生产O-磷酸丝氨酸的微生物和使用其生产O-磷酸丝氨酸或L-半胱氨酸的方法与流程

本申请涉及赤藓酸(erythronate)-4-磷酸脱氢酶活性被减弱的微生物；使用该微生物生产o-磷酸丝氨酸、半胱氨酸或半胱氨酸衍生物的方法；包含该微生物的生产o-磷酸丝氨酸的组合物；和该微生物在生产o-磷酸丝氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物中的用途。

背景技术：

1、l-半胱氨酸是一种在所有活生物体内的硫代谢中具有重要作用的氨基酸，它不仅用于合成生物蛋白质例如毛发角蛋白、谷胱甘肽、生物素、甲硫氨酸和其他含硫代谢物，而且作为生物合成辅酶a的前体。

2、使用本领域已知的微生物生产l-半胱氨酸的方法包括：1)使用微生物将d,l-2-氨基噻唑啉-4-羧酸(d,l-atc)生物转化为l-半胱氨酸的方法，2)使用大肠杆菌直接发酵生产l-半胱氨酸的方法(ep 0885962 b；wada m和takagi h，appl.microbiol.biochem..,73:48-54,2006年)，以及3)通过使用微生物发酵生产o-磷酸丝氨酸(以下简称“ops”)，然后在o-磷酸丝氨酸巯基酶(以下简称“opss”)的催化作用下，通过o-磷酸丝氨酸与硫化物反应，将o-磷酸丝氨酸转化为l-半胱氨酸的方法(us 8557549 b2)。

3、特别是，为了通过方法3)高产量地生产半胱氨酸，前体ops应当以过量生产。

4、公开内容

5、技术问题

6、本发明人已经开发了一种生产o-磷酸丝氨酸的微生物(其中赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的活性被减弱)、一种使用该微生物生产o-磷酸丝氨酸的方法、一种使用该微生物生产半胱氨酸或其衍生物的方法，以及一种包含该微生物的生产o-磷酸丝氨酸的组合物，从而完成了本公开。

7、技术方案

8、本申请的一个目的是提供一种用于生产o-磷酸丝氨酸的微生物，其中赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的活性被减弱。

9、本申请的另一个目的是提供一种用于生产o-磷酸丝氨酸的方法，其包括在培养基中培养本申请的微生物。

10、本申请的仍另一个目的是提供一种用于生产半胱氨酸或其衍生物的方法，其包括：

11、a)在培养基中培养本申请的微生物以生产o-磷酸丝氨酸或含有o-磷酸丝氨酸的培养基；和b)使o-磷酸丝氨酸巯基酶(opss)或表达opss的微生物、步骤a)中生产的o-磷酸丝氨酸或含有o-磷酸丝氨酸的培养基和硫化物反应。

12、本申请的仍另一个目的是提供一种用于生产o-磷酸丝氨酸的组合物，其包括本申请的微生物。

13、本申请的又另一个目的是提供本申请的微生物用于生产o-磷酸丝氨酸、半胱氨酸或半胱氨酸衍生物的用途。

14、有益效果

15、本申请可使用生产o-磷酸丝氨酸的微生物高效生产o-磷酸丝氨酸，其中赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的活性与其内源活性相比被减弱。另外，当通过酶法转化以上生产的o-磷酸丝氨酸来生产半胱氨酸及其衍生物时，可以以比化学合成更环保且更高效的方式生产半胱氨酸。

技术实现思路

技术特征：

1.一种生产o-磷酸丝氨酸的微生物，其中赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的活性被减弱。

2.根据权利要求1所述的微生物，其中编码所述赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的多核苷酸的起始密码子被ttg或ctg取代。

3.根据权利要求2所述的微生物，其中与其中编码所述赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的多核苷酸的起始密码子为gtg或atg的微生物相比，所述微生物具有提高的o-磷酸丝氨酸生产力。

4.根据权利要求1所述的微生物，其中yhhs蛋白活性进一步增强。

5.根据权利要求1所述的微生物，其中磷酸丝氨酸磷酸酶的活性进一步被减弱。

6.根据权利要求1所述的微生物，其中yhhs、磷酸丝氨酸氨基转移酶或其组合的蛋白质活性被引入或增强。

7.根据权利要求1所述的微生物，其中所述微生物是埃希氏菌属的微生物。

8.根据权利要求7所述的微生物，其中所述埃希氏菌属的微生物是大肠杆菌。

9.一种用于生产o-磷酸丝氨酸的方法，其包括在培养基中培养生产o-磷酸丝氨酸的微生物，其中赤藓酸-4-磷酸脱氢酶的活性被减弱。

10.一种用于生产半胱氨酸或其衍生物的方法，其包括：

技术总结本申请涉及其中赤藓酸‑4‑磷酸脱氢酶活性被减弱的微生物；通过使用该微生物生产O‑磷酸丝氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物的方法；包含该微生物的生产O‑磷酸丝氨酸的组合物；以及该微生物用于生产O‑磷酸丝氨酸、半胱氨酸和半胱氨酸衍生物的用途。技术研发人员：丁辉敏,鲁镇雅,沈熙陈,朴慧珉受保护的技术使用者：CJ第一制糖株式会社技术研发日：技术公布日：2024/10/17