胞死亡；而正常的细胞有完整的hr修复，所以不会被杀死。发明人的前期结果发现cxorf67的表达或高表达可以通过与brca2竞争结合palb2，从而抑制dna同源重组修复，并首次提出cxorf67可以作为肿瘤细胞使用parp抑制剂的生物标志物。此外，发明人还发现parp抑制剂联合放疗可以更有效的杀死cxorf67表达或高表达的肿瘤细胞。然而，parp抑制剂与其他治疗方法的联用效果如何仍不清楚，如何进一步高效杀伤hr修复通路缺陷的肿瘤仍为未知。

5、因此，本领域迫切需要开发一种针对hr修复通路缺陷的肿瘤的更敏感更有效的治疗方法。

技术实现思路

1、本发明的目的就是对表达或高表达cxorf67的肿瘤提供更有效的治疗方法，尤其是起到协同性治疗效果的dna损伤药物联合化疗的治疗方法。

2、本发明的又一目的在于提供cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白或其检测试剂的用途，用作检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性的标志物。

3、本发明的又一目的在于提供cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白或其检测试剂的用途，用于制备检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性的诊断试剂或试剂盒。

4、在本发明的第一方面，提供了一种活性成分组合的用途，所述活性成分组合用于制备治疗cxorf67表达或高表达肿瘤的药物或制剂，或协同治疗cxorf67表达或高表达肿瘤的药物或制剂，其中所述活性成分组合包括：

5、(z1)第一活性成分：dna损伤药物；和

6、(z2)第二活性成分：化疗药物。

7、在另一优选例中，所述dna损伤药物包括parp抑制剂。

8、在另一优选例中，所述parp抑制剂选自下组：talazoparib、olaparib、veliparib、rucaparib、niraparib、fluzoparib、pamiparib，或其组合。

9、在另一优选例中，所述parp抑制剂的剂量为10-100mg/kg，较佳地20-80mg/kg，更佳地30-70mg/kg，最佳地50mg/kg。

10、在另一优选例中，所述化疗药物为铂类药物。

11、在另一优选例中，所述铂类药物选自下组：cisplatin、carboplatin、nedaplatin、oxaliplatin、lobaplatin，或其组合。

12、在另一优选例中，所述铂类药物的剂量为0.1-20mg/kg，较佳地0.5-10mg/kg，更佳地1-5mg/kg，最佳地2mg/kg。

13、在另一优选例中，所述药物或制剂还包括药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

14、在另一优选例中，所述药物或制剂还包括其他肿瘤治疗剂。

15、在另一优选例中，所述cxorf67表达或高表达肿瘤选自下组：室管膜瘤(ependymoma posterior fossa group a)、肾透明细胞癌(kidney renal clear cellcarcinoma,kirc)、肾乳头状细胞癌(kidney renal papillary cell carcinoma,kirp)，或其组合。

16、在另一优选例中，所述肿瘤包括hr修复通路缺陷的肿瘤。

17、在另一优选例中，所述肿瘤为原发性肿瘤、转移瘤、移植瘤，或其组合。

18、在另一优选例中，所述室管膜瘤包括pfa。

19、在另一优选例中，所述cxorf67基因的登录号为gene id:340602。

20、在另一优选例中，所述cxorf67 mrna的登录号为nm_203407.3。

21、在另一优选例中，所述cxorf67蛋白的登录号为np_981952.1。

22、在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：dna损伤药物、化疗药物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

23、在另一优选例中，所述药物组合物还包括其他肿瘤治疗剂。

24、在另一优选例中，所述dna损伤药物为niraparib，并且所述化疗药物为carboplatin或cisplatin。

25、在本发明的第三方面，提供了一种药盒，所述药盒包括：

26、(a)第一制剂，所述第一制剂含有dna损伤药物以及药学上可接受的载体；

27、(b)第二制剂，所述第二制剂含有化疗药物以及药学上可接受的载体；和

28、(c)说明书，所述说明书描述了将第一制剂和第二制剂联用以治疗肿瘤的方法。

29、在另一优选例中，所述第一制剂和第二制剂是各自独立的。

30、在另一优选例中，所述第一制剂和第二制剂为冻干制剂或液态制剂。

31、在另一优选例中，所述第一制剂和第二制剂的剂型是注射剂或经胃肠道给药剂型。

32、在另一优选例中，所述的第一制剂在施用第二制剂之前、之中或之后被施用。

33、在本发明的第四方面，提供了一种cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白或其检测试剂的用途，(i)用作检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性的标志物；和/或(ii)用于制备检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性的诊断试剂或试剂盒。

34、在另一优选例中，所述诊断试剂包括抗体、引物、探针、测序文库、核酸芯片(如dna芯片)或蛋白质芯片。

35、在另一优选例中，所述的蛋白包括全长蛋白或蛋白片段。

36、在另一优选例中，所述蛋白含有palb2结合基序(palb2-binding motif)。

37、在另一优选例中，所述palb2结合基序位于cxorf67蛋白的420-432位。

38、在另一优选例中，所述的cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白来源于哺乳动物，较佳地来源于啮齿动物(如小鼠、大鼠)、灵长动物和人，更佳地，来源于被诊断患有hr修复通路缺陷的肿瘤的患者。

39、在另一优选例中，所述检测是组织样本检测。

40、在另一优选例中，所述的检测包括免疫组化、免疫印迹和荧光定量pcr方法检测。

41、在另一优选例中，所述的检测是测定肿瘤组织。

42、在另一优选例中，所述检测试剂包括cxorf67的特异性抗体、cxorf67的特异性结合分子、特异性扩增引物、探针或芯片。

43、在另一优选例中，所述的cxorf67蛋白或其特异性抗体或特异性结合分子偶联有或带有可检测标记。

44、在另一优选例中，所述可检测标记选自下组：生色团、化学发光基团、荧光团、同位素或酶。

45、在另一优选例中，所述cxorf67的特异性抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。

46、在本发明第五方面，提供了一种用于检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性的诊断试剂盒，所述的试剂盒含有一容器，所述容器中含有检测cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白的检测试剂；以及标签或说明书，所述标签或说明书注明所述试剂盒用于检测肿瘤细胞对dna损伤药物联合化疗的敏感性。

47、在另一优选例中，所述的检测cxorf67基因、mrna、cdna或蛋白的检测试剂包括：

48、(a).抗cxorf67蛋白的特异性抗体；和/或

49、(b).特异性扩增cxorf67的mrna或cdna的特异性引物。

50、在另一优选例中，所述检测是组织样本检测。

51、在本发明第六方面，提供了一种判断对dna损伤药物联合化疗的敏感性的方法，所述方法包括：

52、a)提供来自受试者的测试样品；

53、b)检测测试样品中cxorf67蛋白的表达量；和

54、c)基于步骤b)中所测定的cxorf67蛋白的表达量，从而判断对dna损伤药物联合化疗的敏感性。

55、在另一优选例中，当所述测试样本中存在cxorf67蛋白时，则可判断对dna损伤药物联合化疗具有敏感性。

56、在另一优选例中，当所述测试样本中的cxorf67蛋白的表达量＞0.5，较佳地＞1.5，更佳地＞2时，则可判断对dna损伤药物联合化疗具有敏感性。

57、在另一优选例中，所述的受试者为人或非人哺乳动物。

58、在另一优选例中，所述测试样品为cxorf67表达或高表达的肿瘤细胞或组织。

59、在另一优选例中，所述测试样品为hr修复通路缺陷的肿瘤细胞或组织。

60、在另一优选例中，所述检测步骤(b)包括检测cxorf67 mrna的量，或cxorf67 cdna的量；和/或检测cxorf67蛋白的量。

61、在另一优选例中，通过荧光定量pcr或免疫组织化学检测样品中的cxorf67蛋白的表达水平。

62、在另一优选例中，所述方法为非诊断和非治疗性的。

63、在本发明第七方面，提供了一种确定治疗方案的方法，所述方法包括：

64、a)提供来自受试者的测试样品；

65、b)检测测试样品中cxorf67蛋白的表达水平；和

66、c)基于所述样品中的cxorf67蛋白的表达水平来确定治疗方案。

67、在另一优选例中，所述的受试者为人或非人哺乳动物。

68、在另一优选例中，当所述样品中存在cxorf67蛋白(优选cxorf67蛋白的表达量＞0.5，较佳地＞1.5，更佳地＞2)时，所述治疗方案包括cxorf67抑制剂疗法、dna损伤药物联合化疗，或其组合。

69、在另一优选例中，所述cxorf67抑制剂疗法、dna损伤药物联合化疗选自下组：

70、cxorf67抑制剂疗法：抗体、小分子化合物、microrna、sirna、shrna，或其组合；

71、dna损伤药物联合化疗：parp抑制剂、铂类药物，或其组合。

72、在另一优选例中，当受试者对dna损伤药物联合化疗的敏感性高于一般人群(对照组人群)时，所述治疗方案还包括cxorf67抑制剂疗法、dna损伤药物联合化疗、cxorf67抑制剂与dna损伤药物联合化疗联用的疗法。

73、在本发明的第八方面，提供了一种体外非治疗性的协同杀伤或抑制肿瘤细胞的方法，包括步骤：将肿瘤细胞与dna损伤药物以及化疗药物接触，从而协同杀伤或抑制所述肿瘤细胞。

74、在另一优选例中，所述肿瘤细胞为cxorf67表达或高表达的肿瘤细胞。

75、在另一优选例中，所述dna损伤药物为parp抑制剂。

76、在另一优选例中，所述化疗药物为铂类药物。

77、在另一优选例中，所述方法还包括对所述肿瘤细胞进行放疗、靶向治疗、免疫治疗，或其组合。

78、在另一优选例中，所述放疗包括辐照。

79、在另一优选例中，所述辐照包括局部辐照、全身辐照、或其组合。

80、在本发明的第九方面，提供了一种在有需要的对象中治疗肿瘤的方法，包括步骤：给所述对象施用治疗有效量的dna损伤药物以及化疗药物。

81、在另一优选例中，所述方法还包括步骤：对所述对象进行选自下组的其他治疗：放疗、手术治疗、靶向治疗、免疫治疗，或其组合。

82、在另一优选例中，所述肿瘤为表达或高表达cxorf67的肿瘤。

83、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。