一种真菌来源的环肽类化合物及其制备方法与应用

本发明属于海洋微生物及其天然产物应用，具体涉及一种真菌来源的环肽类化合物及其制备方法与应用。

背景技术：

1、肽类化合物因具有毒性小、靶向性强和分子质量小等优点，一直以来是新型药物研发的重要对象。其中，环肽类化合物是氨基酸通过肽键首尾相连形成的环状化合物，由于其构象受到了限制和约束，与链状线性肽相比，环肽类化合物具有更高的靶标选择性、代谢稳定性和膜通透性，致使生物利用度大大提高。环肽类化合物作为抗生素药物在医药领域发挥着重要的作用，多种环肽类化合物如万古霉素、达托霉素、多粘菌素等作为抗菌药物已在临床上广泛使用。基于天然产物的新活性先导化合物的发现，一直是新药研发的快速有效途径。目前，已有越来越多的环肽类化合物从植物、海洋生物和微生物中被发掘并鉴定。

2、海洋真菌能够耐受海洋特有的高盐、高压、低氧、低光照等极端环境，与陆地真菌相比，其生存条件的特异性导致了海洋真菌在物种、基因组成和生态功能上的多样性。此外，海洋真菌是活性天然产物的重要来源，据统计，70-80%的海洋真菌次生代谢产物展现出各种药理活性和生物功能。从海洋真菌的应用价值上来说，海洋真菌次生代谢产物对于新型环肽类抗生素药物研发具有重要的意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种真菌来源的环肽类化合物及其制备方法与应用。

2、所述的环肽类化合物的结构式如下所示：

3、。

4、所述的环肽类化合物的发酵制备方法为：将海洋动物来源的真菌花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18接种于真菌液体培养基中发酵培养，经分离纯化后即得环肽类化合物。

5、所述花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18于2024年7月24日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.41474。

6、所述的环肽类化合物的发酵制备方法的具体操作步骤为：

7、1）将花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18接种于真菌液体培养基中静置发酵20-50天，得到菌株发酵产物；过滤，发酵液经乙酸乙酯萃取，减压浓缩，得到发酵液提取物；菌丝体经乙酸乙酯提取，减压浓缩，得到菌丝体提取物；发酵液提取物和菌丝体提取物合并，即得总粗提物；

8、2）将步骤1）中的总粗提物进行正相硅胶柱层析，经有机溶剂梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测后合并相似组分，所述有机溶剂为石油醚-乙酸乙酯或二氯甲烷-甲醇；

9、3）将步骤2）中洗脱液体积比为20:1-10:1的洗脱组分，依次进行反相硅胶柱层析和正相硅胶柱层析进一步分离纯化，并用薄层色谱检测收集rf为0.4-0.6组分，即得环肽类化合物。

10、步骤3）中所述的反相硅胶柱层析的洗脱液为甲醇-水或乙醇-水；正相硅胶柱层析的洗脱液为石油醚-乙酸乙酯或二氯甲烷-甲醇。

11、步骤3）中所述的薄层色谱检测的展开剂为体积比30:1-1:1的石油醚-乙酸乙酯或二氯甲烷-甲醇。

12、上述环肽类化合物在制备抗菌药物中的应用。

13、本发明的环肽类化合物是通过分离自海洋动物繁茂膜海绵中的花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18经发酵、提取分离获得的新环五肽化合物，纯度为95%-97%。该化合物结构新颖、来源独特、制备方法简单。本发明制备的环肽类化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用，为研究和开发新的抗菌药物提供了新的先导化合物，也为开发海洋真菌资源提供了科学依据。

技术特征：

1.一种环肽类化合物，其特征在于，该化合物的结构式如下所示：

2.根据权利要求1所述的环肽类化合物的发酵制备方法，其特征在于，所述发酵制备方法为：将海洋动物来源的真菌花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18接种于真菌液体培养基中发酵培养，经分离纯化后即得环肽类化合物。

3.根据权利要求2所述的环肽类化合物的发酵制备方法，其特征在于，所述花斑曲霉aspergillus versicolor 2-18于2024年7月24日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.41474。

4.根据权利要求3所述的环肽类化合物的发酵制备方法，其特征在于，所述制备方法的具体操作步骤为：

5.根据权利要求4所述的环肽类化合物的发酵制备方法，其特征在于，步骤3）中所述的反相硅胶柱层析的洗脱液为甲醇-水或乙醇-水；正相硅胶柱层析的洗脱液为石油醚-乙酸乙酯或二氯甲烷-甲醇。

6.根据权利要求4所述的环肽类化合物的发酵制备方法，其特征在于，步骤3）中所述的薄层色谱检测的展开剂为体积比30:1-1:1的石油醚-乙酸乙酯或二氯甲烷-甲醇。

7.根据权利要求1所述的环肽类化合物在制备抗菌药物中的应用。

技术总结本发明公开了一种真菌来源的环肽类化合物及其制备方法与应用。本发明从海洋动物繁茂膜海绵中分离得到花斑曲霉Aspergillus versicolor 2‑18，经发酵培养、提取分离获得新环五肽化合物cyclo‑[N‑Me‑L‑Tyr‑L‑Val‑L‑Pro‑L‑Tyr‑L‑Phe]，纯度为95%‑97%。该化合物结构新颖、来源独特、制备方法简单。本发明制备的环肽类化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用，为研究和开发新的抗菌药物提供了新的先导化合物，也为开发海洋真菌资源提供了科学依据。技术研发人员：郑茂坤,黄正,陈嘉欣,杨昇蒲,汪俊受保护的技术使用者：山东第一医科大学（山东省医学科学院）技术研发日：技术公布日：2024/11/4