偶联连接子的制作方法

本发明涉及药物偶联物领域，具体说来涉及抗体药物偶联物。

背景技术：

1、抗体药物偶联物(adc)是大分子药物，它们利用抗体与抗原(位于癌症细胞表面)的特异性结合将细胞毒素类物质(药物)带向细胞并杀死细胞。它们可被视为既是位点定向释放又是位点特异性释放的大分子前药。adc实际上是一个三组分系统，包括通过可降解或不可降解(可剪切/不可剪切)连接子连接到抗体(通常是单克隆抗体mab)的强效药物。

2、通常，adc在与细胞上的抗原结合后被内吞，然后，在细胞内药物从抗体中释放并发挥效用。与小分子相比，到达靶细胞的adc分子数量相对较少，内化率也较低。因此希望提高连接子被剪切从而释放药物的速度。

3、连接子对adc而言至关重要，例如它对adc的稳定性和药物释放机制有很大影响。可被酶切连接子，如trastuzumab deruxtecan，中的连接子，通常包括一个短肽(例如2～4个氨基酸)，该短肽在adc内吞后就会在溶酶体中裂解，从而释放药物发挥细胞杀伤作用。在已经很慢的adc作用机制中，连接子的酶切(一种或多种酶)速度决定着药物的起效速度。目前大多数adc采用可剪切连接子，因为它们能在靶细胞中迅速释放药物。举例来说，brentuximab vedotintrastuzumab deruxtecanloncastuximab tesirine-lpyl采用的都是肽剪切片段，分别为vc、ggfg和va。这些肽主要由溶酶体中的组织蛋白酶(主要是组织蛋白酶b(cathepsin b))剪切。剪切速度因多种因素而异，包括相关酶的特性、区域特异性酶与底物相互作用等等。举例来说，的连接子含四肽ggfg，最后一个甘氨酸的酰胺键为可剪切键，由溶酶体蛋白酶(例如组织蛋白酶)剪切。ggfg的剪切速度不及vc快。

4、在适宜位置例如溶酶体中连接子能被快速剪切是adc的理想特征之一。我们需要更好的连接子和连接子-载荷以制得性能更优的adc产品，并且能够以更具操作性和更高产量的工艺来生产adc。

技术实现思路

1、发明人设计了一系列连接子，适用于生产性能更优的连接子-载荷和adc，例如可剪切性更高(例如，表现为剪切速度更高)、dar分布改善、均质性提高、稳定性和/或治疗相关功效提高。基于所述连接子和包含连接子的连接子-载荷能够通过更具可操作性和更高产量的工艺来制造adc，例如使adc产品更纯净，其中残留的未与抗体结合的连接子-载荷含量更低和/或残留连接子-载荷更容易被去除。

2、在第一方面，本发明提供了式i的化合物：

3、

4、其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、溶剂化物、水合物或药学上可接受的盐或酯；

5、其中，“*”表示手性中心，其是s-或r-或外消旋的；并且连接到手性碳原子的氢原子和连接到具有r2取代基的碳原子的氢原子从式中省略；

6、l1是-(ch2)a-，其中a是0至10的整数，或-(ch2ch2o)b-，其中b是1至36的整数；

7、l2是-(ch2)c-，其中c是1至10的整数，或-(ch2ch2o)d-，其中d是1至36的整数；

8、l3不存在，或是-(ch2)e-，其中e是1至10的整数，或-(ch2ch2o)f-，其中f是1至36的整数；

9、r1是-cf3、-nrarb、-nra(c＝o)rb或-o(ch2)gch3，其中g是0至3的整数，ra是h或-c1-6烷基，rb是h或-c1-6烷基；

10、r2是-h、-c1-6烷基或-o(ch2)hch3，其中h是0至3的整数；

11、x是卤素、-or3或-nr4r5；

12、r3是-h、-c1-6烷基或卤素；

13、r4和r5独立地是-h或-c1-6烷基；

14、n＝0或1；和

15、m＝0或1。

16、在另一方面，本发明提供了式ii的偶联化合物：

17、

18、

19、其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、溶剂化物、水合物或药学上可接受的盐或酯；其中，“*”、l1、l2、l3、r1、r2、n和m如式i中所定义；并且，“drug”是共价偶联至连接子的药物部分。

20、在另一方面，本发明提供了式iii的抗体-药物偶联物：

21、

22、其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、溶剂化物、水合物或药学上可接受的盐或酯；其中，“*”、l1、l2、l3、r1、r2、n和m以及“drug”如式ii中所定义；并且，p是1-8，例如1、2、3、4、5、6、7和8；ab是指抗体。

23、在另一方面，本发明提供了一种生产连接子-载荷化合物的方法，其包括将药物与本发明的连接子化合物偶联。在一些实施方式中，药物是依喜替康(exatecan)。

24、在另一方面，本发明提供了一种生产抗体-药物-偶联物的方法，其包括：

25、(a)将药物与本发明的连接子化合物偶联以获得连接子-载荷化合物；其中，优

26、选地，药物是依喜替康(exatecan)；和

27、(b)将抗体与步骤(a)中获得的连接子-载荷化合物偶联。

1.一种式i的化合物：

2.如权利要求1所述的化合物，其中l1是-(ch2)a-，其中a是2至6的整数；

3.如权利要求1所述的化合物，其中l1是-(ch2)a-，a是4至5的整数；

4.如权利要求1的化合物，其中所述化合物选自如下所示的组：l-1-1、l-1-2、l-1-3、l-1-4、l-1-7和l-1-8，或其药学上可接受的盐或酯：

5.式ii的偶联化合物：

6.如权利要求5所述的偶联化合物，其中l1是-(ch2)a-，其中a是2至6的整数；

7.如权利要求5所述的偶联化合物，其中l1是-(ch2)a-，其中a是4至5的整数；

8.如权利要求5所述的偶联化合物，其具有式iia的结构：

9.如权利要求5所述的偶联化合物，其具有选自下组的结构：

10.式iii的抗体-药物偶联物：

11.如权利要求10所述的抗体-药物偶联物，其中l1是-(ch2)a-，其中a是2至6的整数；

12.如权利要求10所述的抗体-药物偶联物，其中l1是-(ch2)a-，其中a是4至5的整数；

13.如权利要求10所述的抗体-药物偶联物，其具有选自下组的结构：

14.如权利要求13所述的抗体-药物偶联物，其中，p是2、4或6；和/或ab是曲妥珠单抗。

15.一种生产连接子-载荷化合物的方法，其包括将药物与权利要求1所述的化合物偶联。

16.如权利要求15所述的方法，其中，所述药物是依喜替康。

17.一种生产抗体-药物-偶联物的方法，其包括：

18.如权利要求17所述的方法，其中，所述药物是依喜替康。