表达用于B型血友病疗法的因子IX的组合物和方法与流程

背景技术：

1、b型血友病是一种罕见的先天性遗传性疾病，其特征在于凝血因子ix(fix)的缺乏或不存在，从而导致出血倾向。它是由因子9(f9)基因的遗传性或自发性x连锁隐性突变引起的，导致缺失或缺陷的fix蛋白。b型血友病的全球发病率约为每25,000名活产男婴中1例。在美国，2019年的最新全球血友病调查报道了4,093名b型血友病患者，全世界总共31,997名b型血友病患者。world federation of hemophilia,“report on the annualglobal survey 2019”world federation of hemophilia(2020)。

2、由于x连锁隐性突变，b型血友病主要影响男性，但女性携带者也可能受到影响。b型血友病的出血倾向与所测量的因子浓度有关，并且被分类为轻度、中度或重度。在严重和中度严重的b型血友病病例中，频繁的自发性出血事件是最常见的症状。此类流血事件可能发生在肌肉和关节中，引起疼痛和运动限制，并且如果不进行治疗，则可能导致关节的长期损伤，伴有滑膜炎、关节病和肌肉无力。

3、美国目前的护理标准是用凝血因子浓缩物(cfc)预防和治疗出血事件，这些凝血因子浓缩物是重组的或来源于血液供体的血浆。然而，在3％-4％的cfc输注中可能发生过敏反应，并且约5％的患者在重复施用后会产生fix中和抗体。srivastava等人“wfhguidelines for the management of hemophilia,”haemophilia 26.6:1-158(2020)。因子替换也是繁琐的(需要频繁的静脉内施用)、昂贵的，并且减少但不能消除出血事件，这仍然导致关节疾病的进展和残疾。

技术实现思路

1、提供了包含含有第一因子ix蛋白编码序列或该第一因子ix蛋白编码序列的反向互补序列的核酸构建体的组合物、包含该组合物的细胞以及使用此类核酸构建体的方法，诸如将因子9核酸引入细胞内的方法、将因子9核酸构建体整合到细胞中的靶基因内的方法、在细胞内表达因子ix的方法、治疗受试者的因子ix缺乏的方法、治疗受试者的b型血友病的方法以及预防或抑制患有b型血友病的受试者的自发性出血的方法。

2、在一个方面，提供了包含核酸构建体的组合物，该核酸构建体包含第一因子ix蛋白编码序列或该第一因子ix蛋白编码序列的反向互补序列。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任选地其中因子ix蛋白编码序列是cpg耗尽的并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

3、在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；(ii)与seq id no:165至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(iii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

4、在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

5、在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:165至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166、165或159。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:166、165或159组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166或159。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:166或159组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列由seqid no:166组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:165组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成。

6、在一些此类组合物中，核酸构建体包含位于第一因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体。在一些此类组合物中，核酸构建体包含位于第一因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类组合物中，核酸构建体包含位于第一因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体，并且核酸构建体包含位于第一因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类组合物中，核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子。

7、在一些此类组合物中，核酸构建体是双向构建体。在一些此类组合物中，核酸构建体包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列，或者其中核酸构建体包含第一因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二因子ix蛋白编码序列。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

8、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

9、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:165至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

10、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

11、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:165至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。

12、在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的，并且第二因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。

13、在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体，并且第二因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列编码包含seqid no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。

14、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成。

15、在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。在一些此类组合物中：(i)第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:165组成。

16、在一些此类组合物中，核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，或者其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第二因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第一因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信号和第二聚腺苷酸化信号是不同的。

17、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq idno:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。

18、在一些此类组合物中，核酸构建体包含seq id no:210或180或其反向互补序列。

19、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq idno:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。

20、在一些此类组合物中，核酸构建体包含seq id no:209或179或其反向互补序列。

21、在一些此类组合物中，核酸构建体是单链dna或双链dna。在一些此类组合物中，核酸构建体是单链dna。在一些此类组合物中，核酸构建体处于核酸载体或脂质纳米颗粒中。在一些此类组合物中，核酸构建体处于核酸载体中。在一些此类组合物中，核酸载体是病毒载体。在一些此类组合物中，核酸载体是腺相关病毒(aav)载体，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，aav载体是单链aav(ssaav)载体。在一些此类组合物中，aav载体来源于aav8载体、aav3b载体、aav5载体、aav6载体、aav7载体、aav9载体、aavrh.74载体或aavhu.37载体。在一些此类组合物中，aav载体是重组aav8(raav8)载体。在一些此类组合物中，aav载体是单链raav8载体。

22、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq idno:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq idno:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。

23、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq idno:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq idno:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。

24、在一些此类组合物中，核酸构建体是单向构建体。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

25、在一些此类组合物中，核酸构建体是单向构建体。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

26、在一些此类组合物中，核酸构建体是单链dna或双链dna。在一些此类组合物中，核酸构建体是单链dna。在一些此类组合物中，核酸构建体处于核酸载体或脂质纳米颗粒中。在一些此类组合物中，核酸构建体处于核酸载体中。在一些此类组合物中，核酸载体是病毒载体。在一些此类组合物中，核酸载体是腺相关病毒(aav)载体，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，aav载体是单链aav(ssaav)载体。在一些此类组合物中，aav载体来源于aav8载体、aav3b载体、aav5载体、aav6载体、aav7载体、aav9载体、aavrh.74载体或aavhu.37载体。在一些此类组合物中，aav载体是重组aav8(raav8)载体。在一些此类组合物中，aav载体是单链raav8载体。

27、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

28、在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。在一些此类组合物中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

29、一些此类组合物还包含靶向靶基因中的核酸酶靶位点的核酸酶药剂。在一些此类组合物中，靶基因是白蛋白基因，任选地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此类组合物中，核酸酶药剂包含：(a)锌指核酸酶(zfn)；(b)转录激活因子样效应物核酸酶(talen)；或者(c)(i)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(ii)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。在一些此类组合物中，核酸酶药剂包含：(a)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(b)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向白蛋白基因的内含子1中的向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因。

30、在一些此类组合物中：(i)dna靶向区段包含seq id no:30-61中的任一者所示序列中的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸，任选地其中dna靶向区段包含seq id no:36、30、33和41中的任一者所示序列中的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向区段与seq id no:30-61中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同，任选地其中dna靶向区段与seq id no:36、30、33和41中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同。在一些此类组合物中，dna靶向区段包含seq id no:30-61中的任一者，任选地其中dna靶向区段包含seq id no:36、30、33和41中的任一者。在一些此类组合物中，dna靶向区段由seq id no:30-61中的任一者组成，任选地其中dna靶向区段由seq id no:36、30、33和41中的任一者组成。在一些此类组合物中，向导rna包含seqid no:62-125中的任一者，任选地其中向导rna包含seq id no:68、100、62、94、65、97、73和105中的任一者。

31、在一些此类组合物中：(i)dna靶向区段包含seq id no:36的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向区段与seq id no:36至少90％或至少95％相同。在一些此类组合物中，dna靶向区段包含seq id no:36。在一些此类组合物中，dna靶向区段由seq id no:36组成。在一些此类组合物中，向导rna包含seq id no:68或100。

32、在一些此类组合物中：(i)dna靶向区段包含seq id no:30的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向区段与seq id no:30至少90％或至少95％相同。在一些此类组合物中，dna靶向区段包含seq id no:30。在一些此类组合物中，dna靶向区段由seq id no:30组成。在一些此类组合物中，向导rna包含seq id no:62或94。

33、在一些此类组合物中：(i)dna靶向区段包含seq id no:33的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向区段与seq id no:33至少90％或至少95％相同。在一些此类组合物中，dna靶向区段包含seq id no:33。在一些此类组合物中，dna靶向区段由seq id no:33组成。在一些此类组合物中，向导rna包含seq id no:65或97。

34、在一些此类组合物中：(i)dna靶向区段包含seq id no:41的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸；并且/或者(ii)dna靶向区段与seq id no:41至少90％或至少95％相同。在一些此类组合物中，dna靶向区段包含seq id no:41。在一些此类组合物中，dna靶向区段由seq id no:41组成。在一些此类组合物中，向导rna包含seq id no:73或105。

35、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna。在一些此类组合物中，向导rna包含至少一种修饰。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前五个核苷酸中的一个或多个核苷酸处的修饰。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后五个核苷酸中的一个或多个核苷酸处的修饰。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类组合物中，该至少一种修饰包括：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

36、在一些此类组合物中，向导rna是单向导rna(sgrna)。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

37、在一些此类组合物中，向导rna是单向导rna(sgrna)。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

38、在一些此类组合物中，向导rna是单向导rna(sgrna)。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

39、在一些此类组合物中，向导rna是单向导rna(sgrna)。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

40、在一些此类组合物中，cas蛋白是cas9蛋白。在一些此类组合物中，cas蛋白是或来源于酿脓链球菌(streptococcus pyogenes)cas9蛋白。在一些此类组合物中，cas蛋白包含seq id no:11所示的序列。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的核酸被密码子优化以在哺乳动物细胞或人细胞中表达。在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含至少一种修饰。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna被修饰以在一个或多个或所有尿苷位置处包含经修饰的尿苷。在一些此类组合物中，经修饰的尿苷是假尿苷或n1-甲基-假尿苷，任选地n1-甲基-假尿苷。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代。在一些此类组合物中，经修饰的尿苷是假尿苷。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含5'帽。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。

41、在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

42、在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

43、在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

44、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

45、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

46、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

47、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

48、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

49、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

50、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

51、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

52、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

53、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

54、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

55、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

56、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

57、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

58、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

59、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

60、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

61、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

62、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

63、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

64、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

65、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

66、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

67、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

68、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

69、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

70、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

71、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

72、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

73、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

74、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

75、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

76、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

77、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

78、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

79、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

80、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

81、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

82、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

83、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

84、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

85、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

86、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

87、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

88、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

89、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

90、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

91、在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

92、在一些此类组合物中，cas蛋白或编码cas蛋白的核酸和向导rna或编码向导rna的一种或多种dna与脂质纳米颗粒缔合。在一些此类组合物中，脂质纳米颗粒包含阳离子脂质、中性脂质、辅助脂质(helper lipid)和隐形脂质(stealth lipid)。在一些此类组合物中，阳离子脂质是脂质a。在一些此类组合物中，中性脂质是dspc。在一些此类组合物中，辅助脂质是胆固醇。在一些此类组合物中，隐形脂质是1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇-2000(peg2k-dmg)。在一些此类组合物中，阳离子脂质是脂质a，中性脂质是dspc，辅助脂质是胆固醇，并且隐形脂质是peg2k-dmg。在一些此类组合物中，脂质纳米颗粒包含以下摩尔比的四种脂质：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。

93、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

94、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

95、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

96、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

97、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

98、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq idno:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

99、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

100、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

101、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

102、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

103、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

104、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

105、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

106、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

107、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

108、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

109、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

110、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

111、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

112、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

113、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

114、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

115、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

116、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

117、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

118、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

119、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

120、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

121、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

122、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

123、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

124、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:225所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

125、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

126、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

127、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

128、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:62或94，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

129、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

130、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:65或97，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

131、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

132、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:73或105，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

133、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

134、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

135、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

136、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:94，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

137、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

138、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:97，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

139、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

140、在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq idno:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该组合物包含呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:105，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该组合物包含编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列的双向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类组合物中，核酸构建体是包含第一因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seqid no:165，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:165。任选地，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

141、在一些此类组合物中，该组合物用于在将因子9核酸引入细胞内的方法、将因子9核酸构建体整合到细胞中的靶基因内的方法或在细胞中表达因子ix的方法中使用。在一些此类组合物中，该组合物用于在治疗受试者的因子ix缺乏的方法中使用。在一些此类组合物中，该组合物用于在治疗受试者的b型血友病的方法中使用。在一些此类组合物中，细胞是新生儿细胞。在一些此类组合物中，新生儿细胞来自出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，新生儿细胞来自出生后12周内的人类新生儿受试者。新生儿细胞来自出生后8周内的人类新生儿受试者。新生儿细胞来自出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，细胞不是新生儿细胞。在一些此类组合物中，受试者是新生儿受试者。在一些此类组合物中，新生儿受试者是出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，新生儿受试者是出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，新生儿受试者是出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，新生儿受试者是出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类组合物中，受试者不是新生儿受试者。

142、在另一方面，提供了包含任何上述组合物的细胞。在一些此类细胞中，核酸构建体被整合到内源靶基因座中，并且其中因子ix蛋白从内源靶基因座表达，或者其中核酸构建体被整合到内源白蛋白基因座的内含子1中，并且其中因子ix蛋白从内源白蛋白基因座表达。一些此类细胞是人细胞。一些此类细胞是肝脏细胞(例如，人肝脏细胞)。任选地，肝脏细胞是肝细胞。在一些此类细胞中，细胞是新生儿细胞。在一些此类细胞中，新生儿细胞来自出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类细胞中，新生儿细胞来自出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类细胞中，新生儿细胞来自出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类细胞中，新生儿细胞来自出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类细胞中，细胞不是新生儿细胞。在一些此类细胞中，细胞是离体的或体外的。在一些此类细胞中，组织是体内的。

143、在另一方面，提供了将因子9核酸引入细胞内的方法、将因子9核酸构建体整合到细胞中的靶基因内的方法以及在细胞中表达因子ix的方法。一些此类方法用于将因子9核酸引入细胞中，包括向细胞施用任何上述组合物。一些此类方法用于将因子9核酸构建体整合到细胞中的靶基因内，包括向细胞施用任何上述组合物，其中核酸酶药剂切割靶基因中的核酸酶靶位点以形成切割位点，核酸构建体被插入切割位点以形成经修饰的靶基因，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因表达。一些此类方法用于在细胞中表达因子ix，包括向细胞施用任何上述组合物，其中核酸酶药剂切割靶基因中的核酸酶靶位点以形成切割位点，核酸构建体被插入切割位点以形成经修饰的靶基因，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因表达。

144、在一些此类方法中，核酸酶药剂包含：(a)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(b)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。

145、在一些此类方法中，同时施用核酸构建体、cas蛋白或编码cas蛋白的核酸以及向导rna或编码向导rna的一种或多种dna。在一些此类方法中，核酸构建体不与cas蛋白或编码cas蛋白的核酸和向导rna或编码向导rna的一种或多种dna同时施用。

146、在一些此类方法中，靶基因是白蛋白基因，并且核酸酶靶位点处于白蛋白基因的内含子1中。在一些此类方法中，细胞是肝脏细胞。在一些此类方法中，细胞是肝细胞。在一些此类方法中，细胞是人细胞(例如，人肝脏细胞)。在一些此类方法中，细胞是新生儿细胞。在一些此类方法中，新生儿细胞来自出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞来自出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞来自出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞来自出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，细胞不是新生儿细胞。在一些此类方法中，组织是体内的。在一些此类方法中，细胞是体外的或离体的。

147、在另一方面，提供了治疗受试者的因子ix缺乏的方法、治疗受试者的b型血友病的方法以及预防或抑制患有b型血友病的受试者的自发性出血的方法。一些此类方法用于治疗受试者的因子ix缺乏，包括向受试者施用任何上述组合物。一些方法用于治疗受试者的b型血友病，包括向受试者施用任何上述组合物。一些方法用于预防或抑制患有b型血友病的受试者的自发性出血，包括向受试者施用任何上述组合物。

148、在一些此类方法中，b型血友病是轻度b型血友病。在一些此类方法中，b型血友病是中度b型血友病。在一些此类方法中，b型血友病是重度b型血友病。

149、在一些此类方法中，核酸酶药剂包含：(a)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(b)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。在一些此类方法中，向导rna靶序列处于白蛋白基因的内含子1中。

150、在一些此类方法中，同时施用核酸构建体、cas蛋白或编码cas蛋白的核酸以及向导rna或编码向导rna的一种或多种dna。在一些此类方法中，核酸构建体不与cas蛋白或编码cas蛋白的核酸和向导rna或编码向导rna的一种或多种dna同时施用。

151、在一些此类方法中，受试者是人受试者。在一些此类方法中，受试者是新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，受试者不是新生儿受试者。

152、在一些此类方法中，该方法导致受试者中治疗有效水平的循环因子ix蛋白。在一些此类方法中，该方法导致受试者中治疗有效水平的循环因子ix凝血活性。在一些此类方法中，与包括向对照受试者施用编码因子ix蛋白的游离型表达载体的方法相比，该方法导致受试者中因子ix蛋白的表达增加。在一些此类方法中，与包括向对照受试者施用编码因子ix蛋白的游离型表达载体的方法相比，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平增加。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平为至少约1μg/ml、至少约2μg/ml、至少约3μg/ml、至少约4μg/ml或至少约5μg/ml。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平为至少约5μg/ml。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平介于约1μg/ml和约10μg/ml之间。

153、在一些此类方法中，该方法实现正常值的至少约1％、正常值的至少约5％、正常值的至少约10％、正常值的至少约15％、正常值的至少约20％、正常值的至少约25％、正常值的至少约30％、正常值的至少约35％、正常值的至少约40％、正常值的至少约45％或正常值的至少约50％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，该方法实现介于正常值的约40％和约150％之间或介于约40％和约100％之间的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。

154、在一些此类方法中：(i)受试者患有重度血友病，并且该方法实现正常值的至少约1％或超过约1％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平；(ii)受试者患有中度血友病，并且该方法实现正常值的至少约5％或超过约5％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平；(iii)受试者患有轻度血友病，并且该方法实现正常值的至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、超过约10％、超过约15％、超过约20％、超过约25％、超过约30％、超过约35％、超过约40％、超过约45％或超过约50％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。

155、在一些此类方法中，该方法实现正常值的至少约15％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。

156、在一些此类方法中，该方法实现小于正常值的约300％、小于约250％、小于约200％或小于约150％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。

157、在一些此类方法中，该方法使循环因子ix蛋白或凝血活性水平比受试者的基线因子ix蛋白或凝血活性水平增加至少约1％、至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。

158、在一些此类方法中，循环因子ix蛋白或凝血活性水平在施用组合物后维持至少约1个月、至少约2个月、至少约3个月、至少约6个月、至少约1年或至少约2年。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后一年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后两年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后两年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。

159、在一些此类方法中，该方法还包括在向受试者施用组合物之前评估受试者的预先存在的aav免疫力。在一些此类方法中，预先存在的aav免疫力是预先存在的aav8免疫力。在一些此类方法中，评估预先存在的aav免疫力包括使用总抗体免疫测定或中和抗体测定来评估免疫原性。

160、本发明还提供了用于将编码因子ix蛋白的核酸插入新生儿细胞、新生儿细胞群体或新生儿受试者中的靶基因组基因座内或者用于从新生儿细胞、新生儿细胞群体或新生儿受试者中的靶基因组基因座表达编码因子ix蛋白的核酸的组合物和方法。本发明还提供了治疗因子ix缺乏的方法、预防或抑制自发性出血的方法以及治疗受试者(例如，新生儿受试者)的b型血友病的方法。本发明还提供了包含插入靶基因组基因座中的编码因子ix蛋白的核酸的新生儿细胞或新生儿细胞群体。

161、在一个方面，提供了将编码因子ix蛋白的核酸插入新生儿细胞或新生儿细胞群体中的靶基因组基因座内的方法。一些此类方法包括向新生儿细胞或新生儿细胞群体施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，并且核酸构建体被插入靶基因组基因座中。在另一方面，提供了从新生儿细胞或新生儿细胞群体中的靶基因组基因座表达因子ix蛋白的方法。一些此类方法包括向新生儿细胞或新生儿细胞群体施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，核酸构建体被插入靶基因组基因座中以形成经修饰的靶基因组基因座，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因组基因座表达。在一些此类方法中，新生儿细胞是肝脏细胞，或者新生儿细胞群体是肝脏细胞群体。在一些此类方法中，新生儿细胞是肝细胞，或者新生儿细胞群体是肝细胞群体。在一些此类方法中，新生儿细胞是人细胞，或者新生儿细胞群体是人细胞群体。在一些此类方法中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后24周内的新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后12周内的新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后8周内的新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后4周内的新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿细胞是体外的或离体的，或者新生儿细胞群体是体外的或离体的。在一些此类方法中，新生儿细胞是新生儿受试者体内的，或者新生儿细胞群体是新生儿受试者体内的。

162、在另一方面，提供了将编码因子ix蛋白的核酸插入新生儿受试者的新生儿细胞或新生儿细胞群体中的靶基因组基因座内的方法。一些此类方法包括向新生儿受试者施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，并且核酸构建体被插入靶基因组基因座中。在另一方面，提供了从新生儿受试者的新生儿细胞或新生儿细胞群体中的靶基因组基因座表达因子ix蛋白的方法。一些此类方法包括向新生儿受试者施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，核酸构建体被插入靶基因组基因座中以形成经修饰的靶基因组基因座，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因组基因座表达。在一些此类方法中，新生儿细胞是肝脏细胞，或者新生儿细胞群体是肝脏细胞群体。在一些此类方法中，新生儿细胞是肝细胞，或者新生儿细胞群体是肝细胞群体。在一些此类方法中，新生儿细胞是人细胞，或者新生儿细胞群体是人细胞群体。

163、在另一方面，提供了治疗有需要的新生儿受试者的因子ix缺乏的方法。一些此类方法包括向新生儿受试者施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，核酸构建体被插入靶基因组基因座中以形成经修饰的靶基因组基因座，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因组基因座表达。在另一方面，提供了预防或抑制患有b型血友病的新生儿受试者的自发性出血的方法。一些此类方法包括向新生儿受试者施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，核酸构建体被插入靶基因组基因座中以形成经修饰的靶基因组基因座，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因组基因座表达并且预防或抑制新生儿受试者的自发性出血。在一些此类方法中，受试者患有b型血友病。在另一方面，提供了治疗有需要的新生儿受试者的b型血友病的方法。一些此类方法包括向新生儿受试者施用：(a)核酸构建体，该核酸构建体包含因子ix蛋白编码序列；以及(b)核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸，其中核酸酶药剂靶向靶基因组基因座中的核酸酶靶位点，其中核酸酶药剂切割核酸酶靶位点，核酸构建体被插入靶基因组基因座中以形成经修饰的靶基因组基因座，并且因子ix蛋白从经修饰的靶基因组基因座表达，从而治疗b型血友病。在一些此类方法中，受试者患有轻度b型血友病。在一些此类方法中，受试者患有中度b型血友病。在一些此类方法中，受试者患有重度b型血友病。

164、在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类方法中，新生儿受试者是出生后4周内的人类新生儿受试者。

165、在一些此类方法中，与包括向对照受试者施用编码因子ix蛋白的游离型表达载体的方法相比，该方法导致受试者中因子ix蛋白的表达增加。在一些此类方法中，与包括向对照受试者施用编码因子ix蛋白的游离型表达载体的方法相比，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平增加。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平为至少约1μg/ml、至少约2μg/ml、至少约3μg/ml、至少约4μg/ml或至少约5μg/ml。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平为至少约5μg/ml。在一些此类方法中，该方法导致受试者中因子ix蛋白的血清水平介于约1μg/ml和约10μg/ml之间。在一些此类方法中，该方法使因子ix蛋白的表达比受试者的因子ix蛋白基线表达增加至少约1％、至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。在一些此类方法中，该方法使血清中的因子ix蛋白水平比受试者的因子ix蛋白基线血清水平增加至少约1％、至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后一年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后两年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少50％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后两年时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。在一些此类方法中，因子ix蛋白的表达或活性在施用后六个月时是针对人类受试者测量的峰值表达水平处的因子ix蛋白的表达或活性的至少60％。在一些此类方法中，该方法导致受试者中治疗有效水平的循环因子ix蛋白。在一些此类方法中，该方法导致受试者中治疗有效水平的循环因子ix凝血活性。在一些此类方法中，该方法实现正常值的至少约1％、正常值的至少约5％、正常值的至少约10％、正常值的至少约15％、正常值的至少约20％、正常值的至少约25％、正常值的至少约30％、正常值的至少约35％、正常值的至少约40％、正常值的至少约45％或正常值的至少约50％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，该方法实现介于正常值的约40％和约150％之间或介于约40％和约100％之间的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，受试者患有重度血友病，并且该方法实现正常值的至少约1％或超过约1％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，受试者患有中度血友病，并且该方法实现正常值的至少约5％或超过约5％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，受试者患有轻度血友病，并且该方法实现正常值的至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、超过约10％、超过约15％、超过约20％、超过约25％、超过约30％、超过约35％、超过约40％、超过约45％或超过约50％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，该方法实现正常值的至少约15％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，该方法实现小于正常值的约300％、小于约250％、小于约200％或小于约150％的循环因子ix蛋白或凝血活性水平。在一些此类方法中，该方法使循环因子ix蛋白或凝血活性水平比受试者的基线因子ix蛋白或凝血活性水平增加至少约1％、至少约5％、至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约100％。在一些此类方法中，受试者是人受试者。

166、在一些此类方法中，核酸构建体与核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸同时施用。在一些此类方法中，核酸构建体不与核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸同时施用。在一些此类方法中，核酸构建体在核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸之前施用。在一些此类方法中，核酸构建体在核酸酶药剂或编码该核酸酶药剂的一种或多种核酸之后施用。

167、在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任选地其中因子ix蛋白编码序列是cpg耗尽的并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；(ii)与seq id no:165至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(iii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166、165或159。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列由seq id no:166、165或159组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166或159。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列由seq id no:166或159组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列由seqid no:159组成。

168、在一些此类方法中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体位点。在一些此类方法中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类方法中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体，并且核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类方法中，核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，经由非同源末端接合将核酸构建体插入靶基因组基因座中。在一些此类方法中，核酸构建体包含同源臂。在一些此类方法中，经由同源定向修复将核酸构建体插入靶基因组基因座中。在一些此类方法中，核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子。

169、在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，并且因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列。在一些此类方法中，核酸构建体包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq idno:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq idno:166至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的，并且第二因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体，并且第二因子ix蛋白编码序列编码与seq idno:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成，并且第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成，并且第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成。在一些此类方法中，核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列。在一些此类方法中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信号和第二聚腺苷酸化信号是不同的。

170、在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，核酸构建体包含seq id no:210或180或其反向互补序列。

171、在一些此类方法中，核酸构建体是单链dna或双链dna。在一些此类方法中，核酸构建体是单链dna。

172、在一些此类方法中，核酸构建体处于核酸载体或脂质纳米颗粒中。在一些此类方法中，核酸构建体处于核酸载体中。在一些此类方法中，核酸载体是病毒载体。在一些此类方法中，核酸载体是腺相关病毒(aav)载体，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，aav载体是单链aav(ssaav)载体。在一些此类方法中，aav载体来源于aav8载体、aav3b载体、aav5载体、aav6载体、aav7载体、aav9载体、aavrh.74载体或aavhu.37载体。在一些此类方法中，aav载体是重组aav8(raav8)载体。在一些此类方法中，aav载体是单链raav8载体。

173、在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。

174、在一些此类方法中，核酸构建体是单向构建体。在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq idno:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

175、在一些此类方法中，核酸构建体是单链dna或双链dna。在一些此类方法中，核酸构建体是单链dna。在一些此类方法中，核酸构建体处于核酸载体或脂质纳米颗粒中。在一些此类方法中，核酸构建体处于核酸载体中。在一些此类方法中，核酸载体是病毒载体。在一些此类方法中，核酸载体是腺相关病毒(aav)载体，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，aav载体是单链aav(ssaav)载体。在一些此类方法中，aav载体来源于aav8载体、aav3b载体、aav5载体、aav6载体、aav7载体、aav9载体、aavrh.74载体或aavhu.37载体。在一些此类方法中，aav载体是重组aav8(raav8)载体。在一些此类方法中，aav载体是单链raav8载体。

176、在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seqid no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

177、在一些此类方法中，靶基因组基因座是白蛋白基因，任选地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此类方法中，核酸酶靶位点处于白蛋白基因的内含子1中。在一些此类方法中，核酸酶药剂包含：(a)锌指核酸酶(zfn)；(b)转录激活因子样效应物核酸酶(talen)；或者(c)(i)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(ii)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。

178、在一些此类方法中，核酸酶药剂包含：(a)cas蛋白或编码cas蛋白的核酸；以及(b)向导rna或编码向导rna的一种或多种dna，其中向导rna包含靶向向导rna靶序列的dna靶向区段，并且其中向导rna与cas蛋白结合并且将cas蛋白靶向到向导rna靶序列。在一些此类方法中，向导rna靶序列处于白蛋白基因的内含子1中。在一些此类方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此类方法中，dna靶向区段包含seq id no:30-61中的任一者所示序列中的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸，任选地其中dna靶向区段包含seq id no:36、30、33和41中的任一者所示序列中的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸。在一些此类方法中，dna靶向区段与seq id no:30-61中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同，任选地其中dna靶向区段与seq id no:36、30、33和41中的任一者所示序列至少90％或至少95％相同。在一些此类方法中，dna靶向区段包含seq id no:30-61中的任一者，任选地其中dna靶向区段包含seq id no:36、30、33和41中的任一者。在一些此类方法中，dna靶向区段由seq id no:30-61中的任一者组成，任选地其中dna靶向区段由seq id no:36、30、33和41中的任一者组成。在一些此类方法中，向导rna包含seq idno:62-125中的任一者，任选地其中向导rna包含seq id no:68、100、62、94、65、97、73和105中的任一者。在一些此类方法中，dna靶向区段包含seq id no:36的至少17个、至少18个、至少19个或至少20个连续核苷酸。在一些此类方法中，dna靶向区段与seq id no:36至少90％或至少95％相同。在一些此类方法中，dna靶向区段包含seq id no:36。在一些此类方法中，dna靶向区段由seq id no:36组成。在一些此类方法中，向导rna包含seq id no:68或100。

179、在一些此类方法中，该方法包括施用呈rna形式的向导rna。在一些此类方法中，向导rna包含至少一种修饰。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前五个核苷酸中的一个或多个核苷酸处的修饰。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后五个核苷酸中的一个或多个核苷酸处的修饰。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类方法中，该至少一种修饰包括：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。在一些此类方法中，向导rna是单向导rna(sgrna)。在一些此类方法中，该方法包括施用呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸。

180、在一些此类方法中，cas蛋白是cas9蛋白。在一些此类方法中，cas9蛋白来源于酿脓链球菌cas9蛋白、金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)cas9蛋白、空肠弯曲杆菌(campylobacter jejuni)cas9蛋白、嗜热链球菌(streptococcus thermophilus)cas9蛋白或脑膜炎奈瑟氏球菌(neisseria meningitidis)cas9蛋白。在一些此类方法中，cas蛋白来源于酿脓链球菌cas9蛋白。在一些此类方法中，cas蛋白包含seq id no:11所示的序列。在一些此类方法中，编码cas蛋白的核酸被密码子优化以在哺乳动物细胞或人细胞中表达。在一些此类方法中，该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna包含至少一种修饰。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna被修饰以在一个或多个或所有尿苷位置处包含经修饰的尿苷。在一些此类方法中，经修饰的尿苷是假尿苷或n1-甲基-假尿苷，任选地n1-甲基-假尿苷。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna被修饰以在一个或多个或所有尿苷位置处包含经修饰的尿苷。在一些此类方法中，经修饰的尿苷是假尿苷。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna包含5'帽。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna包含poly(a)尾。在一些此类方法中，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列。在一些此类方法中，该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类方法中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。

181、在一些此类方法中，该方法包括施用呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，并且其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列。在一些此类方法中，该方法包括施用呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类方法中，该方法包括施用呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，并且其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾。在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且其中双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seqid no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且其中双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166；其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

182、在一些此类方法中，cas蛋白或编码cas蛋白的核酸和向导rna或编码向导rna的一种或多种dna与脂质纳米颗粒缔合。在一些此类方法中，脂质纳米颗粒包含阳离子脂质、中性脂质、辅助脂质和隐形脂质。在一些此类方法中，阳离子脂质是脂质a((9z,12z)-3-((4,4-双(辛氧基)丁酰基)氧基)-2-((((3-(二乙氨基)丙氧基)羰基)氧基)甲基)丙基十八-9,12-二烯酸酯)。在一些此类方法中，中性脂质是二硬脂酰磷脂酰胆碱或1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(dspc)。在一些此类方法中，辅助脂质是胆固醇。在一些此类方法中，隐形脂质是peg2k-dmg。在一些此类方法中，阳离子脂质是脂质a，中性脂质是dspc，辅助脂质是胆固醇，并且隐形脂质是peg2k-dmg。在一些此类方法中，脂质纳米颗粒包含以下摩尔比的四种脂质：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。

183、在一些此类方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该方法包括施用呈rna形式的向导rna，并且该向导rna包含seq id no:68或100，其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，并且编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该方法包括施用呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq id no:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷或n1-甲基-假尿苷、任选地n1-甲基-假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类方法中，白蛋白基因是人白蛋白基因，其中该方法包括施用呈rna形式的向导rna，该向导rna包含seq idno:100，并且该向导rna包含：(i)向导rna的5'端处的前四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(ii)向导rna的3'端处的最后四个核苷酸之间的硫代磷酸酯键；(iii)向导rna的5'端处的前三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸；以及(iv)向导rna的3'端处的最后三个核苷酸处的经2'-o-甲基修饰的核苷酸，其中该方法包括施用编码cas蛋白的核酸，其中该核酸包含编码cas蛋白的mrna，编码cas蛋白的mrna包含seq id no:226、225或12所示的序列，并且编码cas蛋白的mrna被假尿苷完全取代，包含5'帽，并且包含poly(a)尾，并且其中向导rna和编码cas蛋白的mrna与脂质纳米颗粒缔合，该脂质纳米颗粒任选地以下列摩尔比包含脂质a、dspc、胆固醇和peg2k-dmg：约50摩尔％脂质a、约9摩尔％dspc、约38摩尔％胆固醇和约3摩尔％peg2k-dmg。在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且其中双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq idno:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq idno:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类方法中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且其中双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，核酸构建体是包含因子ix蛋白编码序列的单向构建体，其中核酸构建体从5'至3'包含：剪接受体、因子ix蛋白编码序列和聚腺苷酸化信号，其中因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159或seq id no:166，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中核酸构建体不包含同源臂，并且其中核酸构建体处于单链raav8载体中，任选地其中核酸构建体在每一端侧接有反向末端重复序列(itr)，任选地其中至少一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:198、基本上由其组成或由其组成，或者任选地其中至少一端的itr包含seq idno:196、基本上由其组成或由其组成，并且任选地其中每一端的itr包含seq id no:196、基本上由其组成或由其组成。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类方法中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。

184、在一些此类方法中，该方法还包括在向受试者施用组合物之前评估受试者的预先存在的aav免疫力。在一些此类方法中，预先存在的aav免疫力是预先存在的aav8免疫力。在一些此类方法中，评估预先存在的aav免疫力包括使用总抗体免疫测定或中和抗体测定来评估免疫原性。

185、在另一方面，提供了通过任何上述方法制备的新生儿细胞或新生儿细胞群体。在另一方面，提供了包含核酸构建体的新生儿细胞或新生儿细胞群体，该核酸构建体包含插入靶基因组基因座中的因子ix蛋白编码序列。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞是肝脏细胞，或者新生儿细胞群体是肝脏细胞群体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞是肝细胞，或者新生儿细胞群体是肝细胞群体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞是人细胞，或者新生儿细胞群体是人细胞群体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后24周内的人类新生儿受试者。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后12周内的人类新生儿受试者。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后8周内的人类新生儿受试者。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞或新生儿细胞群体来自出生后4周内的人类新生儿受试者。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞是体外的或离体的，或者新生儿细胞群体是体外的或离体的。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，新生儿细胞是受试者体内的，或者新生儿细胞群体是受试者体内的。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白被表达。

186、在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列编码与seq idno:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166、165、164和167-171中的任一者至少95％相同，任选地其中因子ix蛋白编码序列是cpg耗尽的并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159、160和161中的任一者至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列：

187、(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；(ii)与seq id no:165至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(iii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列：(i)与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；或者(ii)与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166、165或159。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列由seq id no:166、165或159组成。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166或159。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列由seq idno:166或159组成。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列由seqid no:166组成。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，因子ix蛋白编码序列由seqid no:159组成。

188、在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列上游的剪接受体，并且核酸构建体包含位于因子ix蛋白编码序列下游的聚腺苷酸化信号。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中因子ix蛋白编码序列可操作地连接到靶基因组基因座处的内源启动子。

189、在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体是双向构建体，并且因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第一因子ix蛋白编码序列。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少95％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，并且是：(i)cpg耗尽的；(ii)被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变；或者(iii)cpg耗尽的并被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，(i)第一因子ix蛋白编码序列与seq id no:166至少99％相同，是cpg耗尽的，并且是密码子优化的，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体；并且(ii)第二因子ix蛋白编码序列与seq id no:159至少99％相同，是cpg耗尽的，并且被修饰以使一个或多个隐蔽剪接供体序列突变，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的，并且第二因子ix蛋白编码序列已去除一个cpg二核苷酸之外的所有cpg二核苷酸或是完全cpg耗尽的。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体，并且第二因子ix蛋白编码序列编码与seq id no:195至少99％相同的因子ix蛋白，并且任选地其中因子ix蛋白不是高活性因子ix变体。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白，并且第二因子ix蛋白编码序列编码包含seq id no:195的因子ix蛋白。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第二因子ix蛋白编码序列包含seq idno:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成，并且第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列由seq id no:166组成，并且第二因子ix蛋白编码序列由seq id no:159组成。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，第一因子ix蛋白编码序列和第二因子ix蛋白编码序列是不同的，但编码相同的因子ix蛋白序列，并且其中第一聚腺苷酸化信号和第二聚腺苷酸化信号是不同的。

190、在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体是双向构建体，其中因子ix蛋白编码序列是第一因子ix蛋白编码序列，并且双向构建体还包含第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列，其中核酸构建体从5'至3'包含：第一剪接受体、第一因子ix蛋白编码序列、第一聚腺苷酸化信号、第二聚腺苷酸化信号的反向互补序列、第二因子ix蛋白编码序列的反向互补序列和第二剪接受体的反向互补序列，其中：(i)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166；或者(ii)第一因子ix蛋白编码序列包含seq id no:166，并且第二因子ix蛋白编码序列包含seq id no:159，其中核酸构建体不包含驱动因子ix蛋白的表达的启动子，并且其中因子ix蛋白编码序列可操作地连接到靶基因组基因座处的内源启动子。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸构建体包含seq id no:210或180或其反向互补序列。

191、在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，靶基因组基因座是白蛋白基因，任选地其中白蛋白基因是人白蛋白基因。在一些此类新生儿细胞或新生儿细胞群体中，核酸酶靶位点处于白蛋白基因的内含子1中。