靶向血管紧张素原的核酸及其用途的制作方法

本发明属于生物，具体地，涉及靶向血管紧张素原的核酸及其用途。

背景技术：

1、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,raas)是一种由多种蛋白酶和短肽组成的复杂网络调节系统，是心血管和肾功能的一种重要调节因素，该系统的过度激活是很多常见病理状况的中心环节，包括高血压、心力衰竭和肾脏疾病(lu h et al.hypertension res.39:492-500，2016)。raas途径始于肾素使其底物血管紧张素原(angiotensinogen)分解，产生无活性肽血管紧张素i(angiotensin i,ang i)，随后内皮细胞中的血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ace)将angⅰ转化为血管紧张素ⅱ(angiotensin ii,ang ii)，angⅱ的ace活化在肺部最为广泛，angⅱ介导血管收缩以及肾上腺释放醛固酮，从而导致钠潴留和血压升高。

2、raas抑制剂包括ace抑制剂、angⅱ受体拮抗剂(angiotensin ii receptorblockers，arbs)、醛固酮拮抗剂和直接肾素抑制剂等，raas抑制剂是目前高血压治疗、心力衰竭预防和治疗的重要药物，临床上应用广泛(schmieder re et al.lancet.369(9568):1208-1219；antonaccio mj.j pharmcol.14:29-45,1983；ruiz-ortega m et al.trendscardiovasc med.17(1):19-25,2007；matsubara h.cric res.83(12):1182-1191,1998)。ace抑制剂及angⅱ受体拮抗剂能够激活代偿通路从而导致血管紧张素再度活化和醛固酮突围造成血液ang ii及醛固酮浓度回到治疗前甚至更高的水平(nobakht n et al.natrev nephrol.7:356-359,2011；bomback as and klemmer pj.nat clin practnephrol.3:486-492,2007)。这可能是顽固性高血压和心衰病人对raas抑制药物反应不佳的重要因素(narayan h and webb dj.curr hypertens rep.18:34,2016,roig e etal.eur heart j.21:53-57,2000)，所以，更为有效的治疗策略应该是靶向raas酶和受体的上游，避免限制治疗效果的代偿机制和胞内分泌通路(mullick ae etal.hypertension.70(3):566-576,2017)。

3、血管紧张素原(angiotensinogen,agt，又为serpina8，anhu,hflt1)是所有血管紧张素的共同前体(wu c et al.am j med sci.4:183-190,2011；lu h et al.hypertensres 39：492-500，2016)，肝脏是血液agt的主要来源(yiannilouris g etal.hypertension.66:836-842,2015；matsusaka t et al.j am soc nephrol.23:1181-1189,2012)。多项研究证实，血液agt浓度升高和高血压呈显著正相关(fasola af et al.jappl physiol.21:1709-1712,1966)，降低血液agt浓度能够抑制raas通路的活性并导致血压下降(olearczyk j et al.hypertension res.37:405-412,2014)，静脉输注agt给大鼠能增高血压，并可通过采用抗agt抗体治疗逆转(menard j et al.hypertension.18:705-707,1991)，agt-基因敲除小鼠血压降低，而agt-过度表达导致血压上升(kim hs etal.proc natl acad sci usa92:2735-2739,1995；kimura s et al.embo j.11:821-827,1982)。通过调控agt的水平治疗高血压是很有希望的研发靶点，然而采用传统手段靶向agt遇到诸多困难(morgan l et al.int j biochem cell biol.28:1211-1222,1996)。

4、rna干扰(rna interference,rnai)指在进化过程中高度保守的、由双链小干扰核糖核酸(small interference rna，sirna)诱发的同源mrna高效特异性降解的现象。因此，研究开发靶向agt的sirna具有重要的意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种新的靶向agt的核酸及其用途。

2、本发明第一方面提供了一种核酸，该核酸包括正义链和反义链，其中，所述正义链含有与seq id no：1-26任意一项所示序列具有80％以上的序列同一性的序列，所述反义链含有与seq id no：27-52任意一项所示序列具有80％以上的序列同一性的序列。

3、本发明第二方面提供了一种靶向药物递送系统，该靶向药物递送系统包括靶向基团、连接基团和通过连接基团与靶向基团连接的如上所述的核酸。

4、本发明第三方面提供了一种药物组合物，该药物组合物含有如上所述的核酸或靶向药物递送系统和药学上可接受的载体。

5、本发明第四方面提供了一种抑制细胞中血管紧张素基因的表达的方法，该方法包括：使所述细胞与如上所述的核酸、靶向药物递送系统或药物组合物接触，以抑制所述细胞中的血管紧张素基因的表达。

6、本发明第五方面提供了如上所述的核酸、靶向药物递送系统或药物组合物在以下任一方面的用途：1)治疗和/或预防与血管紧张素相关的疾病；2)制备用于治疗和/或预防与血管紧张素相关的疾病的药物。

7、本发明的发明人发现，肾素-血管紧张素-醛固酮系统中，agt是rnai最适合的靶点，因此，本发明提供了一种新的靶向agt的核酸及其用途。本发明的核酸能够有效抑制agt的表达，且能有效降低raas激活程度，从而能够用于治疗和/或预防高血压等与agt相关的疾病。

技术特征：

1.一种核酸，该核酸包括正义链和反义链，其特征在于，所述正义链含有与seq id no：1～26任意一项所示序列具有80％以上的序列同一性的序列，所述反义链含有与seq idno：27～52任意一项所示序列具有80％以上的序列同一性的序列。

2.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链含有与seq id no：27～52任意一项所示序列相差不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，所述正义链含有与所述反义链至少部分互补的核苷酸序列；任选地，所述正义链含有与seq id no：1～26任意一项所示序列相差不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸。

3.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链含有与seq id no：29、32、38、40、41、42、43、44中任意一项所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列，所述正义链含有与所述反义链至少部分互补的核苷酸序列；任选地，所述正义链含有与seq id no：3、6、12、14、15、16、17、18中任意一项所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链含有与seq id no：29、40、41、43、44中任意一项所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列，所述正义链含有与所述反义链至少部分互补的核苷酸序列；任选地，所述正义链含有与seq id no：3、14、15、17、18中任意一项所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列。

5.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链含有与seq id no：40所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列，所述正义链含有与所述反义链至少部分互补的核苷酸序列；任选地，所述正义链含有与seq id no：14所示序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列。

6.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述核酸中的gc含量为20～45％，更优选为20～35％。

7.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述核酸中的至少一个核苷酸是修饰的核苷酸或包括修饰的间键；

8.根据权利要求7所述的核酸，其中，所述反义链从5'端计数的第5和6处核苷酸为2'-o-甲基核苷酸，第7处核苷酸为2'-氟核苷酸；

9.根据权利要求7或8所述的核酸，其中，所述正义链从5'端计数的第2处核苷酸为2'-o-甲基核苷酸或2'-氟核苷酸，优选为2'-o-甲基核苷酸；

10.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链具有如表3或表8中任意一种所示的反义链序列相差不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸，所述正义链具有如表3或表8中任意一种所示的正义链序列相差不超过3个核苷酸的至少15个连续核苷酸；优选地，所述正义链和反义链形成具有表4或表8中任意一种所示的sirna。

11.根据权利要求1所述的核酸，其中，所述反义链从5'端到3'端含有与以下核苷酸序列相差0个、1个或2个核苷酸的核苷酸序列：

12.一种靶向药物递送系统，其特征在于，该靶向药物递送系统包括靶向基团、连接基团和通过连接基团与靶向基团连接的权利要求1～11中任一项所述的核酸。

13.根据权利要求12所述的靶向药物递送系统，其中，该靶向药物递送系统包括配体和与所述配体连接的所述的核酸；优选所述配体为是galnac衍生物；更优选所述配体是通过单链、双链或三链支链接头连接的一种或多种galnac衍生物；进一步优选该靶向药物递送系统的结构如下式所示：

14.一种药物组合物，其特征在于，该药物组合物含有权利要求1～11中任一项所述的核酸或权利要求12～13中任一项所述的靶向药物递送系统和药学上可接受的载体。

15.一种抑制细胞中血管紧张素基因的表达的方法，该方法包括：使所述细胞与权利要求1～11中任一项所述的核酸、权利要求12～13中任一项所述的靶向药物递送系统或权利要求14所述的药物组合物接触，以抑制所述细胞中的血管紧张素基因的表达。

16.权利要求1～11中任一项所述的核酸、权利要求12～13中任一项所述的靶向药物递送系统或权利要求14所述的药物组合物在以下任一方面的用途：

17.根据权利要求16所述的用途，其中，所述疾病为：

18.根据权利要求16所述的用途，其中，所述疾病为肾素-血管紧张素-醛固酮系统过度激活相关疾病。

19.根据权利要求16所述的用途，其中，所述疾病选自高血压、高血压症、临界性高血压症、原发性高血压症、继发性高血压症、单纯收缩期或舒张期高血压症、妊娠相关高血压症、糖尿病性高血压症、顽固性高血压症、难治性高血压症、阵发性高血压症、肾血管性高血压症、戈德布拉特氏高血压症、与低血浆肾素活性或血浆肾素浓度相关的高血压症、高眼压、青光眼、肺动脉高血压症、门静脉高血压症、全身静脉高血压症、收缩期高血压症、不稳定性高血压症；高血压性心脏病、高血压性肾病、动脉粥样硬化、动脉硬化、血管病、糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病变、慢性心力衰竭、心肌病、糖尿病性心肌病、肾小球硬化症、主动脉缩窄、主动脉瘤、心室纤维化、心力衰竭、心肌梗塞、心绞痛、中风、肾病、肾衰竭、系统性硬化症、宫内生长受限、胎儿生长受限、肥胖、肝脂肪变性/脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、非酒精脂肪性肝病、葡萄糖不耐症、2型糖尿病和代谢综合征中的一种或几种。

20.根据权利要求16所述的用途，其中，所述核酸、所述的靶向药物递送系统或所述的药物组合物通过皮下给药、静脉内给药和/或肌肉内给药而施用于受试者。

技术总结本发明涉及生物技术领域，公开了一种靶向血管紧张素原的核酸及其用途。本发明的核酸能够有效抑制AGT的表达，且能有效降低RAAS激活程度，从而能够用于治疗和/或预防高血压等与AGT相关的疾病。技术研发人员：蒋伟文,郁东,兰涛受保护的技术使用者：施能康医药科技（苏州）有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/17