一株蜡样芽孢杆菌HZB-1、生防菌剂及其制备和应用

本发明属于微生物领域，涉及生物防控技术，特别是指一株蜡样芽孢杆菌hzb-1、生防菌剂及其制备和应用。

背景技术：

1、小麦是全世界人类和牲畜的主要食物来源。而当前产量和质量受到多种病害的影响，尤其是土传根部病害严重，如小麦全蚀病、小麦纹枯病、小麦根腐病、小麦茎基腐病等。假禾谷镰孢（ fusarium pseudograminearum）引起小麦的茎基腐病和赤霉病，在世界性范围内广泛发生，已成为危害我国小麦生产的主要病害，且其侵染小麦后产生don等毒素蔓，危害人和动物的健康，引发粮食安全问题。

2、针对于土传根部病害引起的小麦病害，目前以化学药剂防治为主，辅以农业防治措施，但是化学药剂的大量使用存在破坏生态平衡、污染环境并且危害人畜健康等风险，不利于农业发展的持续性。国家减肥减药和绿色植保等政策的实施，生物防治因其持效期长和环境友好等优点而受到广泛关注，其中，高效生防菌株的筛选和利用是生物防治技术的关键。

3、利用拮抗微生物控制小麦茎基腐病和小麦纹枯病，是符合绿色植保战略发展的新方法。张洁等人将枯草芽孢杆菌yb-05的菌液与1%申嗪霉素悬浮液复配后处理小麦种子，对小麦茎基腐病的室内防效达69.8%，两次田间防效分别为57.8%和45.7%（张洁等, 2018）；杨凯等人将哈茨木莓与深绿木霉或产脲节杆菌混合使用，对小麦茎基腐病的防效具有明显的协同效应（杨凯等, 2023）。2020年-2021年，在河南省滑县小麦种植中使用生防制剂拌种及常规喷雾，对小麦茎基腐病的防效达56.64%，优于常规药剂（单俊奇等, 2022）。公开号cn116790436a公开了株防治作物土传病害的菌株、微生物菌剂及其应用，该菌株为链霉菌，用于抑制小麦全蚀病、小麦纹枯病、小麦根腐病、玉米茎基腐病等作物根部病害。

4、为了进一步提高对小麦病害的防治，筛选生防效果优异的拮抗微生物对小麦病害的防治尤为重要。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提出一株蜡样芽孢杆菌hzb-1、生防菌剂及其制备和应用，该菌株具有较高拮抗假禾谷镰孢的能力。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、本申请提供了一株蜡样芽孢杆菌hzb-1，其分类名为 bacillus cereushzb-1，于2024年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为cctcc m 2024677，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。

4、上述的蜡样芽孢杆菌hzb-1的培养方法，接种蜡样芽孢杆菌hzb-1后，于28-30℃培养。

5、本发明的目的还在于提供上述一株拮抗假禾谷镰孢的蜡样芽孢杆菌或/和其代谢产物的生防菌剂。

6、本发明中生防菌剂的制备方法为：将所述蜡样芽孢杆菌 bacillus cereushzb-1转接到含有50 ml lb培养基的250 ml三角瓶中，置于28 ℃、200 rpm条件下培养12 h~20 h，至od 600达到0.8时，即得到所述蜡样芽孢杆菌的生防菌剂。

7、本发明的目的还在于提供上述一株拮抗假禾谷镰孢的蜡样芽孢杆菌在抑制假禾谷镰孢孢子萌发的应用。

8、本发明的目的还在于提供上述一株拮抗假禾谷镰孢的蜡样芽孢杆菌在预防和治疗小麦茎基腐病的应用。

9、本发明的目的还在于提供上述一株拮抗假禾谷镰孢的蜡样芽孢杆菌在促进小麦生长中的应用。

10、本发明的目的还在于提供上述一株蜡样芽孢杆菌在预防小麦纹枯病的应用。

11、上述生防菌剂通过滴灌入小麦根部进行预防和/或治疗病害，滴灌时样芽孢杆菌hzb-1的使用浓度为1×108cfu/ml。

12、本发明具有以下有益效果：

13、1、目前尚未见用蜡样芽孢杆菌 bacillus cereus防治假禾谷镰孢引起的小麦茎基腐病。本发明中蜡样芽孢杆菌分离自青藏高原自然生境土壤，与小麦和所防治病原菌的生长环境差异较大，而来源不同菌株的生物学特性和抗菌谱等存在明显差异，具有菌株特异性，目前尚未对蜡样芽孢杆菌菌株是否能防控小麦茎基腐病和小麦纹枯病进行研究。

14、2、本发明中的蜡样芽孢杆菌对小麦茎基腐病的预防和治疗效果良好，预防效果为54.41%，治疗效果为47.95%，能够促进小麦的生长，且对小麦纹枯病预防效果良好，预防效果高达83.12%。利用本发明中的蜡样芽孢杆菌制备的生防菌剂可以替代或减少化学农药的使用，提高食品和生态环境安全，符合绿色植保的战略要求，兼具良好的经济和社会效益。

技术特征：

1.一株蜡样芽孢杆菌hzb-1，其分类名为bacillus cereus hzb-1，于2024年4月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为cctcc m 2024677，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。

2.权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌hzb-1的培养方法，其特征在于，接种蜡样芽孢杆菌hzb-1后，于28-30℃培养。

3.一种生防菌剂，其特征在于：包含权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌hzb-1和/或其代谢产物。

4.权利要求3所述的生防菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将蜡样芽孢杆菌hzb-1接种于lb液体培养基中，培养至od 600达至0.8，所得发酵菌液即为生防菌剂。

5.根据权利要求4所述的生防菌剂的制备方法，其特征在于：培养条件为28-30℃，200rpm条件下，培养12-20 h。

6.根据权利要求4所述的生防菌剂的制备方法，其特征在于，所述lb液体培养基的配方为：酵母提取物5 g/l、胰蛋白胨10 g/l、氯化钠10 g/l，ph 7.0。

7.权利要求3所述的生防菌剂在预防和/或治疗小麦茎基腐病中的应用。

8.权利要求3所述的生防菌剂在预防和/或治疗小麦纹枯病中的应用。

9.权利要求3所述的生防菌剂在促进小麦生长中的应用。

10.根据权利要求7-9任一项所述的应用，其特征在于：所述生防菌剂通过滴灌入小麦根部进行预防和/或治疗病害，滴灌时样芽孢杆菌hzb-1的使用浓度为1×108 cfu/ml。

技术总结本发明属于微生物领域，涉及生物防控技术，特别是指一株蜡样芽孢杆菌HZB‑1、生防菌剂及其制备和应用。旨在解决当前小麦病害有效生物防治措施缺乏的技术问题。本发明从青藏高原自然生境土壤中分离筛选得到一株蜡样芽孢杆菌Bacillus cereusHZB‑1，该菌株能够拮抗假禾谷镰孢的生长，对小麦茎基腐病有较好的预防和治疗效果，同时能促进小麦的生长和预防小麦纹枯病。利用本发明菌株制备的生防菌剂可以替代或减少化学农药使用，符合绿色植保发展的新方法，利于保障食品和生态安全，具有较好的经济和社会效益。技术研发人员：陈琳琳,李洪连,陈文波,施艳,杨雪受保护的技术使用者：河南农业大学技术研发日：技术公布日：2024/9/12