抗体药物缀合物及其制备方法与流程

背景技术：

1、葡萄膜黑色素瘤(um)是一种罕见的恶性肿瘤，占所有黑色素瘤的3％-5％，发病率为每100万人6-10例，美国每年新增病例2500-3000例。尽管局部疾病控制率很高(5年osr70％)，但高达50％的患者将出现转移性疾病(肝60％，肺25％；中位os13个月，2年osr8％)。对于确实发生转移性疾病的患者，尚无经过验证的护理标准。为了改善转移性um患者的预后，医学上迫切需要专门批准的治疗和专门的疾病管理策略。

2、gnaq或gna11的致癌突变是葡萄膜黑色素瘤的标志性突变。gnaq/11水平的降低会导致细胞增殖抑制和凋亡。抑制作用可以通过靶向递送抑制gnaq/11活性的抗体药物缀合物来实现。尽管最近取得了进展，但仍然需要开发用于抗体药物缀合物的新颖生物材料、制造方法和配制品。

技术实现思路

1、本披露至少部分提供了以高滴度和/或分离产率产生酯肽(例如化合物(a1))的基因工程改造的微生物(例如，痘苗色杆菌(chromobacterium vaccinii))。在一些实施例中，微生物包括与酯肽的生物合成基因簇(bgc)可操作地连接的非原初启动子。在一些实施例中，干扰酯肽分离的天然产物的bgc被破坏。还描述了使用本文所述的微生物产生酯肽例如化合物(a1)的方法。通过本文描述的方法产生的酯肽，例如化合物(a1)，可用于例如根据本文描述的方法产生抗体药物缀合物(例如本文描述的抗体药物缀合物)。

2、本披露还至少部分地提供了用于生产部分再氧化的抗体或其抗原结合片段的方法。在一些实施例中，该方法包括还原抗体或其抗原结合片段中的一个或多个加帽半胱氨酸残基，以提供包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，该方法包括在足以生产部分再氧化的抗体或其抗原结合片段的氧化条件下储存包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段。本文还描述了制备抗体药物缀合物(例如，本文所述的抗体药物缀合物)的方法，其使用用于产生本文所述的部分再氧化的抗体或其抗原结合片段的方法。通过本文描述的方法制备的抗体药物缀合物可以配制为本文描述的配制品。

3、本披露还至少部分地提供了抗体药物缀合物(例如，本文所述的抗体药物缀合物)的配制品。在一些实施例中，配制品包含本文所述的抗体药物缀合物、缓冲剂、稳定剂和表面活性剂，并且具有约4.5至约6.5的ph。在一些实施例中，配制品是冻干配制品。本文描述的配制品可用于治疗或预防障碍，例如癌症。在一些实施例中，癌症表达pmel17和/或含有gnaq或gna11基因中的突变。在一些实施例中，癌症是癌(例如肝细胞癌)、肉瘤、白血病、淋巴瘤、眼癌、眼部肿瘤、黑色素瘤(例如葡萄膜黑色素瘤、非葡萄膜黑色素瘤、恶性黑色素瘤、眼部黑色素瘤、皮下黑色素瘤、皮肤黑色素瘤或粘膜黑色素瘤)或其转移性癌症。工程改造的微生物和生产化合物的方法

4、一方面，本披露的特征在于一种微生物，其包含核酸，该核酸包含编码与具有式(a1)结构的化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列，其中该核苷酸序列可操作地连接至非原初启动子。

5、在一些实施例中，微生物是天然产生化合物的微生物的基因工程改造形式。在一些实施例中，微生物是细菌。在一些实施例中，微生物是色杆菌属。在一些实施例中，微生物是痘苗色杆菌。在一些实施例中，微生物是痘苗色杆菌dsm 25150(＝atcc baa-2314、＝nrrl b-50840、＝mwu205)。在一些实施例中，微生物是分离的微生物。在一些实施例中，微生物是合成的微生物。

6、在一些实施例中，核酸位于微生物的染色体上，例如天然位于染色体上或稳定整合至染色体。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于生物合成基因簇(bgc)中。在一些实施例中，bgc是化合物(a1)-bgc。在一些实施例中，化合物(a1)-bgc具有图1中所示的基因组织。

7、在一些实施例中，bgc包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh中的一个或多个(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个或全部)或其同系物。在一些实施例中，bgc包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物。

8、在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh或其同系物中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa和frsb或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb和frsc或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc和frsd或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd和frse或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse和frsf或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf和frsg或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的区域中。

9、在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa和frsb或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb和frsc或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc和frsd或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd和frse或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse和frsf或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf和frsg或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的编码序列。

10、在一些实施例中，核酸包含使用seq id no:317的核苷酸序列或其功能片段、或与seq id no:317的核苷酸序列或其功能片段具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约100、约90、约80、约70、约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列产生自同源重组事件(例如，用于启动子交换)的核苷酸序列。

11、在一些实施例中，核酸包含与genbank登录号：bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段，或与bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段具有至少约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的核苷酸序列。

12、在某些实施例中，非原初启动子来自相同的微生物。在其他实施例中，非原初启动子来自不同的微生物。

13、在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子、nptii启动子、rbs启动子、j23119启动子、plpp启动子、ps12burk启动子、erme*启动子或pem7启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子、nptii启动子或rbs启动子。

14、在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段。

15、在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段。

16、在一些实施例中，非原初启动子包含nptii启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段。

17、在一些实施例中，非原初启动子包含rbs启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段。

18、在一些实施例中，非原初启动子包含j23119启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段。

19、在一些实施例中，非原初启动子包含plpp启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段。

20、在一些实施例中，非原初启动子包含pem7启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段。

21、在一些实施例中，非原初启动子包含ps12burk启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段。

22、在一些实施例中，非原初启动子包含erme*启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过60、50、40、30、20、15、10、5或2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段。

23、在一些实施例中，非原初启动子控制frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh中的一个或多个(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个或全部)或其同系物的转录。在一些实施例中，非原初启动子控制frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的转录。在一些实施例中，非原初启动子插入frsa或其同系物的编码区上游，例如frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh中全部或其同系物的编码区上游。

24、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是非核糖体肽合成酶(nrps)或其功能片段。在一些实施例中，nrps是frsa、frsd、frse、frsf或frsg，或其同系物。

25、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是mbth样蛋白或其功能片段。在一些实施例中，mbth样蛋白是frsb或其同系物。

26、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是苹果酸脱氢酶。在一些实施例中，苹果酸脱氢酶是frsc或其同系物。

27、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是羟化酶。在一些实施例中，羟化酶是frsh或其同系物。

28、在一些实施例中，核酸包含编码与化合物的生产相关的多个多肽的多个核苷酸序列。在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含多个nrps或其功能片段。在一些实施例中，多个nrps包含frsa、frsd、frse、frsf或frsg中的两个或更多个(例如，三个、四个或全部)或其同系物。在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含nrps、mbth样蛋白、苹果酸脱氢酶和羟化酶或其功能片段。

29、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物。

30、在一些实施例中，微生物具有增加的化合物滴度。在一些实施例中，当在允许生产化合物的条件下培养时，与参考微生物(例如，在化合物(a1)-bgc中不包含非原初启动子的但在其他方面相同的微生物(例如，野生型))相比，化合物的滴度增加至少约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9或约10倍。在一些实施例中，当在允许生产化合物的条件下培养时，与参考微生物(例如，在化合物(a1)-bgc中不包含非原初启动子的但在其他方面相同的微生物(例如，野生型))相比，化合物的滴度增加至少约100mg/l、约200mg/l、约300mg/l、约400mg/l、约500mg/l、约600mg/l、约700mg/l、约800mg/l、约900mg/l或约1000mg/l。

31、在一些实施例中，干扰化合物分离的天然产物的bgc被改变，例如，破坏。在一些实施例中，天然产物包含以下的一种或多种(例如，两种、三种或全部)：紫色杆菌素、化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d。在一些实施例中，干扰化合物分离的天然产物的至少一部分bgc被缺失。在一些实施例中，紫色杆菌素-bgc被改变，例如，破坏。在一些实施例中，化合物j-bgc被改变，例如，破坏。在一些实施例中，化合物j-bgc与化合物j、化合物f5、化合物f3和化合物d的生产相关。在一些实施例中，紫色杆菌素-bgc和化合物j-bgc两者都被改变，例如，破坏。在一些实施例中，天然产物的产量被降低例如至少约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％。

32、在一些实施例中，微生物具有增加的化合物分离产率。在一些实施例中，与参考微生物(例如是其中干扰化合物分离的天然产物的bgc没有改变的但在其他方面相同的微生物(例如野生型))相比，化合物的分离产率增加了约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或更多。

33、在一些实施例中，干扰化合物分离的天然产物的bgc没有被改变，例如，没有破坏。

34、在另一个方面，本披露的特征在于生产具有式(a1)结构的化合物的微生物，其中干扰该化合物的分离的天然产物的bgc被改变。

35、在一些实施例中，天然产物包含以下的一种或多种(例如，两种、三种或全部)：紫色杆菌素、化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d。在一些实施例中，干扰化合物分离的天然产物的至少一部分bgc被缺失。在一些实施例中，紫色杆菌素-bgc被改变，例如，破坏。在一些实施例中，化合物j-bgc被改变，例如，破坏。在一些实施例中，化合物j-bgc与化合物j、化合物f5、化合物f3和化合物d的生产相关。在一些实施例中，紫色杆菌素-bgc和化合物j-bgc两者都被改变，例如，破坏。在一些实施例中，天然产物的产量被降低例如至少约50％、约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或100％。

36、在一些实施例中，微生物具有增加的化合物分离产率。在一些实施例中，与参考微生物(例如是其中干扰化合物分离的天然产物的bgc没有改变的但在其他方面相同的微生物(例如野生型))相比，化合物的分离产率增加了约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或更多。

37、在另一个方面，本披露的特征在于生产具有式(a1)结构的化合物的方法，该方法包括在允许该化合物表达的条件下培养(例如，发酵)本文所述的微生物，从而生产该化合物。

38、在一些实施例中，微生物以约50l至约500l的规模，例如，约50l、约100l、约150l、约200l、约250l、约300l、约350l、约400l、约450l或约500l的规模培养(发酵)。在一些实施例中，微生物以约1,000l至约20,000l的规模，例如，约1,000l至约10,000l或约10,000l至约20,000l，例如约1,000l、约2,000l、约5,000l、约7,500l、约10,000l、约15,000l或约20,000l的规模培养(发酵)。

39、在一些实施例中，培养(例如，发酵)产生滴度为至少约200ml的化合物，例如，至少约250mg/ml、约300mg/l、约400mg/l、约500mg/l、约600mg/l、约700mg/l、约800mg/l、约900mg/l、约1000mg/l、约1100mg/l、约1200mg/l、约1300mg/l、约1400mg/l、约1500mg/l、约1600mg/l、约1700mg/l、约1800mg/l、约1900mg/l或约2000mg/l的化合物。

40、在一些实施例中，该方法进一步包括分离化合物，例如，达到至少约90％的纯度，例如，至少约95％、约96％、约97％、约98％或约99％的纯度，例如，如通过本文描述的方法确定。

41、在另一个方面，本披露的特征在于核酸，该核酸包含编码与具有式(a1)结构的化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列，其中该核苷酸序列可操作地连接至非原初启动子。

42、在一些实施例中，核酸位于微生物的染色体上，例如天然位于染色体上或稳定整合至染色体。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于生物合成基因簇(bgc)中。在一些实施例中，bgc是化合物(a1)-bgc。在一些实施例中，化合物(a1)-bgc具有图1中所示的基因组织。

43、在一些实施例中，bgc包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh中的一个或多个(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个或全部)或其同系物。在一些实施例中，bgc包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物。

44、在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg、frsh或其同系物中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa和frsb或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb和frsc或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc和frsd或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd和frse或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse和frsf或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf和frsg或其同系物的区域中。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列位于包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的区域中。

45、在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg、frsh或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa和frsb或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb和frsc或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc和frsd或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd和frse或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse和frsf或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf和frsg或其同系物的编码序列。在一些实施例中，编码与化合物的生产相关的多肽的核苷酸序列包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的编码序列。

46、在一些实施例中，核酸包含seq id no:317的核苷酸序列或其功能片段，或与seqid no:317的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约100、约90、约80、约70、约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5、或约2个核苷酸的核苷酸序列。

47、在一些实施例中，核酸包含与genbank登录号：bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段，或与bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段具有至少约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的核苷酸序列。

48、在某些实施例中，非原初启动子来自相同的微生物。在其他实施例中，非原初启动子来自不同的微生物。

49、在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子、nptii启动子、rbs启动子、j23119启动子、plpp启动子、ps12burk启动子、erme*启动子或pem7启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子、nptii启动子或rbs启动子。

50、在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:264-266、268-271或316中任一个的核苷酸序列或其功能片段。

51、在一些实施例中，非原初启动子包含viop启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:264的核苷酸序列或其功能片段。

52、在一些实施例中，非原初启动子包含nptii启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:265的核苷酸序列或其功能片段。

53、在一些实施例中，非原初启动子包含rbs启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:266的核苷酸序列或其功能片段。

54、在一些实施例中，非原初启动子包含j23119启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:316的核苷酸序列或其功能片段。

55、在一些实施例中，非原初启动子包含plpp启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:268的核苷酸序列或其功能片段。

56、在一些实施例中，非原初启动子包含pem7启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:269的核苷酸序列或其功能片段。

57、在一些实施例中，非原初启动子包含ps12burk启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:270的核苷酸序列或其功能片段。

58、在一些实施例中，非原初启动子包含erme*启动子。在一些实施例中，非原初启动子包含seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段，或与seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段具有至少80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性或差异不超过约60、约50、约40、约30、约20、约15、约10、约5或约2个核苷酸的核苷酸序列。在一些实施例中，非原初启动子包含以下或由以下组成：seq id no:271的核苷酸序列或其功能片段。

59、在一些实施例中，非原初启动子控制frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg或frsh中的一个或多个(例如，两个、三个、四个、五个、六个、七个或全部)或其同系物的转录。在一些实施例中，非原初启动子控制frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物的转录。在一些实施例中，非原初启动子插入frsa或其同系物的编码区上游，例如frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh中全部或其同系物的编码区上游。

60、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是非核糖体肽合成酶(nrps)或其功能片段。在一些实施例中，nrps是frsa、frsd、frse、frsf或frsg，或其同系物。

61、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是mbth样蛋白或其功能片段。在一些实施例中，mbth样蛋白是frsb或其同系物。

62、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是苹果酸脱氢酶。在一些实施例中，苹果酸脱氢酶是frsc或其同系物。

63、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多肽是羟化酶。在一些实施例中，羟化酶是frsh或其同系物。

64、在一些实施例中，核酸包含编码与化合物的生产相关的多个多肽的多个核苷酸序列。在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含多个nrps或其功能片段。在一些实施例中，多个nrps包含frsa、frsd、frse、frsf或frsg中的两个或更多个(例如，三个、四个或全部)或其同系物。在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含nrps、mbth样蛋白、苹果酸脱氢酶和羟化酶或其功能片段。

65、在一些实施例中，与化合物的生产相关的多个多肽包含frsa、frsb、frsc、frsd、frse、frsf、frsg和frsh或其同系物。

66、在另一个方面，本披露的特征在于包含编码与以下中一种或多种的生产相关的多肽的核苷酸序列的核酸：化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d。

67、在一些实施例中，核酸是分离的核酸。在一些实施例中，核酸是非天然存在的核酸。在一些实施例中，核酸是合成的核酸。在一些实施例中，核酸包含突变，例如，缺失。

68、在一些实施例中，核酸包含编码与以下中的一个或多个的生产相关的多个多肽的多个核苷酸序列：化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d。

69、在一些实施例中，核苷酸序列来自bgc。在一些实施例中，bgc是化合物j-bgc。在一些实施例中，化合物j-bgc具有图1中所示的基因组织。

70、在一些实施例中，核苷酸序列包含dis1、dis2、dis3、或dis4中的一个或多个(例如，两个、三个或全部)，或其同系物。在一些实施例中，bgc包含dis1、dis2、dis3和dis4或其同系物。

71、在一些实施例中，核酸包含与genbank登录号：bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段，或与bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段具有至少约75％，例如至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的核苷酸序列。

72、在另一个方面，本披露的特征在于包含本文所述核酸的载体。在另一个方面，本披露的特征在于包含本文所述的核酸或本文所述的载体的细胞。

73、在另一个方面，本披露的特征在于一种工程改造细胞的方法，该方法包括改变编码与以下中一种或多种的生产相关的多肽的核苷酸序列：化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d，从而工程改造细胞。

74、在一些实施例中，细胞是天然生产具有式(a1)结构的化合物的微生物。在一些实施例中，微生物是细菌，例如色杆菌属。在一些实施例中，微生物是痘苗色杆菌，例如痘苗色杆菌dsm 25150(＝atcc baa-2314、＝nrrl b-50840、＝mwu205)。

75、在一些实施例中，核苷酸序列被破坏，例如，至少一部分核苷酸序列被缺失。

76、在一些实施例中，核酸包含编码与以下中的一个或多个的生产相关的多个多肽的多个核苷酸序列：化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d。在一些实施例中，化合物j、化合物f5、化合物f3或化合物d中的一个或多个(例如，两个、三个或全部)的产量被降低例如至少约50％，例如至少约60％、约70％、约80％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或约100％。

77、在一些实施例中，核苷酸序列来自bgc。在一些实施例中，bgc是化合物j-bgc。在一些实施例中，化合物j-bgc具有图1中所示的基因组织。在一些实施例中，核苷酸序列包含dis1、dis2、dis3、或dis4中的一个或多个(例如，两个、三个或全部)，或其同系物。在一些实施例中，bgc包含dis1、dis2、dis3和dis4或其同系物。在一些实施例中，核酸包含与genbank登录号：bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段，或与bankit2437961bseq#1mw732719相关的核苷酸序列或其功能片段具有至少约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％或约99％同一性的核苷酸序列。

78、在一些实施例中，改变增加了化合物的分离产率。在一些实施例中，与参考微生物(例如是其中干扰化合物分离的天然产物的bgc没有改变的但在其他方面相同的微生物(例如野生型))相比，化合物的分离产率增加了约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或更多。

79、部分再氧化和制备抗体药物缀合物的方法

80、在另一个方面，本披露的特征在于用于生产部分再氧化的抗体或其抗原结合片段的方法，该方法包括：提供包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段；以及在氧化条件下储存包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段，从而生产部分再氧化的抗体或其抗原结合片段。

81、在一些实施例中，该方法进一步包括提供包含一个或多个加帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，一个或多个加帽半胱氨酸残基位于抗体或其抗原结合片段的重链恒定结构域中。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含四个加帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含两个加帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的ch1区中的加帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的每个ch1区中的加帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，加帽半胱氨酸残基是工程改造的表面暴露的半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的ch1区中残基152(eu编号)处的加帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，一个或多个加帽半胱氨酸残基用半胱氨酸或谷胱甘肽加帽。

82、在一些实施例中，该方法进一步包括还原一个或多个加帽半胱氨酸残基以提供包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，一个或多个脱帽半胱氨酸残基位于抗体或其抗原结合片段的重链恒定结构域中。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含四个脱帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含两个脱帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的ch1区中的脱帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的每个ch1区中的脱帽半胱氨酸残基。在一些实施例中，脱帽半胱氨酸残基是工程改造的表面暴露的半胱氨酸残基。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含位于抗体或其抗原结合片段的ch1区中残基152(eu编号)处的脱帽半胱氨酸残基。

83、在一些实施例中，该方法包括通过使包含一个或多个加帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段与还原洗涤缓冲液接触来还原一个或多个加帽半胱氨酸残基，从而提供包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或抗原结合片段。

84、在一些实施例中，还原洗涤缓冲液包含约5mm至约50mm半胱氨酸，例如，约10mm至约40mm、约20mm至约30mm、约5mm至约15mm、约5mm至约25mm、约5mm至约35mm、约5mm至约45mm、约40mm至约50mm、约30mm至约50mm、约20mm至约50mm、约10mm至约50mm、约10mm至约20mm、约15mm至约25mm、约25mm至约35mm、约30mm至约40mm，或约35mm至约45mm，例如约10mm、约12mm、约14mm、约16mm、约20mm、约25mm或约30mm。在一些实施例中，还原洗涤缓冲液包含约5mm至约15mm半胱氨酸，例如，约10mm半胱氨酸。

85、在一些实施例中，还原洗涤缓冲液具有约6.0至约7.5的ph，例如，约6.5至约7.2或约6.8至约7.0。在一些实施例中，还原洗涤缓冲液具有约6.8至约7.0的ph，例如，约6.9。

86、在一些实施例中，包含一个或多个加帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段与还原洗涤缓冲液的接触在柱(例如，阳离子交换色谱柱)上进行。

87、在一些实施例中，该方法进一步包括在与还原洗涤缓冲液接触后收集洗出液中的包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段。在一些实施例中，洗出液具有约5.5至约6.0的ph，例如，约5.8。在一些实施例中，洗出液中的包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段的浓度为约5g/l至25g/l，例如，约8g/l至约20g/l、约10g/l至约18g/l、约12g/l至约15g/l、约5g/l至约20g/l、约5g/l至约15g/l、约5g/l至约10g/l、约20g/l至约25g/l、约15g/l至约25g/l、约10g/l至约25g/l、约10g/l至约20g/l、约13g/l至约14g/l、约12g/l至约15g/l，例如，约5g/l、约6g/l、约7g/l、约8g/l、约9g/l、约10g/l、约11g/l、约12g/l、约13g/l、约13.5g/l、约14g/l、约15g/l、约16g/l、约17g/l、约18g/l、约19g/l、约20g/l、约21g/l、约22g/l、约23g/l、约24g/l或约25g/l。

88、在一些实施例中，将包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段在搅拌下储存在洗出液中。在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段在不搅拌的情况下储存在洗出液中。

89、在一些实施例中，将包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段储存在填充至最大约50％至约70％体积的容器中，例如，持续约12小时至约96小时，例如，约12小时至约84小时、约24小时至约84小时、约36小时至约72小时、约48小时至约60小时、约24小时至约72小时、约24小时至约60小时、约24小时至约48小时、约24小时至约36小时、约72小时至约84小时、约60小时至约84小时、约48小时至约84小时、约36小时至约84小时、约12小时至约36小时、约24小时至约48小时、约36小时至约60小时、约48小时至约72小时或约72小时至约96小时，例如，约12小时、约24小时、约36小时、约48小时、约60小时、约72小时、约84小时或约96小时。在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段储存在填充至最大约60％的容器中。在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段例如在不搅拌的情况下储存约48小时至约72小时。在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段例如在搅拌下储存约12小时至约36小时，例如约24小时。

90、在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段在室温下储存。在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段储存于约2℃至约8℃(例如约4℃)，例如，持续至少48小时(例如，至少约48小时至约96小时)。

91、在一些实施例中，包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段在空气覆盖情况下储存。

92、在一些实施例中，该方法进一步包括纯化部分再氧化的抗体或其抗原结合片段。

93、在一些实施例中，该方法进一步包括将接头-药物部分(例如，本文所述的接头-药物部分)缀合至部分再氧化的抗体或其抗原结合片段以产生抗体药物缀合物(例如，本文描述的抗体药物缀合物)。

94、在一些实施例中，该方法进一步包括预形成下式(b)的接头-药物部分：

95、r8-lb-(d)n(b)

96、其中：

97、d是gnaq抑制剂、gna11抑制剂或gnaq和gna11的抑制剂；

98、r8是反应性基团；

99、lb是可切割接头或不可切割接头，并且

100、n是1、2、3或4；

101、在一些实施例中，d是本文所述的gnaq抑制剂。在一些实施例中，d是本文所述的gna11抑制剂。在一些实施例中，d是如本文所述的gnaq和gna11的抑制剂。在一些实施例中，r是本文所述的反应性基团。在一些实施例中，lb是本文所述的可切割接头。在一些实施例中，lb是本文所述的不可切割接头。

102、在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段结合pmel17。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段是本文所述的抗体或其抗原结合片段。

103、在一些实施例中，该方法进一步包括纯化抗体药物缀合物。

104、在一些实施例中，该方法产生至少约75％，例如，至少约80％、约85％、约90％或约95％位点上偶联，例如，每条重链一个接头-药物部分(“hc1”)。在一些实施例中，该方法产生小于约25％，例如，至少约20％、约15％、约10％或约5％非位点偶联，例如，每条轻链一个接头-药物部分(“lc1”)和/或每条重链两个接头-药物部分(“hc2”)。在一些实施例中，该方法产生至少约70％，例如，至少约75％、约80％、约85％、约90％或约95％纯度，例如，通过非还原ce-sds确定。

105、在另一个方面，本披露的特征在于用于生产抗pmel17抗体药物缀合物的方法，该方法包括：

106、用还原洗涤缓冲液提供包含一个或多个加帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段，从而提供包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其抗原结合片段；

107、在氧化条件下储存包含一个或多个脱帽半胱氨酸残基的抗体或其片段，从而生产部分再氧化的抗体或其抗原结合片段；以及

108、将接头-药物部分缀合至部分再氧化的抗体或其抗原结合片段，从而产生抗pmel17抗体药物缀合物，

109、其中抗体或其抗原结合片段结合pmel17；以及

110、其中接头-药物部分具有下式(b)：

111、r8-lb-(d)n(b)

112、其中：

113、d是gnaq抑制剂、gna11抑制剂或gnaq和gna11的抑制剂；

114、r8是反应性基团；

115、lb是可切割接头或不可切割接头，并且

116、n是1、2、3或4。

117、抗体药物缀合物的配制品

118、在另一个方面，本披露的特征在于包含抗体药物缀合物、缓冲剂、稳定剂和表面活性剂的配制品，其中该配制品具有4.5至6.5的ph，其中该抗体药物缀合物包含式(c)

119、ab-(la-(d)n)y(c)

120、其中：

121、d是gnaq抑制剂、gna11抑制剂或gnaq和gna11的抑制剂；

122、ab是结合人pmel17蛋白的抗体或其抗原结合片段；

123、la是接头；

124、n是1、2、3或4，并且

125、y是1、2、3或4。

126、在实施例中，d是本文所述的gnaq抑制剂，例如，本文所述的gna11抑制剂或本文所述的gnaq和gna11的抑制剂。

127、在一个实施例中，抗体药物缀合物以以下浓度存在：约5mg/ml至约30mg/ml，例如，约10mg至约30mg、约15mg/ml至约25mg/ml、约18mg/ml至约22mg/ml、约10mg/ml至25mg/ml、约10mg/ml至约20mg/ml、约10mg/ml至约15mg/ml、约25mg至约30mg/ml、约20mg/ml至约30mg/ml、约5mg/ml至约15mg/ml、约15mg/ml至约25mg/ml或约18mg/ml至约22mg/ml，例如，约5mg/ml、约6mg/ml、约7mg/ml、约8mg/ml、约9mg/ml、约10mg/ml、约11mg/ml、约12mg/ml、约13mg/ml、约14mg/ml、约15mg/ml、约16mg/ml、约17mg/ml、约18mg/ml、约19mg/ml、约20mg/ml、约21mg/ml、约22mg/ml、约23mg/ml、约24mg/ml或约25mg/ml。

128、在实施例中，抗体药物缀合物以约15mg/ml至约25mg/ml，例如，约20mg/ml的浓度存在。

129、在实施例中，缓冲剂包含组氨酸。在实施例中，缓冲剂包含琥珀酸盐。在实施例中，缓冲剂以以下浓度存在：约5mm至约50mm，例如，约10mm至约40nm、约15mm至约35mm、约20mm至约30mm、约5mm至约40mm、约5mm至约30mm、约5mm至约20mm、约5mm至约15mm、约5mm至约10mm、约40mm至约50mm、约35mm至约50mm、约30mm至约50mm、约25mm至约50mm、约20mm至约50mm、约15mm至约50mm、约10mm至约50mm、约10mm至约20mm、约15mm至约25mm、约25mm至约35mm、约30mm至约40mm或约35mm至约45mm，例如，约5mm、约10mm、约15mm、约20mm、约25mm、约30mm、约35mm、约40mm、约45mm或约50mm。在实施例中，缓冲剂以约15mm至约25mm(例如，约20mm)的浓度存在。

130、在实施例中，稳定剂包括蔗糖。在实施例中，稳定剂包括海藻糖。在实施例中，稳定剂以以下浓度存在：约100mm至约500mm，例如，约150mm至约450mm、约200mm至约400mm、约250mm至约350mm、约100mm至约450mm、约100mm至约400mm、约100mm至约350mm、约100mm至约300mm、约100mm至约250mm、约100mm至约200mm、约100mm至约150mm、约450mm至约500mm、约400mm至约500mm、约350mm至约500mm、约300mm至约500mm、约250mm至约500mm、约200mm至约500mm、约150mm至约500mm、约150mm至约250mm、约200mm至约250mm、约200mm至约300mm、约300mm至约400mm或约350mm至约450mm，例如，约100mm、约150mm、约200mm、约240mm、约250mm、约300mm、约350mm、约400mm、约450mm或约500mm。在实施例中，稳定剂以约200mm至约300mm(例如，约240mm)的浓度存在。

131、在实施例中，表面活性剂包括聚山梨醇酯20。在实施例中，表面活性剂包括聚山梨醇酯80。在实施例中，表面活性剂以以下浓度存在：约0.01％至约0.06％，例如，约0.02％至约0.05％、约0.03％至约0.04％、约0.01％至约0.05％、约0.01％至约0.04％、约0.01％至约0.03％、约0.01％至约0.02％、约0.05％至约0.06％、约0.04％至约0.06％、约0.03％至约0.06％、约0.02％至约0.06％、约0.02％至约0.04％、约0.03％至约0.05％，例如，约0.01％、约0.02％、约0.03％、约0.04％、约0.05％或约0.06％。在实施例中，表面活性剂以约0.01％至约0.03％(例如，约0.02％)的浓度存在。

132、在实施例中，配制品的ph为约4.7至约5.3、约5.0至约6.0、约5.2至约5.8、约5.4至约5.6、约5.2至约6.0、约5.4至约6.0、约5.6至约6.0、约5.8至约6.0、约5至约5.8、约5至约5.6.0、约5至约5.4、约5至约5.2、约4.8至约5.2、约5.1至约5.3、约5.2至约5.4、约5.3至约5.5、约5.5至约5.7、约5.6至约5.8、约5.7至约5.9、约4.9至约5.5、约5.5至约6.1或约5.7至约6.3，例如，约4.5、约4.6、约4.7、约4.8、约4.9、约5、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4或约6.5。在实施例中，配制品具有约5.0至约5.6的ph，例如，约5.3。

133、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.0至约5.6的ph。

134、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.0至约5.6的ph。

135、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.3的ph。

136、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.3的ph。

137、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约4.7至约5.3的ph。

138、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约4.7至约5.3的ph。

139、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.0的ph。

140、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.0的ph。

141、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

142、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

143、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

144、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

145、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.03％至约0.05％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

146、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.03％至约0.05％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

147、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.04％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

148、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.04％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

149、在实施例中，配制品包含约5mg/ml至约15mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.03％至约0.05％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

150、在实施例中，配制品包含约5mg/ml至约15mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.03％至约0.05％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2至约5.8的ph。

151、在实施例中，配制品包含约10mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

152、在实施例中，配制品包含约10mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5的ph。

153、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.7至约6.3的ph。

154、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.7至约6.3的ph。

155、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约6.0的ph。

156、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约6.0的ph。

157、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯的表面活性剂，其中该配制品具有约4.9至约5.5的ph。

158、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约4.9至约5.5的ph。

159、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2的ph。

160、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.2的ph。

161、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5至约6.1的ph。

162、在实施例中，配制品包含约15mg/ml至约25mg/ml的抗体药物缀合物、约15mm至约25mm的包含组氨酸的缓冲剂、约200mm至约300mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.01％至约0.03％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.5至约6.1的ph。

163、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸或琥珀酸盐的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖或海藻糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的表面活性剂，其中该配制品具有约5.8的ph。

164、在实施例中，配制品包含约20mg/ml的抗体药物缀合物、约20mm的包含组氨酸的缓冲剂、约240mm的包含蔗糖的稳定剂，以及约0.02％的包含聚山梨醇酯20的表面活性剂，其中该配制品具有约5.8的ph。

165、在另一个方面，本披露的特征在于一种冻干配制品，其由本文所述的配制品冻干而成。

166、在实施例中，约5ml至约5.5ml的配制品被冻干。

167、在实施例中，与未冻干的但在其他方面相同的配制品相比，冻干配制品中的d在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10倍更稳定，例如，由cze确定。在实施例中，与未冻干的但在其他方面相同的配制品相比，冻干配制品中具有开环构象的d的百分比在约5℃、25℃或40℃储存约0、约4或约8周后低至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10倍，例如，由cze确定。

168、在实施例中，冻干配制品包含约80mg至约120mg(例如，约107mg)的抗体药物缀合物。

169、在实施例中，冻干配制品中的单体水平在约5℃、25℃或40℃储存约0、约4或约8周后为至少约95％，例如，至少约96％、97％、98％或99％，例如，由sec确定。

170、在实施例中，冻干配制品中的片段水平在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后小于约3％，例如小于约2.5％、2％、1.5％、1％或0.5％，例如，由sec确定。

171、在实施例中，冻干配制品中的聚集体水平在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后小于约3％，例如小于约2.5％、2％、1.5％、1％或0.5％，例如，由sec确定。

172、在实施例中，冻干配制品中的降解水平在约5℃、25℃或40℃储存约4周或约8周后小于约2％，例如小于约1.5％、1％或0.5％，例如，由sec确定。

173、在实施例中，冻干配制品中大于或等于10μm的颗粒的水平在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后小于约300个颗粒/ml，例如，小于约280个颗粒/ml、小于约260个颗粒/ml、小于约240个颗粒/ml、小于约220个颗粒/ml、小于约200个颗粒/ml、小于约180个颗粒/ml、小于约160个颗粒/ml、小于约140个颗粒/ml、120个颗粒/ml、小于约100个颗粒/ml、80个颗粒/ml、60个颗粒/ml、40个颗粒/ml、20个颗粒/ml、或10个颗粒/ml，例如，由不透光度确定。

174、在实施例中，冻干配制品中大于10μm的颗粒的水平在约5℃、25℃或40℃储存约4或约8周后增加不超过约3倍，例如，不超过约2.5、2、1.5、1或0.5倍，例如，由不透光度确定。

175、在实施例中，冻干配制品中大于25μm的颗粒的水平在约5℃、25℃或40℃储存约4或约8周后增加不超过约3倍，例如，不超过约2.5、2、1.5、1或0.5倍，例如，由不透光度确定。

176、在实施例中，冻干配制品中大于25μm的颗粒的水平在约5℃、25℃或40℃储存约0、约4或约8周后小于约20个颗粒/ml，例如，小于约15个颗粒/ml、10个颗粒/ml、5个颗粒/ml或2个颗粒/ml，例如，由不透光度确定。

177、在实施例中，冻干配制品中的杂质水平在约5℃、25℃或40℃储存约0、约4或约8周后小于约15％，例如小于约14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％，例如，由毛细管电泳确定。

178、在实施例中，冻干配制品中的杂质水平在约5℃、25℃或40℃储存约4周或约8周后增加不超过20％，例如不超过约15％、10％、5％、2％或1％，例如，由毛细管电泳确定。

179、在实施例中，冻干配制品中中性变体的水平在约5℃、25℃或40℃储存约0、约4或约8周后大于约50％，例如大于约55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％，例如，由毛细管区带电泳(cze)确定。

180、在实施例中，冻干配制品中中性变体的水平在约5℃、25℃或40℃储存约4周或约8周后降低不超过约20％，例如，不超过约15％、10％、5％或2％，例如，由cze确定。

181、在实施例中，冻干配制品中的酸性变体水平在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后小于约30％，例如小于约25％、20％、15％、5％或2％，例如，由cze确定。

182、在实施例中，冻干配制品中酸性变体的水平在约5℃、25℃或40℃储存约4周或约8周后增加不超过约50％，例如，不超过约40％、30％、20％、10％或5％，例如，由cze确定。

183、在实施例中，冻干配制品中的碱性变体水平在约5℃、25℃或40℃下储存约0、约4或约8周后小于约30％，例如小于约25％、20％、15％、5％或2％，例如，由cze确定。

184、在实施例中，冻干配制品中碱性变体的水平在约5℃、25℃或40℃储存约4周或约8周后增加不超过约50％，例如，不超过约40％、30％、20％、10％或5％，例如，由cze确定。

185、在实施例中，冻干配制品的效力在约5℃、25℃或40℃储存约8周后降低不超过约25％，例如不超过约20％、15％、10％、5％或2％，例如，由生物活性测定确定。

186、在实施例中，冻干配制品的渗透摩尔量是约200mosm/l至400mosm/l，例如，200mosm/l至300mosm/l、250mosm/l至350mosm/l、270mosm/l至330mosm/l、290mosm/l至310mosm/l、270mosm/l至350mosm/l、290mosm/l至350mosm/l、310mosm/l至350mosm/l、330mosm/l至350mosm/l、250mosm/l至330mosm/l、250mosm/l至310mosm/l、250mosm/l至290mosm/l、250mosm/l至270mosm/l、260mosm/l至280mosm/l、270mosm/l至290mosm/l、280mosm/l至300mosm/l、300mosm/l至320mosm/l、310mosm/l至330mosm/l、或320mosm/l至340mosm/l，例如，200mosm/l、250mosm/l、260mosm/l、270mosm/l、280mosm/l、290mosm/l、300mosm/l、310mosm/l、320mosm/l、330mosm/l、340mosm/l、350mosm/l、或400mosm/l。

187、在另一个方面，本披露的特征在于一种液体配制品，其由本文所述的冻干配制品重构。

188、在另一个方面，本披露的特征在于包含本文所述的冻干配制品的容器。

189、在实施例中，容器是小瓶，例如，25r玻璃小瓶。在实施例中，容器进一步包括塞子和盖子(例如，翻盖式铝盖)。

190、治疗方法

191、在另一个方面，本披露的特征在于一种治疗癌症的方法，该方法包括以1mg/kg至16mg/kg的剂量向有需要的受试者施用本文所述的抗体药物缀合物(adc)或本文所述的配制品，从而治疗癌症。

192、在实施例中，adc以2mg/kg至15mg/kg的剂量施用。在实施例中，adc以1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg、8mg/kg、12mg/kg或16mg/kg的剂量施用。在实施例中，每周一次、每两周一次或每四周一次施用adc。在实施例中，每两周施用一次adc。在实施例中，adc是静脉内施用的。

193、在实施例中，在施用adc之前已用tebentafusp治疗受试者。在实施例中，在施用adc之前受试者尚未用tebentafusp治疗。

194、在实施例中，癌症表达pmel17，含有gnaq或gna11基因的突变，或者黑色素瘤表达pmel17并含有gnaq、gna11或两者的突变。在实施例中，癌症是黑色素瘤。在实施例中，癌症是恶性黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤、眼黑色素瘤、眼癌、眼肿瘤、皮肤黑色素瘤或粘膜黑色素瘤。

195、在实施例中，adc具有以下结构：

196、

197、其中：

198、ab是与人pmel17蛋白结合的抗体或其抗原结合片段，并且y是1、2、3或4。在实施例中，y是2。

199、在实施例中，ab包含：

200、(a)seq id no:1的重链cdr1、seq id no:2的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:14的轻链cdr1、seq id no:15的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3；

201、(b)seq id no:4的重链cdr1、seq id no:2的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:14的轻链cdr1、seq id no:15的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3；

202、(c)seq id no:5的重链cdr1、seq id no:6的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:17的轻链cdr1、seq id no:18的轻链cdr2、以及seq id no:19的轻链cdr3；或者

203、(d)seq id no:7的重链cdr1、seq id no:8的重链cdr2、seq id no:9的重链cdr3、seq id no:20的轻链cdr1、seq id no:18的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3。

204、在实施例中，ab包含含有seq id no:10的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及含有seq id no:25的氨基酸序列的轻链可变区(vl)。在实施例中，ab包含含有seq id no:283的氨基酸序列的重链和含有seq id no:27的氨基酸序列的轻链。

205、在实施例中，ab包含含有n-糖基化位点的重链氨基酸序列。在实施例中，n-糖基化位点位于asn306。

206、在实施例中，该方法进一步包括测定一种或多种生物标志物的表达。在实施例中，该一种或多种生物标志物选自前黑素体蛋白17(pmel17)、磷酸化erk(perk)、分化簇8(cd8)、程序性死亡配体1(pd-l1)、双特异性磷酸酶6(dusp6)、ras鸟苷释放蛋白3(rasgrp3)或其任何组合。

207、在实施例中，在来自受试者的样品中测定一种或多种生物标志物的表达。在实施例中，样品是在施用adc之前、期间和/或之后从受试者获得的。在实施例中，样品是肿瘤样品。例如，肿瘤样品可以是归档的组织块或通过针吸活检获得。在实施例中，测定一种或多种生物标志物的mrna表达。在实施例中，测定一种或多种生物标志物的蛋白质表达。在实施例中，该方法进一步包括通过下一代dna测序检测一种或多种癌症相关基因、进行全转录组分析、测定一种或多种免疫和癌症相关基因的表达、或其组合。

208、在实施例中，该方法进一步包括评估来自受试者的样品中的无细胞dna(cfdna)。在实施例中，样品是在施用adc之前、期间和/或之后从受试者获得的。在实施例中，样品是血液样品。在实施例中，评估无细胞dna确定以下一项或多项：驱动突变状态、预测药效学、肿瘤突变负荷(tmb)或抗性标志物。

209、一方面，本披露的特征在于评估受试者(例如，本文所述的受试者)的疾病(例如，本文所述的疾病)的治疗(例如，本文所述的治疗)的方法，该方法包括根据本文描述的方法，在来自受试者的样品(例如本文所述的样品)中确定一种或多种生物标志物的表达和/或评估无细胞dna(cfdna)。

210、一方面，本披露的特征在于评估受试者(例如，本文所述的受试者)的疾病(例如，本文所述的疾病)的进展的方法，该方法包括根据本文描述的方法，在来自受试者的样品(例如本文所述的样品)中确定一种或多种生物标志物的表达和/或评估无细胞dna(cfdna)。

211、一方面，本披露的特征在于针对受试者(例如，本文所述的受试者)的疾病(例如，本文所述的疾病)选择治疗(例如，本文所述的治疗)的方法，该方法包括根据本文描述的方法，在来自受试者的样品(例如本文所述的样品)中确定一种或多种生物标志物的表达和/或评估无细胞dna(cfdna)。

212、一方面，本披露的特征在于针对疾病(例如，本文所述的疾病)的治疗(例如，本文所述的治疗)选择受试者(例如，本文所述的受试者)的方法，该方法包括根据本文描述的方法，在来自受试者的样品(例如本文所述的样品)中确定一种或多种生物标志物的表达和/或评估无细胞dna(cfdna)。

213、其他实施例

214、本文描述的方面和实施例可以包括以下实施例中的任一个。

215、在一些实施例中，结合pmel17的抗体或其抗原结合片段包含：

216、(a)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:1、4、5或7的重链cdr1(互补决定区1)，seq id no:2、6或8的重链cdr2(互补决定区2)，以及seq id no:3或9的重链cdr3(互补决定区3)；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:14、17或20的轻链cdr1(互补决定区1)，seq id no:15或18的轻链cdr2(互补决定区2)，以及seq id no:16或19的轻链cdr3(互补决定区3)；

217、(b)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:33、36、37或39的重链cdr1，seqid no:34、38或40的重链cdr2；seq id no:35或41的重链cdr3；seq id no:46、49或52的轻链cdr1；seq id no:47或50的轻链cdr2；以及seq id no:48或51的轻链cdr3；

218、(c)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:5、7、57或60的重链cdr1，seq idno:58、61或62的重链cdr2；seq id no:59或63的重链cdr3；seq id no:68、71或74的轻链cdr1；seq id no:69或72的轻链cdr2；以及seq id no:70或73的轻链cdr3；

219、(d)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:79、82、83或85的重链cdr1，seqid no:80、84或86的重链cdr2；seq id no:81或87的重链cdr3；seq id no:92、95或98的轻链cdr1；seq id no:93或96的轻链cdr2；以及seq id no:94或97的轻链cdr3；

220、(e)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:103、106、107或109的重链cdr1，seq id no:104、108或110的重链cdr2；seq id no:105或111的重链cdr3；seq id no:49、52或116的轻链cdr1；seq id no:47或50的轻链cdr2；以及seq id no:117或118的轻链cdr3；

221、(f)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:123、126、127或129的重链cdr1，seq id no:124、128或130的重链cdr2；seq id no:125或131的重链cdr3；seq id no:136、139或142的轻链cdr1；seq id no:137或140的轻链cdr2；以及seq id no:138或141的轻链cdr3；

222、(g)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:123、126、127或129的重链cdr1，seq id no:124、128或130的重链cdr2；seq id no:147或148的重链cdr3；seq id no:153、156或158的轻链cdr1；seq id no:50或154的轻链cdr2；以及seq id no:155或157的轻链cdr3；

223、(h)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:103、106、107或109的重链cdr1，seq id no:104、108或110的重链cdr2；seq id no:163或164的重链cdr3；seq id no:49、52或116的轻链cdr1；seq id no:47或50的轻链cdr2；以及seq id no:169或170的轻链cdr3；

224、(i)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:175、178、179或181的重链cdr1，seq id no:176、180或182的重链cdr2；seq id no:177或183的重链cdr3；seq id no:49、52或116的轻链cdr1；seq id no:47或50的轻链cdr2；以及seq id no:188或189的轻链cdr3；

225、(j)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:103、106、107或109的重链cdr1，seq id no:104、108或110的重链cdr2；seq id no:194或195的重链cdr3；seq id no:49、52或116的轻链cdr1；seq id no:47或50的轻链cdr2；以及seq id no:200或201的轻链cdr3；

226、(k)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206、209、210或212的重链cdr1，seq id no:207、211或213的重链cdr2；seq id no:208或214的重链cdr3；seq id no:153、156或158的轻链cdr1；seq id no:50或154的轻链cdr2；以及seq id no:219或220的轻链cdr3；

227、(l)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206、209、210或212的重链cdr1，seq id no:207、211或213的重链cdr2；seq id no:225或226的重链cdr3；seq id no:136、139或142的轻链cdr1；seq id no:137或140的轻链cdr2；以及seq id no:231或232的轻链cdr3；

228、(m)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206、209、210或212的hcdr1，seqid no:207、211或213的hcdr2，以及seq id no:237或238的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:243、245或247的lcdr1，seq id no:47或50的lcdr2，以及seq idno:244或246的lcdr3；

229、(n)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206、209、210或212的hcdr1，seqid no:207、211或213的hcdr2，以及seq id no:252或253的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:153、156或158的lcdr1，seq id no:50或154的lcdr2，以及seq idno:258或259的lcdr3；

230、(o)seq id no:1的重链cdr1、seq id no:2的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:14的轻链cdr1、seq id no:15的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3；

231、(p)seq id no:4的重链cdr1、seq id no:2的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:14的轻链cdr1、seq id no:15的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3；

232、(q)seq id no:5的重链cdr1、seq id no:6的重链cdr2、seq id no:3的重链cdr3、seq id no:17的轻链cdr1、seq id no:18的轻链cdr2、以及seq id no:19的轻链cdr3；

233、(r)seq id no:7的重链cdr1、seq id no:8的重链cdr2、seq id no:9的重链cdr3、seq id no:20的轻链cdr1、seq id no:18的轻链cdr2、以及seq id no:16的轻链cdr3；

234、(s)seq id no:33的重链cdr1、seq id no:34的重链cdr2、seq id no:35的重链cdr3、seq id no:46的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:48的轻链cdr3；

235、(t)seq id no:36的重链cdr1、seq id no:34的重链cdr2、seq id no:35的重链cdr3、seq id no:46的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:48的轻链cdr3；

236、(u)seq id no:37的重链cdr1、seq id no:38的重链cdr2、seq id no:35的重链cdr3、seq id no:49的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:51的轻链cdr3；

237、(v)seq id no:39的重链cdr1、seq id no:40的重链cdr2、seq id no:41的重链cdr3、seq id no:52的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:48的轻链cdr3；

238、(w)seq id no:57的重链cdr1、seq id no:58的重链cdr2、seq id no:59的重链cdr3、seq id no:68的轻链cdr1、seq id no:69的轻链cdr2、以及seq id no:70的轻链cdr3；

239、(x)seq id no:60的重链cdr1、seq id no:58的重链cdr2、seq id no:59的重链cdr3、seq id no:68的轻链cdr1、seq id no:69的轻链cdr2、以及seq id no:70的轻链cdr3；

240、(y)seq id no:5的重链cdr1、seq id no:61的重链cdr2、seq id no:59的重链cdr3、seq id no:71的轻链cdr1、seq id no:72的轻链cdr2、以及seq id no:73的轻链cdr3；

241、(z)seq id no:7的重链cdr1、seq id no:62的重链cdr2、seq id no:63的重链cdr3、seq id no:74的轻链cdr1、seq id no:72的轻链cdr2、以及seq id no:70的轻链cdr3；

242、(aa)seq id no:79的重链cdr1、seq id no:80的重链cdr2、seq id no:81的重链cdr3、seq id no:92的轻链cdr1、seq id no:93的轻链cdr2、以及seq id no:94的轻链cdr3；

243、(bb)seq id no:82的重链cdr1、seq id no:80的重链cdr2、seq id no:81的重链cdr3、seq id no:92的轻链cdr1、seq id no:93的轻链cdr2、以及seq id no:94的轻链cdr3；

244、(cc)seq id no:83的重链cdr1、seq id no:84的重链cdr2、seq id no:81的重链cdr3、seq id no:95的轻链cdr1、seq id no:96的轻链cdr2、以及seq id no:97的轻链cdr3；

245、(dd)seq id no:85的重链cdr1、seq id no:86的重链cdr2、seq id no:87的重链cdr3、seq id no:98的轻链cdr1、seq id no:96的轻链cdr2、以及seq id no:94的轻链cdr3；

246、(ee)seq id no:103的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:105的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1；seq id no:47的轻链cdr2；以及seq id no:117的轻链cdr3；

247、(ff)seq id no:106的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:105的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:117的轻链cdr3；

248、(gg)seq id no:107的重链cdr1、seq id no:108的重链cdr2、seq id no:105的重链cdr3、seq id no:49的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:118的轻链cdr3；

249、(hh)seq id no:109的重链cdr1、seq id no:110的重链cdr2、seq id no:111的重链cdr3、seq id no:52的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:117的轻链cdr3；

250、(ii)seq id no:123的重链cdr1、seq id no:124的重链cdr2、seq id no:125的重链cdr3、seq id no:136的轻链cdr1、seq id no:137的轻链cdr2、以及seq id no:138的轻链cdr3；

251、(jj)seq id no:126的重链cdr1、seq id no:124的重链cdr2、seq id no:125的重链cdr3、seq id no:136的轻链cdr1、seq id no:137的轻链cdr2、以及seq id no:138的轻链cdr3；

252、(kk)seq id no:127的重链cdr1、seq id no:128的重链cdr2、seq id no:125的重链cdr3、seq id no:139的轻链cdr1、seq id no:140的轻链cdr2、以及seq id no:141的轻链cdr3；

253、(ll)seq id no:129的重链cdr1、seq id no:130的重链cdr2、seq id no:131的重链cdr3、seq id no:142的轻链cdr1、seq id no:140的轻链cdr2、以及seq id no:138的轻链cdr3；

254、(mm)seq id no:123的重链cdr1、seq id no:124的重链cdr2、seq id no:147的重链cdr3、seq id no:153的轻链cdr1、seq id no:154的轻链cdr2、以及seq id no:155的轻链cdr3；

255、(nn)seq id no:126的重链cdr1、seq id no:124的重链cdr2、seq id no:147的重链cdr3、seq id no:153的轻链cdr1、seq id no:154的轻链cdr2、以及seq id no:155的轻链cdr3；

256、(oo)seq id no:127的重链cdr1、seq id no:128的重链cdr2、seq id no:147的重链cdr3、seq id no:156的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:157的轻链cdr3；

257、(pp)seq id no:129的重链cdr1、seq id no:130的重链cdr2、seq id no:148的重链cdr3、seq id no:158的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:155的轻链cdr3；

258、(qq)seq id no:103的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:163的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:169的轻链cdr3；

259、(rr)seq id no:106的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:163的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:169的轻链cdr3；

260、(ss)seq id no:107的重链cdr1、seq id no:108的重链cdr2、seq id no:163的重链cdr3、seq id no:49的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:170的轻链cdr3；

261、(tt)seq id no:109的重链cdr1、seq id no:110的重链cdr2、seq id no:164的重链cdr3、seq id no:52的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:169的轻链cdr3；

262、(uu)seq id no:175的重链cdr1、seq id no:176的重链cdr2、seq id no:177的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:188的轻链cdr3；

263、(vv)seq id no:178的重链cdr1、seq id no:176的重链cdr2、seq id no:177的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:188的轻链cdr3；

264、(ww)seq id no:179的重链cdr1、seq id no:180的重链cdr2、seq id no:177的重链cdr3、seq id no:49的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:189的轻链cdr3；

265、(xx)seq id no:181的重链cdr1、seq id no:182的重链cdr2；seq id no:183的重链cdr3、seq id no:52的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:188的轻链cdr3；

266、(yy)seq id no:103的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:194的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:200的轻链cdr3；

267、(zz)seq id no:106的重链cdr1、seq id no:104的重链cdr2、seq id no:194的重链cdr3、seq id no:116的轻链cdr1、seq id no:47的轻链cdr2、以及seq id no:200的轻链cdr3；

268、(aaa)seq id no:107的重链cdr1、seq id no:108的重链cdr2、seq id no:194的重链cdr3、seq id no:49的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:201的轻链cdr3；

269、(bbb)seq id no:109的重链cdr1、seq id no:110的重链cdr2、seq id no:195的重链cdr3、seq id no:52的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:200的轻链cdr3；

270、(ccc)seq id no:206的重链cdr1、seq id no:207的重链cdr2、seq id no:208的重链cdr3、seq id no:153的轻链cdr1、seq id no:154的轻链cdr2、以及seq id no:219的轻链cdr3；

271、(ddd)seq id no:209的重链cdr1、seq id no:207的重链cdr2、seq id no:208的重链cdr3、seq id no:153的轻链cdr1、seq id no:154的轻链cdr2、以及seq id no:219的轻链cdr3；

272、(eee)seq id no:210的重链cdr1、seq id no:211的重链cdr2、seq id no:208的重链cdr3、seq id no:156的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:220的轻链cdr3；

273、(fff)seq id no:212的重链cdr1、seq id no:213的重链cdr2、seq id no:214的重链cdr3、seq id no:158的轻链cdr1、seq id no:50的轻链cdr2、以及seq id no:219的轻链cdr3；

274、(ggg)seq id no:206的重链cdr1、seq id no:207的重链cdr2、seq id no:225的重链cdr3、seq id no:136的轻链cdr1、seq id no:137的轻链cdr2、以及seq id no:231的轻链cdr3；

275、(hhh)seq id no:209的重链cdr1、seq id no:207的重链cdr2、seq id no:225的重链cdr3、seq id no:136的轻链cdr1、seq id no:137的轻链cdr2、以及seq id no:231的轻链cdr3；

276、(iii)seq id no:210的重链cdr1、seq id no:211的重链cdr2、seq id no:225的重链cdr3、seq id no:139的轻链cdr1、seq id no:140的轻链cdr2、以及seq id no:232的轻链cdr3；

277、(jjj)seq id no:212的重链cdr1、seq id no:213的重链cdr2、seq id no:226的重链cdr3、seq id no:142的轻链cdr1；seq id no:140的轻链cdr2；以及seq id no:231的轻链cdr3；

278、(kkk)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206的hcdr1、seq id no:207的hcdr2、以及seq id no:237的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:243的lcdr1、seq id no:47的lcdr2、以及seq id no:244的lcdr3；

279、(lll)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:209的hcdr1、seq id no:207的hcdr2、以及seq id no:237的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:243的lcdr1、seq id no:47的lcdr2、以及seq id no:244的lcdr3；

280、(mmm)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:210的hcdr1、seq id no:211的hcdr2、以及seq id no:237的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:245的lcdr1、seq id no:50的lcdr2、以及seq id no:246的lcdr3；

281、(nnn)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:212的hcdr1、seq id no:213的hcdr2、和seq id no:238的hcdr3；和轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:247的lcdr1、seq id no:50的lcdr2、和seq id no:244的lcdr3；

282、(ooo)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:206的hcdr1、seq id no:207的hcdr2、以及seq id no:252的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:153的lcdr1、seq id no:154的lcdr2、以及seq id no:258的lcdr3；

283、(ppp)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:209的hcdr1、seq id no:207的hcdr2、以及seq id no:252的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:153的lcdr1、seq id no:154的lcdr2、以及seq id no:258的lcdr3；

284、(qqq)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:210的hcdr1、seq id no:211的hcdr2、以及seq id no:252的hcdr3；以及轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:156的lcdr1、seq id no:50的lcdr2、以及seq id no:259的lcdr3；或者

285、(rrr)重链可变区，所述重链可变区包含seq id no:212的hcdr1、seq id no:213的hcdr2、和seq id no:253的hcdr3；和轻链可变区，所述轻链可变区包含seq id no:158的lcdr1、seq id no:50的lcdr2、和seq id no:258的lcdr3。

286、在一些实施例中，结合pmel17的抗体或其抗原结合片段包含：

287、(a)包含seq id no:10的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:21的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

288、(b)包含seq id no:10的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:25的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

289、(c)包含seq id no:10的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:29的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

290、(d)包含seq id no:42的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:53的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

291、(e)包含seq id no:64的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:75的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

292、(f)包含seq id no:88的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:99的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

293、(g)包含seq id no:112的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:119的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

294、(h)包含seq id no:132的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:143的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

295、(i)包含seq id no:149的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:159的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

296、(j)包含seq id no:165的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:171的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

297、(k)包含seq id no:184的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:190的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

298、(l)包含seq id no:196的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:202的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

299、(m)包含seq id no:215的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:221的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

300、(n)包含seq id no:227的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:233的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；

301、(o)包含seq id no:239的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:248的氨基酸序列的轻链可变区(vl)；或者

302、(p)包含seq id no:254的氨基酸序列的重链可变区(vh)以及包含seq id no:260的氨基酸序列的轻链可变区(vl)。

303、在一些实施例中，结合pmel17的抗体或其抗原结合片段包含：

304、(a)包含seq id no:12的氨基酸序列的重链和包含seq id no:23的氨基酸序列的轻链；

305、(b)包含seq id no:12的氨基酸序列的重链和包含seq id no:27的氨基酸序列的轻链；

306、(c)包含seq id no:12的氨基酸序列的重链和包含seq id no:31的氨基酸序列的轻链；

307、(d)包含seq id no:44的氨基酸序列的重链和包含seq id no:55的氨基酸序列的轻链；

308、(e)包含seq id no:66的氨基酸序列的重链和包含seq id no:77的氨基酸序列的轻链；

309、(f)包含seq id no:90的氨基酸序列的重链和包含seq id no:101的氨基酸序列的轻链；

310、(g)包含seq id no:114的氨基酸序列的重链和包含seq id no:121的氨基酸序列的轻链；

311、(h)包含seq id no:134的氨基酸序列的重链和包含seq id no:145的氨基酸序列的轻链；

312、(i)包含seq id no:151的氨基酸序列的重链和包含seq id no:161的氨基酸序列的轻链；

313、(j)包含seq id no:167的氨基酸序列的重链和包含seq id no:173的氨基酸序列的轻链；

314、(k)包含seq id no:186的氨基酸序列的重链和包含seq id no:192的氨基酸序列的轻链；

315、(l)包含seq id no:198的氨基酸序列的重链和包含seq id no:204的氨基酸序列的轻链；

316、(m)包含seq id no:217的氨基酸序列的重链和包含seq id no:223的氨基酸序列的轻链；

317、(n)包含seq id no:229的氨基酸序列的重链和包含seq id no:235的氨基酸序列的轻链；

318、(o)包含seq id no:241的氨基酸序列的重链和包含seq id no:250的氨基酸序列的轻链；

319、(p)包含seq id no:256的氨基酸序列的重链和包含seq id no:262的氨基酸序列的轻链；

320、(q)包含seq id no:283的氨基酸序列的重链和包含seq id no:27的氨基酸序列的轻链；

321、(r)包含seq id no:283的氨基酸序列的重链和包含seq id no:31的氨基酸序列的轻链；

322、(s)包含seq id no:315的氨基酸序列的重链和包含seq id no:101的氨基酸序列的轻链。

323、在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含一个或多个半胱氨酸取代。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含一个或多个半胱氨酸取代，该一个或多个半胱氨酸取代选自该抗体或其抗原结合片段的重链的e152c、s375c、或e152c和s375c二者，其中位置根据eu系统编号。在一些实施例中，抗体或其抗原结合片段包含抗体或其抗原结合片段的重链的e152c取代，其中位置根据eu系统编号。

324、在一些实施例中，抗体分子是单克隆抗体。在一些实施例中，抗体分子是分离的抗体。在一些实施例中，抗体分子是合成的抗体。在一些实施例中，抗体分子是工程改造的抗体。

325、在一些实施例中，抗体或抗原结合片段由本文描述的核酸编码。在一些实施例中，核酸包含seq id no:13、24、28、32、45、56、67、78、91、102、115、122、135、146、152、162、168、174、187、193、199、205、218、224、230、236、242、251、257、263、319或320的核苷酸序列。在一些实施例中，核酸存在于载体中，例如，本文描述的载体中。在一些实施例中，核酸或载体存在于宿主细胞中，例如，本文描述的宿主细胞中。

326、在一些实施例中，抗体或抗原结合片段通过包括培养宿主细胞和从细胞培养物回收抗体或抗原结合片段的方法产生。在一些实施例中，从细胞培养物回收抗体包括以下步骤：去除细胞并过滤该培养物；通过亲和色谱法纯化该培养物；通过将ph调整至3.4-3.6将该培养物中的任何病毒灭活，然后将ph再调整至5.8-6.2并且过滤该培养物；通过阳离子交换色谱法纯化该培养物并且对该培养物进行柱上还原；对该培养物进行阴离子交换色谱法；通过纳米过滤去除病毒；过滤含有该抗体的该培养物；并获得经纯化的抗体。

327、在一些实施例中，抗体药物缀合物是通过本文描述的方法制备的抗体药物缀合物。

328、在一些实施例中，抗体药物缀合物包含式(c)

329、ab-(la-(d)n)y(c)

330、其中：

331、d是gnaq抑制剂、gna11抑制剂或gnaq和gna11的抑制剂；

332、ab是结合人pmel17蛋白的抗体或其抗原结合片段；

333、la是接头；

334、n是1、2、3或4，并且

335、y是1、2、3或4。

336、在一些实施例中，所述n是1。在一些实施例中，所述y是约1至约4。在一些实施例中，所述接头是可切割接头或不可切割接头。在一些实施例中，接头包含valcit肽接头。在一些

337、在一些实施例中，所述药物部分是gnaq和gna11的抑制剂。

338、在一些实施例中，d是

339、

340、在一些实施例中，抗体药物缀合物具有以下结构，

341、

342、在一些实施例中，抗体药物缀合物具有下式(c-2)：

343、

344、其中：

345、r0是甲基或乙基；

346、r1是甲基或异丙基；

347、r2是甲基或乙基；

348、ab是结合人pmel17蛋白的抗体或其抗原结合片段；x1是二价偶联基团；

349、x2是自杀式间隔子；

350、l1是二价肽接头；

351、l2是键或接头，并且

352、y是1、2、3或4。

353、在一些实施例中，抗体药物缀合物存在于包含抗体药物缀合物和药学上可接受的载剂的药物组合物中。在一些实施例中，抗体药物缀合物存在于本文描述的配制品中。

354、在一些实施例中，抗体药物缀合物或配制品用作药物。

355、在一些实施例中，抗体药物缀合物或配制品用于治疗或预防有需要的患者的癌症的方法中，该方法包括向所述患者施用抗体药物缀合物或配制品，其中癌症表达pmel17，含有gnaq或gna11基因突变，或者癌症表达pmel17，并含有gnaq突变、gna11突变、或两者的突变。在一些实施例中，癌症是癌(例如肝细胞癌)、肉瘤、白血病、淋巴瘤、眼癌、眼部肿瘤、黑色素瘤(例如葡萄膜黑色素瘤、非葡萄膜黑色素瘤、恶性黑色素瘤、眼部黑色素瘤、皮下黑色素瘤、皮肤黑色素瘤或粘膜黑色素瘤)或其转移性癌症。

356、在一些实施例中，将抗体药物缀合物或配制品与一种或多种另外的治疗性化合物组合施用于患者。

357、在一些实施例中，一种或多种另外的治疗性化合物选自标准护理化学治疗剂、mdm2抑制剂、mrc2抑制剂、pkc抑制剂、mapk抑制剂、共刺激分子或检查点抑制剂。

358、在一些实施例中，共刺激分子选自ox40、cd2、cd27、cds、icam-1、lfa-1(cd11a/cd18)、icos(cd278)、4-1bb(cd137)、gitr、cd30、cd40、baffr、hvem、cd7、light、nkg2c、slamf7、nkp80、cd160、b7-h3、sting或cd83配体的激动剂。

359、在一些实施例中，检查点抑制剂选自pd-1、pd-l1、pd-l2、ctla4、tim3、lag3、vista、btla、tigit、lair1、cd160、2b4和/或tgfrβ的抑制剂。