哌嗪取代的吲唑化合物作为PARG抑制剂的制作方法

背景技术：

1、癌症是由不受控制和不受调节的细胞增殖引起的。这种通常快速增殖的后果是肿瘤内高水平的氧化应激，这会损伤dna并导致突变率大幅增加。因此，肿瘤细胞会启动并高度依赖dna损伤修复机制。

2、单链断裂(ssb)是细胞中产生的最常见的损伤类型，并且parg(多聚adp-核糖糖基水解酶)与parp(多聚adp-核糖聚合酶)以及许多其他蛋白质一起参与单链断裂修复(ssbr)和另一种称为碱基切除修复(ber)的修复机制。

3、在单链dna修复过程中，最早发生的事件之一是parp(多聚adp-核糖聚合酶)与断裂部位结合，并在parp本身上迅速合成多聚adp-核糖(par)。这种分子结构作为信号招募其他dna修复蛋白，首先是xrcc1，它将继续修复断裂部位(mortusewicz,fouquerel等人2011)。由这些par链引发的信号是短暂的，因为它们会被酶parg迅速降解。当parp与par结合时，其催化活性降低，因此parg活性有助于将parp恢复为其催化活性形式(curtin andszabo2013)。

4、parg来源于单个基因，具有位于细胞核、线粒体和细胞质中的同种型。另一种已知具有糖基水解酶活性的蛋白质是arh3，它定位于线粒体(mashimo,kato等人2014)。尽管parg主要因其在dna修复中的直接作用而闻名，但它也影响par在剪接、转录和表观遗传通过中的信号转导(ji and tulin 2009)(le may,iltis等人2012)(dahl,maturi等人2014)(guastafierro,catizone等人2013)(caiafa,guastafierro等人2009)。

5、当其他dna修复机制功能失效时，癌细胞可能会依赖于特定的dna修复途径。携带参与双链断裂修复的蛋白质的突变的肿瘤通常对ssbr的parp抑制剂更敏感。已有一些证据表明，parg缺失会抑制ssbr并降低brca2缺陷细胞的存活率(fathers,drayton等人2012)。然而，其他肿瘤突变可能导致双链dna修复机制缺陷(所谓的“brca-ness”)，从而使肿瘤细胞对parg抑制敏感。

6、已在多种小鼠和人类模型系统中研究了parg缺失。parg缺失(null)或缺失(depleted)的小鼠细胞对实验性和临床dna损伤剂显示出增加的敏感性。然而，由于parg缺陷并不对所有试剂(例如吉西他滨、喜树碱)敏感，这表明parg功能在某些dna损伤修复途径以及化疗和放疗中具有特异性(fujihara,ogino等人2009)(shirai,fujimori等人2013)(zhou,feng等人2010)(zhou,feng等人2011)。

7、在人类中，parg缺失使肺癌、宫颈癌和胰腺癌细胞对γ-辐射或实验性dna损伤剂(例如过氧化氢、甲磺酸甲酯)敏感(ame,fouquerel等人2009)(nakadate,kodera等人2013)(shirai,poetsch等人2013)。

8、parp抑制剂目前正在接受多项临床试验，其中正在探索合成致死性或化学增敏性的概念。已经描述了parp抑制剂的临床耐药性(drost and jonkers 2014)(barber,sandhu等人2013)，因此，需要找到靶向dna损伤修复机制的其他替代性抑制剂。

9、尽管当前模型表明parg缺失会对dna修复产生parp依赖性影响，但最近的研究显示其与parp抑制在机制上存在差异。与parp缺失不同，parg的基因毒性刺激缺失会导致nad水平下降。这会导致肺癌细胞因能量衰竭而死亡(erdelyi,bai等人2009)。

10、细胞渗透性parg抑制剂仅限于例如单宁酸或没食子单宁酸等化合物，这些化合物对parg的特异性存疑且生物利用度有限(sun,zhang等人2012)(fathers,drayton等人2012)(blenn,wyrsch等人2011)。

11、本发明的一个目的是提供细胞渗透性parg抑制剂。

技术实现思路

1、在一方面，本文提供了一种式(i)化合物：

2、

3、或其药学上可接受的盐。

4、在另一方面，本文提供了一种式(i)化合物：

5、

6、在另一方面，本文提供了一种式(a)化合物：

7、

8、或其药学上可接受的盐。

9、在另一方面，本文提供了一种式(a)化合物：

10、

11、在另一方面，本文提供了一种式(b)化合物：

12、

13、或其药学上可接受的盐。

14、在另一方面，本文提供了一种式(b)化合物：

15、

16、在另一方面，本文提供了一种式(c)化合物：

17、

18、或其药学上可接受的盐。

19、在另一方面，本文提供了一种式(c)化合物：

20、

21、在另一方面，本文提供了一种药物组合物，其包含式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

22、在另一方面，本发明提供式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，其用于治疗中。

23、在另一方面，本文提供了式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，其用于治疗癌症。在一个实施方案中，所述癌症为人类癌症。

24、在另一方面，本文提供了式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，其用于产生parg抑制效果。

25、在另一方面，本文提供了式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，在制备用于治疗癌症的药物中的用途。合适地，所述药物用于治疗人类癌症。

26、在另一方面，本文提供了式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，在制备用于产生parg抑制效果的药物中的用途。

27、在另一方面，本文提供了一种在体外或体内抑制parg的方法，所述方法包括将细胞与有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物接触。

28、在另一方面，本文提供了一种在体外或体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括将细胞与有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物接触。

29、在另一方面，本文提供了一种在需要此类治疗的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物。

30、在另一方面，本文提供了一种在有此需要的患者中治疗对一种或多种铂类药物或一种或多种parp抑制剂抗性的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物。

31、在另一方面，本文提供了一种在需要此类治疗的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，其中所述患者之前已接受过铂类药物治疗癌症。

32、在另一方面，本文提供了一种在需要此类治疗的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的式(i)、式(a)、式(b)或式(c)化合物或其药学上可接受的盐，或如本文所定义的药物组合物，其中所述患者之前已接受过parp抑制剂治疗癌症。

33、在另一方面，本文提供了一种在parg抑制活性的测试化合物中鉴定parg活性的方法，所述方法包括(i)将测试化合物与分离的parg酶、生物素化-par化的parp底物接触以形成parg反应预混合物；(ii)将parg反应预混合物与检测抗体和链霉亲和素-铕接触以形成parg反应混合物；以及(iii)测量parg反应混合物的荧光强度，其中所述方法还包括使用由式(i)、式(a)、式(b)或式(c)的化合物或其药学上可接受的盐或本文定义的药物组合物代表的阳性对照样品执行步骤(i)-(iii)。在一些实施方案中，检测抗体是抗his单克隆抗体-ulight。在一些实施方案中，链霉亲和素-铕与生物素化-par化的parp底物结合。在一些实施方案中，通过提供317nm的激发波长并测量620nm(链霉亲和素-铕发射)和665nm(ulight发射)处的发射来测量荧光。

34、在另一方面，本文提供了合成式(i)、式(a)、式(b)或式(c)的化合物或其药学上可接受的盐的方法，如本文所定义。

35、在另一方面，本文提供了一种式(i)、式(a)、式(b)或式(c)的化合物或其药学上可接受的盐，其可以通过本文所定义的合成方法获得或者由本文所定义的合成方法获得或者由本文所定义的合成方法直接获得。

36、在另一方面，本文提供了如本文定义的新型中间体，它们适用于本文所述的任何一种合成方法中。

37、本发明的任一特定方面的优选、合适和任选特征也是任何其他方面的优选、合适和任选特征。